医薬品と食品の相同性に基づく複合製剤の抗疲労効果の評価
Oct 10, 2022
要約: 目的 医薬品と食品の相同性に基づいて、アストラガルス・メンブラナセウス、アンジェリカ・シネンシス、カンカ、高麗人参、ピーチ・ケルンを主成分として、3 つの異なる互換性のある化合物製剤を設計しました。抗疲労効果評価されました。 方法:
(1) 実験Ⅰ:比較研究抗疲労効果3つの複合製剤の。 5-6 週齢の 48 匹の雄性 BALB/c マウスを無作為に運動対照群 (EC 群)、準備群 1 (F1 群)、準備群 2 (F2 群)、準備群 3 (F3 群) に分けました。 、各グループに 12 匹のマウス。 EC群のマウスには精製水を強制経口投与し、F1、F2およびF3群のマウスには異なる調製物からの20ml/kg・BWの煎じ薬を1日1回、28日間強制経口投与した。 最後の強制経口投与の 30 分後に、負荷をかけた徹底的な水泳実験を実施し、徹底的な水泳の時間に対するさまざまな準備の効果を比較しました。
(2) 実験Ⅱ:抗疲労化合物調製のメカニズム。 5-6 週齢の 30 匹の雄 BALB/c マウスを無作為に正常対照群 (NC 群)、運動対照群 (EC 群)、および従来の対照群に分けました。漢方処方グループ (FZ グループ)、各グループに 10 匹のマウス。 NC群とEC群には強制経口投与により精製水を与え,FZ群には実験Iで選択した機能性製剤20ml/kg・BWを1日1回28日間強制経口投与した。 最後の強制経口投与の 30 分後に、NC グループは直ちに屠殺され、EC グループと FZ グループは 60 分間の無負荷水泳実験後に屠殺されました。 血中乳酸 (BLA) の含有量、尿素窒素 (BUN) および乳酸脱水素酵素 (LDH) の活性、肝臓グリコーゲンの含有量、マロンジアルデヒド (MDA) および肝臓組織中のスーパーオキシドジスムターゼ (SOD) の活性、含有量筋組織における筋グリコーゲン、MDA、および Na プラス -K プラス -ATPase および Ca2 プラス -Mg2 プラス -ATPase の活性を、生化学キットによって検出した。

結果:
(1) の比較研究では、抗疲労効果3 つの化合物製剤のうち、F2 群のマウスの負荷をかけた完全な水泳時間は、EC 群のマウスよりも有意に長いことが観察されました (P<>
(2) の研究では、抗疲労メカニズム化合物の調製について、以下の結果が得られた。 ① NC群と比較して、EC群とFZ群の血清中のBUNとBLAの含有量が有意に増加した(P<0.05), and="" the="" activity="" of="" ldh="" was="" significantly="" decreased="">0.05),><0.05). compared="" with="" the="" ec="" group,="" the="" contents="" of="" bun="" and="" bla="" in="" the="" serum="" of="" the="" fz="" group="" decreased="" significantly="">0.05).><0.05), and="" the="" activity="" of="" ldh="" increased="" significantly="">0.05),><>
②NC群と比較して、EC群とFZ群の肝グリコーゲン含有量は有意に減少した(P<0.05), and="" the="" content="" of="" mda="" increased="" significantly="">0.05),><0.01;>0.01;><0.05). compared="" with="" the="" ec="" group,="" the="" content="" of="" mda="" in="" the="" liver="" of="" the="" fz="" group="" decreased="" significantly="">0.05).><>
③ NC群と比較して、EC群とFZ群の筋グリコーゲン含有量は有意に減少した(P<0.05), the="" content="" of="" mda="" increased="" significantly="">0.05),><0.01), and="" the="" activities="" of="" na+-k+-atpase="" and="" ca2+-mg2+-atpase="" decreased="" significantly="">0.01),><0.05). compared="" with="" the="" ec="" group,="" the="" content="" of="" muscle="" glycogen="" in="" the="" fz="" group="" increased="" significantly="" (p="">0.05).><0.05), and="" the="" content="" of="" mda="" decreased="" significantly="">0.05),><0.05). conclusion="" the="" preparation="" containing="" radix="" astragali,="" angelica="" sinensis="" and="" fructus="" lycii="" has="" significant="" anti-fatigue="" action.="" the="" mechanism="" may="" involve="" increasing="" glycogen="" reserve="" and="" enhancing="" antioxidant="" capacity.="" [acta="" nutrimenta="" sinica,="" 2022,="">0.05).>
キーワード:抗疲労; 複合製剤; 薬と食べ物の相同性; マウス
スポーツ疲労アスリート、兵士、その他のグループで非常に一般的です。 アスリートの運動状態や兵士のパフォーマンスに影響を与えるだけでなく、スポーツ外傷の可能性を高め、取り返しのつかない怪我を引き起こすことさえあります。 したがって、運動誘発性の予防と排除に関する研究倦怠感は非常に重要です。 近年、多くの研究により、薬用および食用植物、特にそれらの組成物が、緩和においてマルチターゲット効果を示すことが示されています。運動による疲労[1]。 本研究の目的は、様々な漢方薬を薬と食物の相同性、気を活発にして血液を活性化すること、適切な適合性、およびより優れた抗疲労効果を有する機能性製剤とその抗疲労の観点から選別することである.効果とその予備的なメカニズム研究。 これらの研究成果は、運動による疲労の予防策の策定や抗疲労機能製剤の研究開発において一定の参考値となります。

