MiR -545-3 p–TNFSF10を介した近位尿細管上皮細胞における低酸素誘発性の上皮から間葉への移行
Mar 30, 2022
メイチュアンクオ 1、魏-チャン 2,3et al
概要：低酸素症は、腎障害の病態生理学的メカニズムの1つと見なされており、腎不全。 尿細管の上皮間葉転換（EMT）は、腎線維症の重要なプロセスです。 この研究では、トランスクリプトーム解析を利用して、近位尿細管上皮細胞（PTEC）におけるマイクロRNA（miRNA）変調EMTを介した低酸素誘発EMTを調査しました。 RNAシーケンスにより、低酸素下で培養されたPTECでは、正常酸素状態と比較して8つのmiRNAがアップレギュレーションされ、3つのmiRNAがダウンレギュレーションされていることが明らかになりました。 11のmiRNAの中で、miR -545-3 pは低酸素にさらされたPTECで最も高い発現を示し、miR -545-3 pは腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導リガンド（TRAIL / TNFSF10）の発現を抑制しました。 miR -545-3 p–TNFSF10変調を介したPTECの低酸素誘導EMT、およびTNFSF 10-弱毒化EMTは、低酸素症またはmiR-545-3p模倣トランスフェクションに起因します。 これらの発見は、miR -545-3 p–TNFSF10相互作用の独自の調節と、低酸素症によって誘発される腎障害に対するそれらの潜在的な治療効果についての新しい認識を提供しました。
キーワード: 低酸素症; miR -545-3 p; TNFSF10; 上皮間葉転換; 近位尿細管上皮細胞; トランスクリプトーム解析
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1.はじめに
腎臓病は世界的な健康問題であり、罹患率と死亡率を高め、世界中で重い経済的負担をさらに悪化させます。 腎線維化は、さまざまな腎疾患の進行不良の目印であり、末期腎疾患につながります[1]。
低酸素症はで重要な役割を果たします腎臓組織 けがそして腎線維化へのさらなる進行[2]。 低酸素症は、酸素感知のメカニズムを介した代謝、成長、細胞生存など、複数の細胞プロセスの強力な調節因子です[3]。 酸素欠乏に対する転写反応は、主に低酸素誘導因子（HIF）によって媒介されます。これは、正常な発達中および酸素の利用可能性の低下に関連する病理学的過程で機能します[4]。 慢性低酸素症は、腎障害反応を引き起こし、尿細管上皮細胞に不可逆的な表現型の変化を引き起こし、腎線維化を誘発する可能性があります[5,6]。 上皮間葉転換（EMT）は、上皮細胞が上皮の特徴を失い、間葉の特徴を獲得する腎線維症の重要なプロセスです[7,8]。 腎上皮細胞におけるHIFシグナル伝達の活性化は、EMTを促進することによって線維形成を促進する可能性があります[9]。 酸素レベルの変化とHIFを介した低酸素シグナル伝達の活性化は、EMTの重要なトリガーとモジュレーターとして浮上しています[10]。 ただし、腎臓の低酸素症誘発EMTと線維症の根底にある分子メカニズムは完全に理解されていません。
転写後調節因子としてのマイクロRNA（miRNA）は、遺伝子発現と細胞表現型の強力な調節因子と見なされています。 蓄積された証拠は、低酸素がmiRNAの生合成と活性を調節することを示しています[11]。 いくつかの研究では、miRNAのさまざまな発現と、低酸素下の腎臓におけるEMTおよび線維症の発症に対するそれらの影響が報告されています[12–14]。 Duetal。 miR-34aのダウンレギュレーションが尿細管上皮細胞のEMTを促進することを示唆しました[13]。 Xieetal。 miR-155のアップレギュレーションが近位尿細管の線維化を引き起こすことを示した[14]。 ただし、miRNAsが近位尿細管上皮細胞（PTEC）の低酸素誘導EMTの病因シグナル伝達経路を仲介するかどうかは、トランスクリプトーム解析を使用して十分に調査されていません。
したがって、この研究では、正常酸素および低酸素条件下でのPTECのsmall RNAシーケンス分析を使用して、腎臓損傷の低酸素媒介シグナル伝達経路を調節する潜在的なメカニズムを調査しました。
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2。材料と方法
2.1。 細胞培養および形態観察
ヒトPTEC（ATCC PCS {{0}}）は、製造元の提案に従って、腎上皮細胞基本培地（ATCC PCS400030™）と0.5％ウシ胎児血清（FBS）で培養されました。 HK -2セルは、American Type Culture Collection（Manassas、VA、USA）から購入しました。 HK -2細胞は、2％のFBSを添加したケラチノサイト-SFM（GIBCO）で培養しました。 細胞は、正常酸素状態（O2、21パーセント）および低酸素状態（O2、1パーセント）で培養されました。
ヒトPTECにおけるEMTの特徴は、光学顕微鏡（Nikon ECLIPSE TE 20000- S、Nikon、東京、日本）を使用した形態変化の連続観察によって特定されました。
2.2。 ウエスタンブロット分析
