カンクイ由来のチロシン脱炭酸酵素遺伝子のクローニングと機能の同定
Apr 07, 2023
カンクイ(シュレンク) ウィッシュは、レワンダ科のキスタンケ属の多年生草本寄生植物です。甘くてしょっぱくて温かい性質を持つ貴重な漢方薬です。 腎臓の陽を強化し、エッセンスと血液に利益を与え、腸に潤いを与え、排便するなどの機能があります。 フェニルエタノール配糖体が主な有効成分です.
スーパーマンハーブのシスタンシュ
これらの化合物は多様な構造と広範な薬理活性を有しており、医薬活性のためのリード化合物の重要な供給源となっています。 しかし、これらの化合物は天然資源が限られており、化学合成ルートが煩雑で、反応条件が厳しく、コストが高いため、商業生産には耐えられません。
カンクサの主な化学成分
そして、生物合成経路に関与する主要な酵素遺伝子を探索します。フェニルエタノイド配糖体、そして遺伝子工学を通じて,この方法は、構造的に多様な物質の酵素合成の可能性を提供することができます。フェニルエタノイド配糖体.
フェニルエタノール配糖体はCistanche desserticolaの主な有効成分です
研究グループは、糖転移酵素およびチロソール（フェニルエタノイド配糖体の重要な中間体）の生合成を触媒した後に修飾されたアシル転移酵素に関する予備研究を実施した。チロソールの合成には、前駆体としてチロシンを使用する必要があり、チロシンデカルボキシラーゼによって触媒されてチラミンが生成され、モノアミンオキシダーゼやアルコールデヒドロゲナーゼなどの一連の反応を通じてチラミンが生成されます。 チロシンデカルボキシラーゼによって触媒されるチロシンの脱炭酸は、その初期反応の重要なステップです。
カンクサの実験
この研究では、RACE 技術と組み合わせた RT-PCR 法により、チロシン デカルボキシラーゼ遺伝子 TDC をカンカのゲノムからクローニングしました。 遺伝子をコードするタンパク質は 509 個のアミノ酸を含み、大腸菌での発現に成功し、分子量 61 kDa の組換えタンパク質が単離・精製されました。
カンカンキエキス粉末
【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
in vitro 機能同定の結果は、TDC がチロシン (1) の脱炭酸を触媒してチラミン (2) を生成できることを示し、生成物は HR-MS および参照物質対照によって同定されました。 組換えタンパク質の細胞内局在、最適な触媒条件、酵素選択性についてさらなる研究が行われました。 この遺伝子は、フェニルエタノールアミン グリコシドの生合成および構造的に多様なフェニルエタノールアミン グリコシドの酵素合成のための工学的細菌の構築における重要な生合成要素として使用でき、基礎を築くことができる。
参照：
(1) Song Zhihong、Lei Li、Tu Pengfei、漢方薬、2003 年、9113-115
(2) Song Zhihong、Tu Pengfei、Zhao Yuying、Zheng Junhua、漢方薬、2000、11、10-12
