重症急性呼吸器症候群に対する体液性および細胞性免疫-2 サルコイドーシス患者におけるワクチン接種

バックグラウンド：

コロナウイルス感染症2019ワクチンは、抗体とT細胞免疫反応の両方を誘導し、健康な人において、重篤な疾患形態を含むコロナウイルス感染症2019の予防に有効であることが証明されています。 しかし、サルコイドーシス患者における重症急性呼吸器症候群コロナウイルス-2の免疫グロブリンG抗体反応と重症急性呼吸器症候群コロナウイルス-2特異的T細胞反応の詳細は不明です。

免疫は、外部から侵入する病原体に対する身体の自然な防御機構です。 特異的 T 細胞は人間の免疫システムの重要な部分です。 特異的 T 細胞応答とは、体内の特定の抗原に対する T 細胞の認識と応答を指します。 この反応は、身体を攻撃から守り、健康を維持するために不可欠です。 この記事では、特定の T 細胞応答と免疫の関係に焦点を当てます。

まず、特定の T 細胞応答によって人間の免疫力が向上します。 人体が外来病原​​体に侵入すると、特定の T 細胞が病原体を認識して結合します。 このとき、T 細胞はサイトカインを放出して一連の免疫応答を開始し、他の免疫細胞が病原体を認識して攻撃できるようにします。 このようにして、人間の免疫力が向上します。

第二に、特定の T 細胞応答は、身体が免疫記憶を生成するのに役立ちます。 人間の免疫系が特定の抗原と接触すると、関連する T 細胞が特定の応答を開始してメモリー T 細胞を生成します。 これらの記憶 T 細胞は、次のウイルス感染時に対応する抗原の記憶を思い出し、外来病原体に対する攻撃に迅速に介入します。 この免疫記憶は長期間持続し、人間の免疫力を効果的に強化します。

最後に、特定の T 細胞応答も免疫応答のバランスを調節します。 人間の免疫系では、T 細胞が免疫応答において重要な調節役割を果たしています。 CD4 プラス T 細胞や CD8 プラス T 細胞などの特定の T 細胞サブタイプは、免疫応答中にさまざまな種類の免疫細胞の活性を調節し、バランスをとります。 これにより、免疫システムがスムーズに機能し、良好な免疫状態を維持できます。

全体として、特異的な T 細胞応答はヒトの免疫系の重要な要素の 1 つです。 人間の免疫力の向上、免疫記憶の生成、免疫応答のバランスの調節において非常に重要な役割を果たします。 したがって、良好な健康状態と十分な特異的 T 細胞応答を維持することが、人間の免疫を維持するための鍵となります。 この観点からも免疫力を高める必要があります。 シスタンシュにはビタミンCやカロテノイドなどのさまざまな抗酸化物質が豊富に含まれているため、免疫力を大幅に向上させることができます。これらの成分はフリーラジカルを除去し、酸化ストレスを軽減し、免疫系の抵抗力を向上させることができます。

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標的：

2019年コロナウイルス感染症に感染し、CoronaVacワクチン接種を受けたサルコイドーシス患者において、酵素免疫吸着法およびインターフェロン-ガンマ放出アッセイを用いて抗体応答とT細胞応答を測定および比較する。

研究デザイン:

前向きコホート研究。

方法:

過去 6 か月以内に重症急性呼吸器症候群コロナウイルス-2に感染し、コロナウイルス感染症 2019 ワクチン接種を受けていない、2019 年コロナウイルス感染症ポリメラーゼ連鎖反応検査陽性のサルコイドーシス患者合計 28 名と、ワクチン接種を受けたサルコイドーシス患者 28 名この研究には、CoronaVacを2回投与し、2019年にコロナウイルス感染症に罹患したことがない人が含まれていました。

患者の免疫反応レベルは、患者の血液中の重症急性呼吸器症候群コロナウイルス-2の免疫グロブリンレベルとインターフェロンガンマレベルをそれぞれ酵素免疫吸着法とインターフェロンガンマ放出アッセイ法で測定することによって決定されました。 。