HK -2細胞の総タンパク質は、RIPA（放射免疫沈降アッセイ）溶解バッファー（EMD Millipore、マサチューセッツ州バーリントン、米国）を使用して抽出しました。 変性タンパク質は9〜11パーセントのSDS-PAGE電気泳動で分離され、特定の一次抗体と二次抗体によるブロッキングとイムノブロッティングに続いてPVDFメンブレンに転写されました。
HIF -1（カタログ#nb 100-105、Novus）、HIF -2（カタログ＃7096s、細胞シグナル伝達）、N-カドヘリン（カタログ＃610921、BD Biosciences）、ビメンチン（カタログ＃550513、BD Biosciences）、E-カドヘリン（Catalog＃610182、BD Biosciences）、スラッグ（Catalog＃9585s、Cell Signaling）、およびGAPDH（Catalog＃MAB374、EMD Millipore）を利用しました。 ブロットのシグナルは、Proteinsimple plus Fluorchem Qシステム（Alpha Innotech、San Leandro、CA、USA）を使用してキャプチャーしました。 ブロットのデンシトメトリーは、Image Jソフトウェア（ベセスダ、メリーランド州、米国）を使用して計算されました。
2.3。 SmallRNAシーケンス
HK-2 cells were cultured under hypoxia or normoxia conditions for 48 h. NGS was performed to examine the miRNA profiles of HK-2 cells. Trizol® Reagent (Invitrogen, Waltham, MA, USA) was utilized to extract total RNA from the harvested cells, which were isolated for further RNA preparation and small RNA-seq by Welgene Biotechnology Company (Welgene, Taipei, Taiwan). The quality of the extracted RNA was evaluated by an RNA integrity number (RIN), which was measured using an Agilent Bioanalyzer (Agilent Technology, Santa Clara, CA, USA). Samples were prepared to manufacture the small RNA library and then to execute deep sequencing by the Illumina sample preparation kit. PCR amplification was performed to ligate total RNA with 30 and 50 adaptors and to reversetranscription into cDNA. cDNA constructs were separated using 6% polyacrylamide gel Biomolecules 2021, 11, 1032 3 of 14 electrophoreses, and 18–40 nucleotide RNA fragments (140–155 nucleotide in length with both adapters) were extracted. The sequencing of the libraries was performed using an Illumina GAIIx instrument (50 cycle single read) and then the results were processed by the Illumina software. The differentially expressed miRNAs between HK-2 cells treated with normoxia or hypoxia were defined at >2-fold change and >100万回あたり10回の読み取り。
2.4。 データの可用性
この出版物で生成されたRNAシーケンシングデータは、アクセッションGSE178810の下でGEOに寄託されています。
2.5。 RNA分離、逆転写、および定量的リアルタイムPCR（Q-PCR）
正常酸素または低酸素条件下で培養された細胞、またはHIF -1阻害剤（CAY10585、（3-（2-（4-アダマンタン-1-イルフェノキシ）で処理された細胞）からのトータルRNA ）-アセチルアミノ）-4-ヒドロキシ安息香酸メチルエステル）を48時間（10 uM、カタログ＃400092、Calbiochem）、それぞれTRIzolおよびTRIzolLS試薬（Life Technologies）を使用して単離しました。miRNAはMir-Xを使用して逆転写しました。 ™miRNAFirst-StrandSynthesis Kit（Catalog＃638313 Takara、Japan）SYBR Greenを使用して、QuantStudio 3Q-PCRシステム（ThermoFisher Scientific、Foster City、CA、USA）で定量miRNAを分析しました。miRNAの相対発現レベル細胞内のRNAはそれぞれ内部コントロールU6またはGAPDHに対して正規化されました。相対的な発現は2-ΔΔCt法を使用して示されました。使用されたプライマーは表S1にリストされています。
