シスタンケ配糖体 A は JNK/MAPK 経路を通じて破骨細胞の活動を阻害します

腎臓を強壮するための伝統的な漢方薬であるCistanche desserticola YCMaは、2015年版の中国薬局方に記載されています。レワンダ科カンサス属の多肉茎で、主に内モンゴル、寧夏、甘粛、青海、新疆に分布しています。カンクサおよび管状カンクサは非常に高い薬効を持っています。腎臓と大腸の経絡に入ります。 『マテリア・メディカ大要』には、Cistanche desserticola は「栄養を与えるが重篤ではない物質であるため、Cistanche desserticola と呼ばれる」、「温かいが潤いを与え、水分を補給するが乾燥せず、滑らかだが下痢はしない」と記録されている。

カンクイ

腎臓の陽を強化し、エッセンスと血液に利益を与え、腸に潤いを与え、排便する効果があります。伝統的に、腎臓の陽の欠乏、本質と血液の欠乏、インポテンス、不妊症、腰と膝の痛み、筋肉と骨の衰弱、腸の乾燥による便秘に使用され、最も頻繁に使用される腎臓陽を強壮する薬です。歴史の中で。現代の薬理学的研究では、カンクサには性機能の改善、老化防止、学習および記憶能力の向上、抗アルツハイマー病、排便などの多くの効果があることが示されています。漢方薬の臨床処方、中国の伝統的な特許医薬品に広く使用されています。 、簡単な準備とヘルスケア製品。

カンクサの主な化学成分は、フェニルエタノイド配糖体、イリドイド、およびそれらの配糖体、リグナン、多糖類です。最新の薬理学的研究では、フェニルエタノイド配糖体がカンクサの最も重要な活性物質であり、明らかな抗アルツハイマー病、パーキンソン病、心筋虚血およびその他の効果があることが示されています。

カンクサの主な化学成分

シスタノシド A (CisA): カンクサから抽出されたフェニルエタノイド配糖体の一種で、抗炎症作用、抗酸化作用、抗骨粗鬆症作用のある生物活性を持っています。

マイトジェン活性化プロテインキナーゼ (MAPK) 経路は、細胞内の重要​​な情報伝達鎖であり、細胞のアポトーシスと増殖を促進し、機能を調節することにより、ニューロンの発生、破骨細胞の分化、細胞遊走、がんなどのプロセスに関与します。さまざまなサイトカインのこと。

フェニルエタノール配糖体は、Cistanche desserticola の主な有効成分です

背景: 研究により、Cistanche desserticola 配糖体 A には抗炎症作用、抗酸化作用、抗骨粗鬆症作用があることが確認されていますが、破骨細胞の分化と機能に対するその効果と潜在的なメカニズムについてはまだ研究が不足しています。

客観的: 核因子κB受容体活性化因子リガンドによって誘発されるin vitro破骨細胞分化および骨吸収に対するCistanche desserticola配糖体Aの効果とメカニズムを調査すること。

方法：骨髄マクロファージは、4-6 週齢の C57BL/6 マウスの大腿骨と脛骨から抽出され、培養されました。骨髄マクロファージに対するさまざまな濃度のキスタンケ デスティコラ 配糖体 A (5、10、20、40、80、160 μmol/L) の毒性を、CCK-8 毒性アッセイを使用してテストしました。酒石酸耐性酸性ホスファターゼ染色を使用して、破骨細胞分化に対するさまざまな濃度のキスタンケ デスティコラ グリコシド A の介入を観察し、薬物の有効介入濃度を決定しました。実験は、陽性対照群、Cistanche deserticola 配糖体 A (40、80、160 μmol/L) の低用量、中用量、および高用量群に分けられました。細胞接着後、破骨細胞の分化を誘導するために、50 ng/mLの核因子κB受容体活性化因子リガンドを各グループに添加した。キスタンケ デスティコラ グリコシド A の低、中、高用量グループに、対応する用量のキスタンケ デスティコラ グリコシド A を介入させました。破骨細胞形成に対するキスタンケ デスティコラ グリコシド A の効果は、アクチン リング ゴースト ペン ペプチド染色と DAPI 染色を使用して検出されました。トルイジンブルーで染色した骨粉砕錠剤による破骨細胞の骨吸収機能に対するシスタンケ配糖体Aの効果の観察。ウェスタンブロットを使用して、JNK/MAPK 経路の上流および下流のタンパク質の発現を検出しました。 RT qPCR は、酒石酸耐性酸性ホスファターゼ、DC-STAMP、Nfatc-1、Ctsk、c-Fos など、破骨細胞の分化と骨吸収機能に関連する遺伝子の発現を検出するために使用されました。

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結果と結論:

① 酒石酸耐性酸性ホスファターゼ染色、アクチンリング染色、および骨ピットトルイジンブルー染色により、陽性対照群と比較して、Cistanche 配糖体 A が核によって誘導される破骨細胞の分化および骨吸収機能に対して用量依存的かつ有意な阻害効果を有することが示されました。インビトロでのκB因子受容体活性化因子リガンド。

② RT qPCR の結果、陽性対照群と比較して、高用量および低用量における酒石酸耐性酸性ホスファターゼ、DC-STAMP、Nfatc-1、Ctsk、および c-Fos の mRNA 発現レベルが低下したことが示されました。キスタンケ デスティコラ グリコシド A のグループは有意に減少し、キスタンケ デスティコラ グリコシド A の減少効果は高用量グループでより顕著でした。ウェスタンブロットの結果は、高用量のキスタンケ デスティコラ グリコシド A が p-JNK タンパク質の発現を有意に阻害することを示しました。 10、20、30、60 分の介入。陽性対照群と比較して、Cistanche desserticola 配糖体 A の低用量、中用量、および高用量群は、用量依存的に Nfatc1 および c-Fos タンパク質の発現を有意に阻害しました。結果は、Cistanche desserticola 配糖体 A が Nfatc1 および c-Fos タンパク質の発現を阻害できることを示しています。 p-JNKタンパク質のレベルを低下させ、MAPK経路の活性化と破骨細胞の重要な遺伝子の発現を抑制することによる、破骨細胞の骨吸収機能。

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