結果：

新型コロナウイルス感染グループの患者の平均年齢は48.1±11.3歳であったのに対し、ワクチン接種グループの患者の平均年齢は55.6±9.32歳であった。 感染後の平均経過時間は 97.32 ± 42.1 日で、2 回目のワクチン接種からは 61.3 ± 28.7 日が経過しました。 新型コロナウイルス感染グループでは、免疫グロブリンGとインターフェロンガンマ放出検査で、それぞれ患者の64.3％と89.3％が陽性反応を示した。 ワクチン接種グループでは、免疫グロブリン G が患者の 10.7 パーセントで陽性であり、インターフェロン ガンマ放出検査が 14.3 パーセントで陽性でした。

結論：

サルコイドーシス患者では、自然免疫応答が適応免疫応答より優れています。 コロナバックワクチンは、サルコイドーシス患者に体液性免疫と細胞性免疫を生成するには不十分です。

序章

サルコイドーシスは、影響を受けた臓器における炎症細胞の異常な蓄積によって生じる全身性の炎症性疾患です。 サルコイドーシスの病因は完全には理解されていませんが、抗原提示細胞および抗原特異的ヘルパー T ヘルパー-1 (CD4 プラス) を介して細胞性免疫および非特異的炎症反応を調節する免疫エフェクター細胞の発生が関与していることが知られています。遺伝的に影響を受けやすい個人における未知の抗原への曝露後のリンパ球と肉芽腫構造の形成。1 最も関与する臓器には肺および縦隔リンパ節が含まれますが、他の臓器が関与する可能性もあります。2 関与する組織における CD4 プラスリンパ球の蓄積はこの病気の特徴ですが、他の組織や血液では CD4 プラスレベルは影響を受けないか、低下したままです。

CD4 プラス T リンパ球は、抗体とナチュラルキラーを生成する B リンパ球と、微生物を破壊する CD8 プラス リンパ球の制御を担当します。3 ウイルス感染では、CD4 プラス T 細胞は、ウイルスを中和する可能性のある抗体を生成する B 細胞を誘導します。 、およびウイルス感染細胞を殺す細胞溶解性 CD8 プラス T 細胞。 サルコイドーシスでは、CD4 とリンパ球の抗原提示と反応の関係に欠陥があります。4 重症急性呼吸器症候群コロナウイルス-2 (SARSCoV{{ 14}}) CD4 プラスリンパ球欠損によるもの。

適切な体液性免疫は通常の細胞性免疫によって誘導されます。 したがって、サルコイドーシス患者では体液性免疫が不十分である可能性があります。 SARS-CoV-2 は抗体の血清変換を伴わずに T 細胞反応を引き起こす可能性があり、これらの反応は抗体よりも正確に SARS-CoV-2 への曝露を示している可能性があります。 他のウイルス感染後に抗ウイルス抗体が存在しないことも報告されています。5-7 ワクチン接種は、SARS-CoV によって引き起こされるパンデミックを制御する最も効果的な方法として受け入れられています-2。 効果的なワクチンは投与され続けていますが、ワクチンによって誘発される免疫反応については依然として議論の余地があります。 サルコイドーシス患者がSARS-CoV-2感染に対する感受性の違いを示すのか、それともコロナウイルス感染症-19（新型コロナウイルス-19）感染後の患者の自然免疫および適応免疫状態がどのような状態にあるのかは不明のままである。

したがって、我々は、ELISA 法とインターフェロン ガンマ放出アッセイ (IGRA) を使用して、SARS-CoV-2 免疫グロブリン G (IgG) による患者の体液性および細胞性免疫状態のレベルを 2 つのグループで評価しました。サルコイドーシス患者には、新型コロナウイルス感染症が確認されている-19が、SARS-CoV-2ワクチンを接種していない患者、およびコロナバックワクチンを2回接種した患者（ワクチン接種群）で新型コロナウイルスに感染していない患者が含まれる{{7} }}。
材料と方法

研究デザイン

本研究は、2020年12月1日から2021年6月1日まで、大学病院において前向きコホート研究として実施されました。

倫理的配慮
倫理承認は、2021 年 7 月 9 日に大学の地方倫理委員会から取得されました (#137423)。

参加者

包含基準

All patients aged >サルコイドーシスと診断された18歳も含まれていた。 過去 6 か月以内に PCR 検査で陽性反応を示し、SARS-CoV-2 のワクチン接種を受けていない患者は、SARS-CoV-2- 感染グループに含まれていました。 新型コロナウイルス感染症-19の病歴はないが、2回のCoronaVacワクチン接種を受けており（ワクチンの最後の投与は少なくとも1か月前に行われた）、過去6か月以内に免疫抑制剤を積極的に使用していない患者が含まれていたワクチン接種グループでは。