1 材料と方法
1.1 配合製剤の原料と調製
レンゲ、アンゼリカ、シスタンシュ、高麗人参、モモの実、その他の薬用材料は、北京同人堂薬局 (天津大谷南路店) から購入しました。
処方に従って薬の品質を正確に量り、上部を洗い、キャセロールに入れ、3000mlの精製水を加えます。 強火で沸騰させ、弱火で20分間煮て、ジュースを取ります。 水1000mlを加えて強火で沸騰させ、弱火で15分煮て汁を取る。 水1000mlを加えて強火で沸騰させ、弱火にして10分煮て果汁を抽出する。 3つのジュースを合わせてロータリーエバポレーターで濃縮し、120mlの煎じ汁を得る.
1.2 器具と試薬
実験用試薬: 血清乳酸 (BLA)、尿素窒素 (BUN)、乳酸脱水素酵素 (LDH)、肝臓グリコーゲン、マロンジアルデヒド (MDA) およびスーパーオキシドジスムターゼ (SOD) の肝臓組織、筋肉組織における活性 筋肉グリコーゲンの活性検出キット、MDA、Na プラス -K プラス -ATPase および Ca2 プラス -Mg2 プラス -ATPase は、Beijing Soleibao Technology Co., Ltd. から購入しました。
実験装置: SY-2000 ロータリーエバポレーター、真空ポンプ (上海雅栄); JYH-B40Q1 煎じ鍋 (Guangdong Xiaoxiong Electric); 200Lの正方形の水泳用タンク。 5810R 低温高速遠心分離機 (エッペンドルフ、ドイツ)。 Tissuelyser-48L マルチサンプル組織グラインダー (Shanghai Jingxin Division); SpectraMax M5 多機能マイクロプレートリーダー [Meiko Molecular Instruments (Shanghai)]。
1.3 動物の分類と介入
実験動物は 78 匹の健康な雄の BALB/c マウス (SPF グレード、Beijing Weitonglihua Laboratory Animal Technology Co., Ltd.、ライセンス番号 SCXK (Beijing) 2016-006)、年齢 5-6w、飼育温度 (25±1 ) 度、通常の光、通常の飼料、水と食事への自由なアクセス。 1週間の順応給餌の後、次の実験を2つのバッチで実施しました。
1.3.1 の比較研究抗疲労効果3 つの化合物製剤: 最初のバッチの 48 匹のマウスを、運動対照群 (EC 群)、製剤 1 群 (F1 群)、製剤 2 群 (F2 群)、および製剤 3 群 (F3 群) に無作為に分け、12 匹のマウスを各グループ。 EC 群のマウスには精製水を胃内投与し、F1、F2 および F3 群には異なる処方で 20ml/(kg・bw) の煎じ薬を 1 日 1 回、28 日間胃内投与した。 マウスの食物摂取量を毎日記録し、3 日ごとに体重を測定しました。 最後の強制経口投与の 30 分後、各グループのマウスを負の重力による徹底的な水泳実験にかけました。 主な手順: マウスの尾の基部を、マウスの体重の 3% の総重量でリード線で固定します。 内壁が滑らかなプラスチック製の水槽にマウスを入れ、水深は55cm以上、水温は(30±1)度で、泳ぎ始めてから疲労するまでの時間を記録した。 枯渇の決定のための指標。
1.3.2 化合物製剤の抗疲労メカニズムに関する考察: 30 匹のマウスの 2 番目のバッチを無作為に静かな対照群 (NC 群)、運動対照群 (EC 群)、および伝統的な漢方薬群 (FZ 群) に分けました。グループ)、各グループに 10 匹のマウス。 ねずみ。 NC群とEC群には精製水を胃内投与し、FZ群には実験1でスクリーニングした機能性製剤を20ml/(kg・bw)1日1回28日間胃内投与した。 マウスの食物摂取量を毎日記録し、3 日ごとに体重を測定しました。
最後の強制経口投与の 30 分後、材料を入手するために NC グループを直ちに犠牲にし、60- 分間の無負荷水泳実験を完了した後、EC グループと FZ グループを犠牲にしました。 血清BLA、BUN含有量およびLDH活性。 肝組織における肝グリコーゲン、MDA 含有量および SOD 活性。 筋グリコーゲン、筋組織中の MDA 含有量、および Na プラス -K プラス -ATPase および Ca2 プラス -Mg2 プラス -ATPase 活性。

