齧歯動物のCistancheDeserticolaによって引き起こされる抗侵害受容および抗炎症活性

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Li-Wei Lin、et al

概要

本研究では、Cistancheニクジュヨウ（ハマウツボ科、略してCD）を50％エタノールで抽出し、酢酸エチル、n-ブタノール、および水で整然と分離しました。 鎮痛剤とアンチ-炎症性CD抽出物と3層の効果は、いくつかの動物モデルで評価されました。 CD(Cistancheニクジュヨウ）抽出物は、1％の酢酸によって引き起こされる身もだえ反応と1％のホルマリンによって引き起こされる二相性の舐め反応を効果的に抑制し、1％のカラギーナンによって引き起こされる浮腫を軽減しましたが、ザイモサンは軽減しませんでした。 さらに、CDのブタン酸層と水層(Cistancheニクジュヨウ）抽出物は、酢酸とホルマリンによって引き起こされる痛みを軽減するだけでなく、カラギーナンによって誘発される浮腫も軽減しました。 CDのブタン酸層の影響(Cistancheニクジュヨウ）抽出物は水層の抽出物よりも優れています。 さらに、CDのブタン酸層の効果(Cistancheニクジュヨウ）抽出物はナロキソンによって廃止されませんでした。 これらの結果は、鎮痛剤とアンチ-炎症性効果、およびブタン酸層と水層は主に有効成分です。 さらに、鎮痛剤とアンチ-炎症性CDのブタン酸層の効果(Cistancheニクジュヨウ）抽出物はオピオイド受容体や免疫系とは関係がありませんでした。

キーワード：ニクジュヨウ; 鎮痛作用; 抗炎症作用

1.はじめに

Cistancheニクジュヨウ馬。 （ハマウツボ科、略してCD）、中国の在来ハーブは、鎮静剤、鎮痛剤、免疫増強剤などのさまざまな治療法の伝統医学で広く使用されています（Lee、1986）。 現代の薬理学的研究はCDを指摘しました(Cistancheニクジュヨウ）抽出物は、免疫増強（Chin and Su、1993）、フリーラジカル捕捉効果（Hsu et al。、1995）、およびSOD活性の増加（Chang et al。、1995）を持っていました。 最近の研究では、フリーラジカル反応が炎症過程で重要な役割を果たしました（Arrigoni-Martelli、1985）。 したがって、本研究は、CDの推定鎮痛効果を調査することを試みた。(Cistancheニクジュヨウ）酢酸誘発の身もだえテスト（Taber et al。、1969）およびホルマリン誘発の舐めテスト（Shibata et al。、1989）でマウスの抽出物。 第二に、私たちはまた、可能性を研究しましたアンチ-炎症性CDの活動(Cistancheニクジュヨウ）カラギーナン誘発性浮腫検査による古典的な炎症過程（Winter et al。、1962）およびザイモサン誘発性浮腫検査による代替炎症過程（Tarayre et al。、1989）に関する抽出物。 最後に、さまざまな溶媒で分離されたCD抽出物の活性層を研究しました。 '

2。材料と方法

2.1。 植物材料と抽出物

CDの根茎(Cistancheニクジュヨウ）台湾市場から購入し、MTHsieh教授によって確認されました。 バウチャーのサンプル（番号CMC-ICPS -000626）は、将来の参考のために、中国医科大学の中国薬学研究所の植物標本室に保存されました。 CDの抽出と分離(Cistancheニクジュヨウ）以前の報告（Lu、1998）と同様に続いた。 CD(Cistancheニクジュヨウ）抽出物（34.2パーセントの収率）および3層* /酢酸エチル層、ブタノール層および水層（それらの収率はそれぞれ3.4、10.2、30.6パーセント）（それぞれCDE、CDB、およびCDWと略記）*/に使用された抽出物の調製。

2.2。 抽出物と薬物の調製

CD(Cistancheニクジュヨウ）抽出物（{{0}}。1、0.3、1 g / kg）および3層のCD(Cistancheニクジュヨウ）抽出物（{{0}}。0 3、0。1、0。3 g / kg）を0.5％のカルボキシメチルセルロースに溶解し、60分前に経口投与しましたインデューサーの注射に。 アセチルサリチル酸（ASA）（100、300 mg / kg）およびインドメタシン（IN DOL）（10 mg / kg）を、0.5％のカルボキシメチルセルロースを含む懸濁液として調製し、誘導剤を注射する前に腹腔内投与しました。 ナロキソン（1mg / kg）を通常の生理食塩水で溶解した。