除外基準

SARS-CoV-2-感染グループの場合: 重度の COVID 患者-19（感染中はサービス室または集中治療室で経過観察されている）。

すべての患者: 免疫反応を損なう可能性のある追加の基礎疾患 (例: がん、糖尿病 (DM)、慢性腎不全)、Biontech ワクチンの接種歴がある、または同意を望まない。

抗 SARS-CoV-2 NCP ELISA (IgG)

ほとんどの場合、各ボランティアから 3 つのサンプルが真空分離ゲルの入ったチューブに収集されました。 血液 3 ml を 5,{3}} rpm で 5 分間遠心分離した後に得られた血清サンプルを微小遠心管に等分し、さらなる試験のために -20 度で保存しました。 研究の開始時に、血清サンプルを室温で解凍しました。 さらに、ELISA キットは使用前に 30 分間室温に放置しました。 サンプル血清を希釈し (1:101)、ELISA 検査を Triturus Instrument (Grifols, Barcelona,​​ Spain) を使用して半自動で実施しました。 抗 SARS-CoV-2 NCP ELISA (IgG) キットは、メーカーの指定されたインキュベーション条件および試験指示に従って使用されました。 血清サンプル中の異なる抗体濃度の標準曲線は、6 つのキャリブレーション血清について測定された光学密度値を、対応する単位 (直線/直線) に従って点から点までプロットすることによって作成されました。

結果を解釈するには、<0.8 was considered negative, ≥0.8 to <1.1 as the cutoff value, and ≥1.1 as positive.

抗 SARS-CoV-2 QuantiVac ELISA (IgG)

血清サンプルは試験当日に-20度の冷凍庫から取り出し、室温に戻しました。 次に、テストキットを使用前に 30 分間室温に放置しました。 ここでも、半自動 Triturus 装置を使用してサンプルを希釈し、テストを実行しました。 Anti-SARS-CoV-2 QuantiVac ELISA (IgG) キットは、メーカーが指定したインキュベーション条件および試験指示に従って実行されました。 各抗体の標準曲線は前述のように作成されました。 「ポイントツーポイント」プロットを使用して、コンピューターで標準曲線を計算しました。<8 RU/ml was interpreted as a negative result, ≥8 to <11 RU/ml as the cutoff value, and ≥11 RU/ml as the positive result.

SARS-CoV-2 インターフェロン ɣ 放出検査 (IGRA)

全血サンプルをヘパリン リチウム採血管に採取し、0.5 mL を刺激チューブ (CoV IGRA BLANK、CoV IGRA TUBE、および CoV IGRA STIM) に移しました。 37度で16-20時間放置。 インキュベーション期間の終わりに、刺激チューブの遠心分離を 12,{6}} rpm で 10 分間実行しました。 次に、血漿の上清をポリプロピレンチューブに入れて-20度でさらなる試験のために保存しました。 インターフェロン ガンマ (INF-ɣ) 放出テストは、製造業者のガイドラインに従って実施されました。 ELISA プレートの測光色強度測定は、自動プレートリーダー (ELx800、BioTek、バーモント州、米国) で 450 nm の波長で適用されました (参照範囲: 620-650 nm)。

IFN-γ濃度は標準曲線を使用して決定されました。 結果を解釈するために、Magellan F50 プログラム (バージョン 7.2) を使用して OD 値を mUI/ml 値に変換しました。 この結果は、CoV IGRA チューブ値を CoV IGRA ブランク値で調整することによって得られました。 値が<100 ml U/ml, the interaction with SARS-CoV-2 was considered negative. If the value was 100-200 ml U/ml, it was considered as the limit value, and a value >200 ml U/ml は、SARS-CoV-2 との陽性相互作用を示すと考えられました。