1.4 統計分析
SPSS 22.0 統計ソフトウェアをデータ処理と分析に使用し、結果を x ± s として表しました。 一元配置分散分析 (ANOVA) を使用して差の有意性をテストし、LSD-t テストをペアワイズ比較に使用しました。 P<0.05 was="" considered="" statistically="">0.05>
2件の結果
2.1 3 つの複合製剤の抗疲労効果に関する比較研究
2.1.1 The effect of different compound preparation intervention on the general condition and average body weight of mice: During the experiment, the mice in each group had shiny coats, elastic skin, good growth and mental state; body weights all increased slightly and tended to increase Similarly, there was no significant difference in the average body weight of mice among the groups (P>0.05、表 1)。

2.1.2 マウスの完泳時間に対する化合物製剤の効果(図1) 完泳時間は個体差が大きいため、元データを対数変換し、試験後に分散分析を行った。正規分布と一致していました。 結果は、ECグループと比較して、F2グループのマウスは負の体重で疲れ果てていたことを示しました
水泳時間は有意に延長され、その差は統計的に有意でした (P<>

2.2 複合製剤の抗疲労メカニズムに関する考察
2.2.1 The effect of compound preparation intervention on the average body weight of mice after swimming exercise: During the experiment, the body weight of mice in each group increased slightly and the growth trend was the same, and there was no statistically significant difference in the average body weight of mice between each group (P>0.05、表省略)。
2.2.2 水泳運動後のマウスの血清 BUN、BLA 含有量および LDH 活性に対する化合物製剤介入の効果 (図 2): 60 分間の無負荷水泳後、NC グループと比較して、EC の血清 BUN群と FZ 群のマウス EC 群と比較して、FZ 群のマウスの血清 BUN 含有量は有意に減少した (P<0.05). compared="" with="" the="" nc="" group,="" the="" blood="" lactate="" (bla)="" content="" of="" mice="" in="" the="" ec="" group="" and="" fz="" group="" was="" significantly="" increased="" (p="" <="" 0.01;="" p="" <="">0.05).>
EC グループと比較して、FZ グループのマウスの BLA 含有量は大幅に減少しました (P<0.05). compared="" with="" the="" nc="" group,="" the="" serum="" ldh="" activity="" of="" the="" ec="" group="" and="" the="" fz="" group="" was="" significantly="" decreased="">0.05).><0.05); compared="" with="" the="" ec="" group,="" the="" serum="" ldh="" activity="" of="" the="" mice="" in="" the="" fz="" group="" was="" significantly="" increased="">0.05);><>
結果は、無体重の 60 分間の水泳実験が、血清 BUN および BLA 含有量を大幅に増加させ、マウスの LDH 活性を大幅に低下させる可能性があることを示唆しています。水泳、および水泳後のマウスの血清 BUN および BLA 含有量を大幅に減らすことができます。 LDH活性を高めます。
2.2.3 水泳運動後のマウスの肝臓組織における肝グリコーゲン、MDA および SOD 活性の含有量に対する化合物調製介入の効果 (図 3): NC と比較した 60 分間の無負荷水泳後グループ、EC グループおよび FZ グループのマウスでは、肝臓のグリコーゲン量が大幅に減少しました (P<0.05); compared="" with="" the="" ec="" group,="" the="" liver="" glycogen="" content="" of="" the="" mice="" in="" the="" fz="" group="" had="" a="" tendency="" to="">0.05);>