2.3。 動物

オスのSprague-Dawleyラット（200-250 g）をアンチ-炎症性活動。 鎮痛効果を試験するために雄のICRマウス（20-25 g）を使用した。 すべての動物は、実験動物の注意と使用に関する指導原則に従って実験に使用された。 それらは、実験を開始する前に少なくとも1週間収容され、温度と湿度が60％に調整された環境で、ペレット状の標準的な食品（台湾のFwusow Industry Co. LTD。によって供給および設計されたもの）に自由にアクセスできます。 ）および水道水。12-12 hの明/暗サイクル（明期：08：00-20：00 h）が維持されました。 その後、薬が投与され、鎮痛剤とアンチ-炎症性アッセイは二重盲検法で行った。 行動測定後、すべての動物が二酸化炭素によって殺されました。

2.4。 抗侵害受容性研究

2.4.1。 マウスにおける酢酸誘発腹部身もだえ反応

マウスをランダムにいくつかのグループに分けた。 各マウスに1％酢酸溶液（10ml / kg体重）を腹腔内投与した。 マウスを個々の観察ボックスに入れた。 酢酸によって誘発された腹部の身もだえの症状は、テーバーらによって説明されたものと同様でした。 （1969）。 対照動物は、同じ実験でビヒクル溶液を受け取った。 酢酸注射の５分後、マウスあたりの身もだえ反応の数を、酢酸によって誘発された腹部の身もだえの間の１０分間カウントした。 最後に、身もだえ反応の数により、次の比率を使用して保護のパーセンテージを表すことができました:(対照平均-治療平均）/100/対照平均。

2.4.2。 マウスにおけるホルマリン誘発舐め反応

この方法は、柴田らによって記述された方法の修正を表しています。 （1989）。 ホルマリン注射の前に、各マウスをアクリル透明プレート床の観察チャンバーに5分間置いた。 床の下では、動物の足をはっきりと観察できるように、大きな鏡が458度の角度で傾斜していました。 動物に25mlの1パーセントホルマリンを右足底下に投与した。 次に、各動物をチャンバーに戻し、集中的な舐め反応の2つの異なる期間を観察した。 最初の期間（初期）はホルマリン注射の0 / 5分後に記録され、2番目の期間（後期）は注射の10/35分後に記録されました。 注射された足の反応をなめるのに費やされた時間は、痛みの反応の指標として測定された。

2.5。 ラットにおける抗炎症研究

Theアンチ-炎症性活性は、カラギーナン（Winter et al。、1962）またはザイモサン（Tarayre et al。、1989）などの炎症性物質の足底下注射後の後足体積の平均増加を測定することによってラットで決定されました。 動物は、足底腱膜の下で右後足に0.1mlの1パーセントのカラギーナンまたは2パーセントのザイモサンを注射された。 炎症は、体積変位によって引き起こされる水位のわずかな違いを記録したプレチスモメーター（7150 Ugo Basile）を使用して、ミリリットルで定量化されました。 治療の前に、各動物の後足の平均体積を、4パーセント（装置の精度）を超えて異ならない3つの測定値で決定しました（Vo）。 次に、炎症剤の注射の30、60、90、120、150、180、210、240分後に、各動物の後足の平均体積を3回の測定で決定しました（Vt）。 4パーセント。

各記録での浮腫のパーセンテージは、炎症剤の注射後の各動物の後足の平均体積（Vt）を、治療前の各動物の後足の平均体積（Vo）と比較することによって計算された（PalanichamyおよびNagarajan、1990）。 次の比率を使用して、各グループの抑制率を取得しました：[（Vt-Vo）control /（Vt-Vo）treatment] -100 /（Vt-Vo）control。

2.6。 統計分析

鎮痛および鎮痛中に得られたすべてのデータアンチ-炎症性活動は平均誤差と標準誤差で表され、ANOVA一元配置分散分析とそれに続くScheffの検定を使用してさらに分析されました。 確率（P）が0 .05未満の場合、その差は有意であると見なされました。