データ収集

個人情報と人口統計情報、および新型コロナウイルス-19と新型コロナウイルス-19のワクチン接種歴が患者から得られました。 SARS-CoV-2 IGRA および抗 SARS-CoV-2 IgG (NCP および QuantiVac) の結果は検査記録から得られました。

研究規模

サルコイドーシス外来診療所のサルコイドーシス患者 240 人のうち、56 人がこの研究の対象となる基準を満たしました。 患者は、SARS-CoV-2-感染グループとワクチン接種グループに分類されました。 ELISA 検査と IGRA 検査を使用して、それぞれ SARS-CoV-2 IgG と INF-ɣ レベルを測定し、SARS-CoV-2 IgG に対する患者の免疫状態を調査しました。

患者の自然免疫状態はワクチン接種を受けずに新型コロナウイルス感染歴がある患者について評価されました-19が、患者の獲得免疫状態はコロナバックワクチンを 2 回接種し、新型コロナウイルスにかかったことがない患者において評価されました-19 （これらの患者には、病気の疑いを引き起こす可能性のある症状や影響を受けた患者との接触歴はありませんでした）。

統計分析

統計分析には SPSS ソフトウェア バージョン 20.0 (AIMS、イスタンブール、トルコ) を使用しました。 カテゴリ変数はパーセンテージと度数として示され、連続変数は中央値と四分位範囲として示されました。

結果

合計56人の患者が登録され、そのうち49人（87.5パーセント）が女性、7人（12.5パーセント）が男性であった。 患者の平均年齢は53.5±10.9歳であった。 サルコイドーシスと診断された患者の平均追跡期間は6.68±4.03(1-10)年でした。 このうち、患者の 37.5% がステージ 2 で、62.5% がステージ 3 のサルコイドーシスでした。 全体のうち、患者の 42.9 パーセントには併存疾患がありませんでしたが、32 人（57.1 パーセント）には併存疾患がありました（表 1）。

SARS-CoV-2感染グループの患者28名（24F/4M）の平均年齢は48.1±11.3（30-63）歳であったのに対し、ワクチン接種グループの患者28名の平均年齢は48.1±11.3（30-63）であった。 55.6 ± 9.32 (38-68) 年。 SARS-CoV-2-感染グループの感染後の平均経過時間は97.32±42.1(45-180)日であり、2回目のワクチン接種からは61.3±28.7(37-120)日が経過していたワクチン接種グループに投与されました。 サルコイドーシスと診断されたSARS-CoV-2-感染グループとワクチン接種グループの患者の追跡期間は、それぞれ7.41±4.89年と5.96±3.15年であった。 サルコイドーシスの段階および併存疾患に応じた平均 BMI 分布を表 1 に示します。

A total of 15 (53.6%) of the 28 patients in the SARS-CoV-2- infected group were included in the study within the first 3 months of the disease diagnosis, while 13 (46.4%) patients were included at 3-6 months (Table 1). In the SARS-CoV-2-infected group, within 3 months of infection, the antibody test with QuantiVac ELISA was positive in 13 (86.6%) of the 15 patients, and the antibody test was positive in 5 of 13 patients (38.4%) who had passed >感染後 3 か月後 (表 2)。 抗SARS-CoV-2 NCP ELISA（IgG）結果が陽性だった患者はSARS-CoV-2-感染グループでは64.3パーセント（n=18）でしたが、それは3.5パーセントでした（ n=1) はワクチン接種グループに含まれます。 抗 SARS-CoV-2 QuantiVac ELISA (IgG) の結果は、SARS-CoV-2- 感染患者の 64.3 パーセント (n=18) で陽性であり、10.7 パーセント (n {{23}) }) ワクチン接種を受けた患者の数（表 2）。

SARS-CoV-2-感染グループの患者の89.3パーセントがIGRA検査で陽性であったのに対し、ワクチン接種グループでは陽性率は14.3パーセントでした（表2）。

