精液地黄中の 5 つの化合物の含有量の決定とその HPLC フィンガープリントの確立

表 3 回復テストの結果 (n=6)

2.4 サンプルの決定

収集した６つのバッチのレマンニアは、「２．２．２」の方法に従って調製され、サンプリングされ、「２．１」のクロマトグラフィー条件に従って測定された。含有量測定の結果を表 4 に示します。結果は、5 つの成分の中で、レーマンニア配糖体 D の含有量が最も高く、0.460% から {{1 0}.730%;次にレオヌリ配糖体の含有量が 0.100% ～ 0.270% であり、異なる生産地域からのサンプル中の 2 つの成分の含有量に大きな違いはありません。サンプル SX1 では、エキナコシドを除いて、他の 4 つの成分の含有量がサンプルの他のバッチの含有量よりも大幅に高くなります。異なる生産地域の地黄に含まれるエキナコシド、シスタンケシド A、およびベルバスコシドの含有量は大きく異なり、不規則です。

カンサスハーブ添え優れた品質の一貫性

2.5 地黄の HPLC フィンガープリントの確立と類似性評価

ジオウのクロマトグラムと多成分含有量測定データを「漢方薬クロマトグラフィー指紋類似性評価システム（2012版）」ソフトウェアにインポートし、SX1試験サンプルのクロマトグラムを選択しましたを基準スペクトルとして使用します。時間ウィンドウ幅は 0.10 分に設定され、中央値法を使用して重ね合わせスペクトルと参照スペクトルが生成されました。合計 23 の共通ピークが特定されました (図 3 を参照)。リョウマンニア・グルチノーザのフィンガープリントと基準との類似性は0.904～0.950であり、異なる産地のリョウマンニア・グルチノーザのサンプル間、および生のリョウマンニア・グルチノーザと調理済みのリョウマンニア・グルチノーザのサンプルは類似しており、品質の一貫性が良好であることが示されました。

表４ 精液中の５成分の含有量測定結果／％

レーマンニオシドＤ；１３．レオヌリド；１７．エキナコシド；１９．カスタノシドＡ；２０． 21.アクテオシド

図 3 ジオウの 6 バッチ (SX1-SX4、HN1、HN2) と参照 (R) の HPLC クロマトグラムの重ね合わせ

3 ディスカッション

3.1 クロマトグラフィー条件の選択

この研究では、アセトニトリル-水、アセトニトリル-0.1%ギ酸溶液、メタノール-水、メタノール-0.1%ギ酸溶液の4つの移動相系を調査しました。結果は、5 つの成分がアセトニトリル系で良好な分離効果を持っていることを示しました。アセトニトリル-水移動相系と比較して、アセトニトリル-0.1%ギ酸溶液移動相中のレマンニア・グルチノーザおよびマザーワート配糖体のピークは狭く、良好なピーク対称性を示しました。同時に、5つの成分の紫外線吸収率の違いにより、含有量も大きく異なります。各成分の含有量をより正確に決定し、5 つの成分の吸収強度が同じクロマトグラム内で均一に分布していることを確認するために、レーマンニア配糖体D、マザーワート配糖体、エキナコシド、シスタンケシド A、およびベルバスコシドが分析され、可変波長測定が選択されました。つまり、0-24 分、最初に分離されたレーマニア配糖体は 203 nm で測定され、24-40 分、分離されたエキナコシド、シスタンケシド A、およびベルバスコシドは 330 nm で測定されました。さらに、この研究では、抽出溶媒としてメタノール、70% メタノール溶液、50% メタノール溶液、および 50% アセトニトリル溶液の抽出効果も調査しました。結果は、抽出溶媒として 70% メタノール溶液を使用すると、テスト対象の成分をよりよく溶解でき、抽出されたサンプルの不純物が少ないことがわかりました。したがって、この研究では、抽出溶媒として 70% メタノール、移動相系としてアセトニトリル-0.1% ギ酸溶液を選択し、可変波長を使用してジオキサの 5 つの成分の含有量を決定しました。

3.2 サンプルの測定結果の分析

測定結果から、蒸煮後、エキナコシドの含有量がわずかに増加したことを除いて、他の 4 つの成分の含有量、特にレオヌリシドとシスタンケシド A の含有量が大幅に減少したことがわかります。同じ生産地からのリーマンニア・グルチノーサ中のリーマンニア・グルチノーサ中のリーマンニア・グルチノーザ中のリーマンニア・グリコシドＤおよびシスタンケシドＡの含有量はわずかに異なり、レオヌリサイド、エキナコシドおよびベルバスコシドの含有量は大きく異なっていた。河南省産の地黄のエキナコシド含有量は山西省産のサンプルよりも著しく高く、他の 4 つの成分の含有量はわずかに異なっていました。同時に、この研究で確立された HPLC フィンガープリントによると、レマンニア サンプルの 6 バッチと対照フィンガープリント間の類似性は 0.904~0.950 であり、主な化学物質が処理前後の 6 バッチのレマンニア サンプルの成分は非常に一貫していました。

要約すると、この研究で確立された含有量決定方法と HPLC フィンガープリントは正確で信頼性が高く、優れた特異性を持っています。これらは、加工前と後のレマンニア・グルチノーザの成分および加工度の変化を特徴付けるために使用でき、レマンニア・グルチノーサの品質管理の技術サポートを提供します。ただし、この研究にはサンプルバッチが少ないことと生産地域が不完全にカバーされているという欠点があり、さらなる分析と検証が必要です。

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