NC群と比較して、EC群およびFZ群のマウスの肝臓組織におけるMDAの含有量は有意に増加した(P<{{0}}.01; P< 0.05); EC群と比較して、FZ群のマウスの肝臓におけるMDAの含有量は有意に減少した(P<0.05)。 0.05)。 各群のマウスの肝臓におけるSODの活性に有意差はありませんでしたが、EC群と比較して、FZ群のマウスの肝臓SOD活性は増加する傾向がありました。 結果は、60分間の無負荷水泳が肝臓グリコーゲンの含有量を減少させ、MDAの含有量を増加させ、4週間の機能的準備介入が水泳後のマウスの肝臓組織におけるMDAの含有量を減少させることができることを示した.

2.2.4 水泳運動後のマウスの筋肉組織における筋グリコーゲン、MDA 含有量、および ATPase 活性に対する化合物製剤介入の効果 (図 4) 体重をかけずに 60 分間水泳した後、NC 群、EC 群と比較FZ群のマウスは、筋グリコーゲン、MDA含有量、およびATPase活性のレベルが高かった(図4)。 筋肉グリコーゲンの含有量が大幅に減少しました(P<0.05); compared="" with="" the="" ec="" group,="" the="" content="" of="" muscle="" glycogen="" in="" the="" fz="" group="" was="" significantly="" increased="">0.05);><0.05). compared="" with="" the="" nc="" group,="" the="" mda="" content="" in="" the="" muscle="" tissue="" of="" the="" ec="" group="" and="" fz="" group="" was="" significantly="" increased="">0.05).><0.01;>0.01;><0.05); compared="" with="" the="" ec="" group,="" the="" mda="" content="" in="" the="" muscle="" tissue="" of="" the="" fz="" group="" was="" significantly="" decreased="">0.05);><0.01;>0.01;><0.05). p="" <="" 0.05).="" compared="" with="" the="" nc="" group,="" the="" atpase="" activity="" in="" the="" muscle="" tissue="" of="" the="" ec="" group="" and="" the="" fz="" group="" was="" significantly="" decreased="">0.05).><0.05); there="" was="" no="" significant="" difference="" in="" the="" atpase="" activity="" in="" the="" muscle="" tissue="" of="" the="" ec="" group="" and="" the="" fz="" group.="" the="" results="" showed="" that="" the="" non-weight-bearing="" 60min="" swimming="" experiment="" significantly="" reduced="" the="" muscle="" glycogen="" content="" and="" atpase="" activity="" in="" the="" muscle="" tissue="" of="" the="" mice,="" and="" the="" mda="" content="" significantly="" increased,="" while="" the="" 4w="" functional="" preparation="" intervention="" could="" significantly="" reduce="" the="" mda="">0.05);>
筋肉グリコーゲンの含有量が大幅に増加し、MDA の含有量が大幅に減少しました。