議論

抗 SARS-CoV-2 NCP IgG および抗 SARS-CoV-2 QuantiVac IgG は、SARS-CoV-2-感染グループの 64.3% で検出されましたが、SARS-CoV{{ 11}} IGRA 検査は、感染から 3-6 か月以内に同じ患者の 89.3% で陽性でした。 T 細胞は長期的な免疫記憶を提供できますが、特異的な抗体応答は感染後時間の経過とともに減少します。 ダンら。 CD4 プラス T 細胞、メモリー B 細胞、CD8 プラス T 細胞を含む、SARS-CoV-2 に対する以下の適応免疫の免疫細胞のそれぞれが、6 か月以上で異なる動態を示したと報告しました。 Kruseら9は、新型コロナウイルス-19感染後8週間のTスポット検査で測定されたT細胞反応は83.6パーセントであったと報告した。 感染患者から得られたこれらの結果は、将来的には T 細胞代替エンドポイントの確立の理解を促進する可能性がありますが、現時点では補​​足研究が必要です。

抗 SARS-CoV-2 NCP IgG、抗 SARS-CoV-2 QuantiVac IgG、および SARS-CoV-2 IGRA は、96.5 パーセント、89.3 パーセント、85.7 パーセントで陰性と検出されました。それぞれワクチン接種グループ。 ワクチン接種後、サルコイドーシス患者の10.7パーセントがIgG陽性、14.3パーセントがIGRA陽性であることが判明した。 文献では、サルコイドーシス患者におけるワクチン接種の有効性について矛盾した結果が報告されています。 例えば、Tavana et al.10 は、23 人のサルコイドーシス患者と 26 人の対照者にワクチン接種を行い、複数のインフルエンザ抗原に対する免疫学的反応はサルコイドーシス患者と健康な対照者の間で差がないと結論付けました。 現時点では、サルコイドーシス患者におけるワクチン接種の有効性は不明です。
SARS-CoV-2 の予防接種後、抗体力価は急速に低下する可能性があり 11、感染後の対照では高い抗体力価が検出されました。12-14 抗体力価がどのレベルでどのくらいの期間持続するかは不明です。 ある研究では、細胞性および体液性反応の持続が Ad26.COV2.S ワクチン接種後 8 か月間継続しました。15 サルコイドーシス患者 56 人の抗 SARS-CoV-2 QuantiVac IgG 力価を 37 日から 180 日の間に測定しました。感染後、ワクチン接種後の患者の10.7パーセント、自然免疫後の患者の64.3パーセントで陽性（11RU/ml以上）であることが判明した。

ある研究では、サルコイドーシス患者と健常対照者を比較し、破傷風ワクチン接種後のサルコイドーシス患者でわずかな抗体反応が認められた。5本研究では、サルコイドーシス患者におけるSARS-CoV-2コロナVacワクチン接種後の抗体レベルが低いことが検出された。 別のケーススタディでは、リウマチ性疾患により免疫抑制剤を使用している患者において、2回のmRNAワクチン接種後に体液性反応は起こらなかった7。ある研究では、SARS-CoV-2およびSARS-CoV-2 IGRAが、SARS-CoV-2に感染した個人をスクリーニングするための免疫応答の有用な指標であることを発見しました。16

チリの大規模な集団を対象に実施された研究では、研究対象集団の95.7パーセントで抗体が検出されました。 コロナバックの2回目のワクチン接種から9週間後、追跡調査においてDMや高血圧などの疾患を患う患者では割合のより速い減少が認められた[17]。同様に、患者では10.7パーセントという低い抗体価を記録した。コロナバックワクチン接種後、37-120日間サルコイドーシスを患った。 透析や腎移植を受けている慢性腎不全患者では、体液性免疫の低下により抗SARS-CoV-2 IgGレベルの低下が検出されました18。私たちの知る限り、これはSARSに対する免疫反応を評価した最初の研究です。サルコイドーシス患者におけるCoV-2。 これらのデータは、サルコイドーシス患者の体液性および細胞性免疫がコロナバックワクチンに対して不十分であることを明らかにしています。

この研究では、自然免疫およびCoronaVacによる獲得免疫後の抗体レベルとIGRA値のみを検査しました。 mRNA ワクチン接種情報を提供するためのデータは収集されませんでした。 この研究のもう 1 つの限界は、患者の血液サンプルが予防接種後の異なる時点で採取されたため、同時の結果が反映されていないことです。