3。結果と考察

CDの経口投与による前処理動物(Cistancheニクジュヨウ）抽出物（0。1-1 g / kg）は、マウスにおける酢酸誘発性の身もだえ反応（表1）およびホルマリン誘発性舐め反応の二相性相（表1）の用量依存的かつ有意な阻害をもたらしました。図1（A））。 CDによる抑制(Cistancheニクジュヨウ）酢酸誘発性の身もだえ反応とホルマリン誘発性の舐め反応に対する1g/kgの抽出物は、それぞれ約54％と45％でした。 0。1-0。3g/ kgの陽性対照アセチルサリチル酸も、45-64パーセントの阻害で酢酸誘発の身もだえ反応を減少させました（表1）。 しかし、10 mg / kgの他の陽性対照インドメタシンは、マウスのホルマリン誘発性舐め反応の後期ではなく後期のみを阻害し、最大阻害は32％でした（図1（A））。 さらに、CDの3層のうちブタノール層と水層のみ(Cistancheニクジュヨウ）0。1-0.3g / kgの抽出物も有意な痛覚抑制をもたらし、ブタノール層のこれらの鎮痛効果は水層の鎮痛効果よりも優れていました（表1および図1（B））。 。 次に、アンチ-炎症性CDの活動(Cistancheニクジュヨウ）古典的（カラギーナン誘発性）および代替（ザイモサン誘発性）浮腫形成に対する抽出物および3層。 そのCDを見つけました(Cistancheニクジュヨウ）0。1-1g/ kgの抽出物も、用量に関連した方法でカラギーナン誘発性浮腫形成を有意に抑制し、10 mg / kgのインドメタシンも、ラットにおけるカラギーナン誘発性浮腫形成を効果的に抑制しました（図。 2）。 ただし、ザイモサン誘発浮腫形成はCDによって阻害されませんでした(Cistancheニクジュヨウ）ラットでは0。1-1g/ kgで抽出します（データは示していません）。 さらに、CDの3層のうちブタノール層のみ(Cistancheニクジュヨウ）0。1-0.3g / kgの抽出物も、ラットのカラギーナン誘発性浮腫形成を有意に抑制しました（図2）。 植物化学物質の報告によると、CDのブタノール層の成分に属するアクテオシドとコハク酸(Cistancheニクジュヨウ）抽出物（Hsu et al。、1994、1995）は、アンチ-炎症性化学物質誘発性浮腫形成に対する活性（Murai et al。、1995; Kabachnyi et al。、1987）。 現在のデータと他の以前のレポートから、CDの根茎を提案しました(Cistancheニクジュヨウ）鎮痛剤を所持し、アンチ-炎症性げっ歯類での活性、および有効成分は主にCDのブタノール層に存在します(Cistancheニクジュヨウ）エキス。 アクテオシドとコハク酸がCDの有効成分であるかどうか(Cistancheニクジュヨウ）、私たちはそれらの鎮痛剤を分離して評価しますアンチ-炎症性将来の活動。

図1.CDの効果(Cistancheニクジュヨウ）抽出物（{{0}}。1、0.3および1 g / kg）、酢酸エチル、ブタノールおよびCDの水層(Cistancheニクジュヨウ）抽出物（CDE、CDBおよびCDW）（{{0}}。0 3、0。1および0。3 g / kg）およびインドメタシン（INDOL、 1 0 mg / kg）マウスのホルマリン誘発性舐め反応の初期（0/5分）および後期（10/35分）。 各値は、mean9 / SE（N / 7）として表されます。 * VEHグループと比較して、PB / 0.05、*** PB/0.001。

図2.CDの効果(Cistancheニクジュヨウ）抽出物（{{0}}。1、0.3および1 g / kg）、酢酸エチル、ブタノールおよびCDの水層(Cistancheニクジュヨウ）抽出物（CDE、CDBおよびCDW）（{{0}}。0 3、{{10}}。1および0.3g / kg）およびインドメタシン（INDOL、10 mg / kg）ラットのカラギーナン誘発性足浮腫。 各値は、mean9 / SE（N / 6）として表されます。 * VEHグループと比較して、PB / 0.05、** PB / 0.01

さらに、柴田ら。 （1989）ホルマリン誘発された舐め反応の初期段階がブラジキニンとサブスタンスPに関連していて、後期段階がブラジキニン、オートクリン、およびプロスタグランジンに関連していたことを示唆します。 私たちの現在のデータは、ナロキソンがアンチ-炎症性CDのブタノール層の活性(Cistancheニクジュヨウ）ホルマリン誘発性の舐め反応の両方の段階で抽出し（図3）、酢酸誘発性の身もだえ反応に対する鎮痛効果（表1）。 したがって、鎮痛剤とアンチ-炎症性CD抽出物のブタノール層の効果は、オピオイド受容体とは関係がない可能性があります。 また、CD(Cistancheニクジュヨウ）抽出物とそのブタノール層は、ラットのカラギーナン誘発性浮腫形成のみを阻害しました。 多形核白血球浸潤および活性化キニン系、特にブラジキニンを介したカラゲナン誘発性浮腫は、単球流入および活性化免疫系を介したザイモサン誘発性浮腫とは異なる（Damas et al。、1990; Dawson et al。、1991）。 CD抽出物のブタノール層の成分であるコハク酸は、多形核白血球機能を阻害しました（Rotstein et al。、1985）。 これらの結果は、鎮痛剤とアンチ-炎症性CDのブタノール層の影響(Cistancheニクジュヨウ）抽出物はキニンシステムに関連している可能性がありますが、オピオイド受容体や免疫システムには関連していませんが、CD(Cistancheニクジュヨウ）免疫増強効果を持っていた（Chin and Su、1993）。 鎮痛剤とのメカニズムの詳細についてはアンチ-炎症性活動については、CD抽出物の活性層または成分を使用してさらに調査します。

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