3 ディスカッション
体重負荷水泳試験は、疲労を判断するための古典的な方法であり、体重負荷水泳時間を通じてマウスの持久力を反映することができます。 この実験の結果、運動対照群と比較して、化合物製剤 2 群のマウスの体重負荷水泳時間は有意に延長されましたが、化合物製剤 1 および 3 群への介入は有意な効果がありませんでした。 レンゲ、アンジェリカ、およびカンカを含む化合物製剤は、実験用マウスに対して有意な抗疲労効果を有することが示唆されています。
体が長時間の高強度運動を行うと、グリコーゲンが分解されて大量のブドウ糖が生成され、体にエネルギーを供給します。 筋グリコーゲンはいつでも使えるグリコーゲンです。 それは最初に供給のために体内に分解され、
その予備力は、運動持久力と正の相関があります [2]。 運動時間が長くなると、体の血糖恒常性は再び壊れます。 このとき、筋肉グリコーゲンの分解が血糖値を維持するのに十分でない場合、体は肝臓グリコーゲンを分解し始め、血糖値の安定性を維持するために体にエネルギーを供給します[3]。
したがって、筋肉グリコーゲンは体のエネルギー利用形態であり、肝臓グリコーゲンはエネルギー貯蔵形態です [4]
体内の筋肉グリコーゲンと肝臓グリコーゲンの貯蔵量が多いほど、運動を提供するために必要なエネルギーが多くなり、疲労の開始が遅くなります[5]。 激しい運動が長時間続くと、体内のグリコーゲンが過剰に消費され分解されます。 グリコーゲンの含有量が少ないと、分解によって生成されたブドウ糖が運動を継続するための体を維持するのに十分ではなく、この時点で疲労と疲労の状態が現れます. したがって、筋グリコーゲンの蓄えを増やすことは、疲労を遅らせるための重要な方法です[6]。 この研究では、無重量の60分間の水泳運動が筋肉グリコーゲンと肝臓グリコーゲンの含有量の減少をもたらすことが観察されましたが、気を活性化し、血液循環を促進するための化合物製剤の介入は含有量を大幅に増加させる可能性がありますマウスにおける筋グリコーゲンの量。
これは、化合物製剤の介入がレンゲ, アンゼリカ、 とシスタンシェできる体の糖代謝能力を改善する, 筋グリコーゲンの蓄えを改善する、 と体の酸化エネルギーを確保する運動中に補給。 これが、調製物がマウスの抗疲労能力を改善できる理由である可能性があります。 仕組みの一つ。

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長時間の高強度の運動の後、体の血糖値と筋グリコーゲンが低下します。 その結果、アミノ酸異化が促進され、代謝物BUNが増加します。 LDH は解糖プロセスにおける重要な酵素であり、ピルビン酸と乳酸の間の酸化還元反応を触媒します [8]。
短時間の高強度の激しい運動の後、体は大量の ATP を消費します。 このとき、エネルギー供給は主に解糖系によって完結します。 嫌気的解糖は非効率的に ATP を生成し、ATP の瞬間的な需要は大きい。 エネルギーは大量の乳酸を生成する多くの嫌気性解糖を受けます。 血中乳酸濃度は、運動疲労や過労運動における一般的な生化学的評価指標として利用できます。 この実験の結果は、複合製剤の介入が水泳後のマウスの血清中の BUN と乳酸の含有量を大幅に減少させ、LDH の活性を高めることができることを示しています。シスタンシェBUNと乳酸の2つのレベルを大幅に緩和できるだけではありません。 血液中のさまざまな代謝産物の蓄積を減らし、乳酸の代謝を促進し、乳酸の蓄積を減らし、それによって効果的に運動疲労.
高強度の運動中、体の酸化的代謝が強化され、体組織の酸素消費量が増加し、フリーラジカルが大幅に増加し、脂質過酸化反応[9]。 この研究の結果は、体重を支えない水泳の60分後、化合物製剤介入群のマウスの肝臓組織と筋肉組織のMDAの含有量が、運動対照群のそれよりも有意に低いことを示しました。 機能性製剤は、運動マウスによって誘発される酸化的損傷に対して一定の拮抗効果を有することが示唆されており、これも抗疲労効果の1つの方法である可能性があります. この研究では、マウスの筋肉組織における 2 つの ATPase (Na + -K + -ATPase および Ca2 + -Mg2 + -ATPase) の活性の変化が観察されました。
これらの 2 つの酵素は、細胞膜とオルガネラ膜上の膜貫通トランスポーターであり、体のエネルギー代謝、恒常性、およびオルガネラの完全性の維持に直接影響を与えます。 この実験では、静かなコントロール グループ、運動コントロール グループの筋肉グループ、および伝統的な中国医学の介入グループを比較しました。
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