サルコイドーシス患者では、SARS-CoV-2に対する自然免疫が時間の経過とともに低下することが判明しました。 サルコイドーシス患者では、自然免疫応答が適応免疫応答より優れています。 コロナバックワクチンは、サルコイドーシス患者の体液性免疫と細胞性免疫を誘導するには不十分です。 IGRA 法は、サルコイドーシス患者における IgG 検出に対する感度と比較して、SARS-CoV-2 に対する自然免疫応答および適応免疫応答を生成しました。

倫理委員会の承認:

倫理的承認は、2021 年 7 月 9 日にイスタンブール大学セラパシャ、セラパシャ医学部倫理委員会から取得されました (#137423)。

データ共有に関する声明:

この記事の結論を裏付ける生データは、不当な留保なしに著者によって提供されます。
著者の貢献:

コンセプト - EA、B.Ç.M.、RA、SS、BK。 デザイン - EA、B.Ç.M.、RA、SS、BK。 データの収集または処理 - EA、B.Ç.M.、RA、SS、BK。 分析または解釈 - EA、B.Ç.M.、RA、SS、BK; 文献検索 - EA、B.Ç.M.、RA、SS、BK; 執筆 - EA、B.Ç.M.、RA、SS、BK

利益相反:

著者らは利益相反を宣言していません。

資金提供:

著者らは、この研究は財政的支援を受けていないと宣言した。

参考文献

Zissel G、Prasse A、Müller-Quernheim J. サルコイドーシス--免疫病原性の概念。 Semin Respir Crit Care Med. 2007;28:3-14。 [相互参照]

2. Musellim B、Okumus G、Uzaslan E、他。 トルコにおける間質性肺疾患の疫学と分布。 Clin Respir J. 2014;8:55-62。 [相互参照]

3. デュレオー A、シャペロン C、ビアール L、他。 サルコイドーシスにおける重症感染症: 585 人の患者コホートにおける発生率、予測因子、および長期転帰。 医学（ボルチモア）。 2017;96:e8846。 [相互参照]

4. ニュージャージー州スイス、サルーム R、ガンジー S、他。 サルコイドーシス患者の末梢血における顕著な CD4、CD8、および CD19 リンパ球減少は、重篤な疾患症状と相関しています。 PLoS ワン。 2010;5:e9088。 [相互参照]

5. Seyhan EC、Günlüoğlu G、Altin S、他。 サルコイドーシスにおける破傷風ワクチン接種の結果。 サルコイドーシス血管びまん性肺疾患。 2012;29:3-10。 [相互参照]

6. Barouch DH、Stephenson KE、Sadoff J、他。 Ad26.COV2.S ワクチン接種後 8 か月後の持続的な体液性および細胞性免疫反応。 N 英語 J 医学 2021;385:951- 953。 [相互参照]

7. コノリーCM、ボヤルスキーBJ、ルディJA、他。 リウマチ性および筋骨格系疾患患者におけるSARS-CoV-2メッセンジャーRNAワクチン2回接種後の体液性反応の欠如: 症例シリーズ。 アン・インターン医師。 2021;174:1332-1334。 [相互参照]

8. ダン・J・M、マテウス・J、カトー・Y、他 SARS-CoV-2 に対する免疫記憶を感染後最大 8 か月間評価しました。 化学。 2021;371:eabf4063。 [CrossRef] 9. Kruse M、Dark C、Aspden M、他。 SARS-CoV-2- 反応性 T 細胞を検出するための T-SPOT®.COVID 検査のパフォーマンス。 Int J 感染障害 2021;113:155-161。 [相互参照]

10. タヴァナ S、アルガーニ H、ゴーラミン S、他。 肺サルコイドーシス患者におけるインフルエンザワクチン接種：有効性と安全性。 インフルエンザその他の呼吸器ウイルス。 2012;6:136-141。 [相互参照]

11. イバロンド FJ、フルチャー JA、グッドマン・メザ D、他。 軽度の新型コロナウイルス感染者における抗 SARSCoV-2 抗体の急速な減衰-19。 N 英語 J 医学 2020;383:10857。 [相互参照]

12. Ripperger TJ、Uhrlaub JL、Watanabe M、他。 直交 SARS-CoV-2 血清学的アッセイにより、低有病率地域社会の監視が可能になり、持続的な体液性免疫が明らかになります。 免疫。 2020;53:925-933.e4。 [相互参照]

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