2.6。 バイオインフォマティクス分析ツール
特定のmiRNAのターゲットは、2つのバイオインフォマティクスWebサイト、miRmap[15]およびTargetScan[16]データベースを使用して予測されました。これらのデータベースは、さまざまな生物のmiRNAターゲット予測を提供できます。 miRmapとTargetScanソフトウェアはどちらも、潜在的な特定のmiRNAターゲットを分類し、miRmapスコアとContextplusplusスコアのパーセンタイルに基づいてmiRNAターゲットの抑制強度を示します[17]。
選択したmiRNAターゲットの生物学的機能は、遺伝子/タンパク質の「コア分析」を提供するIPAソフトウェア（Ingenuity Systems、米国カリフォルニア州レッドウッドシティー）を使用して分析しました。 コア分析から得られた標準的な経路、ネットワーク、および毒性リストを使用して、遺伝子/タンパク質の潜在的な病因を特定することができます[18]。
2.7。 一過性トランスフェクション
miR -545-3 pミミック（200 nM）およびミミックのmiRネガティブコントロール（miR-NC、200 nM）（GE Healthcare、USA）は、Lipofectamine™RNAiMAXトランスフェクション試薬（カタログ＃13778075）を使用して細胞にトランスフェクトされました。 、ThermoFisher Scientific、米国）メーカーのプロトコルに従います。 使用したmiR-545-3pミミックのシーケンスは、補足表S1にリストされています。
2.8。 酵素免疫測定法（ELISA）
正常酸素状態、低酸素状態、または低酸素状態でmiR -545-3 pミミックを48時間トランスフェクションした後、HK -2細胞の上清のTNFSF10濃度を、市販のQuantikine1 ELISAキット（以前のように、製造元の指示に従ってカタログ#DTRL 00、R＆D Systems）
説明された。
2.9。 統計分析
連続変数は、必要に応じて平均±平均の標準誤差（SEM）または中央値（25パーセンタイルおよび75パーセンタイル）として表され、カテゴリ変数はパーセンテージとして表されました。 連続変数間の相関は、スピアマン相関によって調べられました。 グループ間の連続変数の差の有意性は、スチューデントのt検定または一元配置分散分析（ANOVA）を使用してテストされ、その後、必要に応じてテューキー補正で調整された事後検定が行われました。 統計的生体分子2021、11、1032 4の14の分析は、GraphPad Prism 5.0（GraphPad Software Inc.、San Diego、CA、USA）を使用して実施されました。 統計的有意性は、の両側p値に設定されました。<>
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3.結果
3.1。 低酸素症はPTECでEMTを誘発します
低酸素症は、の病態生理学的メカニズムに関与することが報告されています腎臓障害[9]。 低酸素条件下でのヒト腎PTEC（RPTEC）およびHK -2細胞の表現型の変化を調査するために、細胞を正常酸素（O2、21パーセント）および低酸素（O2、1パーセント）条件下で48時間培養しました。 HIF-1とHIF-2の発現は、6時間の低酸素条件下でRPTECとHK -2細胞で上昇することがわかりました（図1A）。 細胞の形態が観察され、正常酸素状態と比較して低酸素状態で丸い形から細長い運動性の表現型に変化しました（図1B）。
ウエスタンブロッティングを使用して、正常酸素状態または低酸素状態でのPTECのEMTを評価しました。 低酸素症は、48-時間のインキュベーション期間後、ヒトPTEC（図1C）およびHK -2細胞（図1D）でN-カドヘリンおよびビメンチンの発現を上昇させ、E-カドヘリンの発現を低下させました。 したがって、低酸素症はPTECでEMTを引き起こします。
3.2。 PTECの低酸素誘発EMTに参加しているmiR-545-3pの同定
低酸素によって誘発される潜在的なmiRNAの探索のフローチャートを図2Aに示します。 正常酸素または低酸素下で24時間培養されたHK-2細胞からの低分子RNAのプロファイルは、NGSによってプロファイルされました。 正常酸素下で培養されたものと比較して、低酸素にさらされたHK -2細胞で、有意な2-倍の変化を伴う21のmiRNAが見つかりました。
21のmiRNAのうち、10のmiRNAがアップレギュレーションされ、11のmiRNAがダウンレギュレーションされました。 生の読み取りカウントが10以下のmiRNAを除外した後、11個の有意なmiRNA（8個がアップレギュレーションされ、3個が低酸素条件下でダウンレギュレーションされた）がヒートマッピングによって表示されました（図2Bおよび表S1）。 RT-Q-PCRを使用して、正常酸素状態と低酸素状態でのヒトRPTECとHK-2細胞を含む2つのinvitroモデルでこれらのmiRNAの発現を検証しました。 11種類のmiRNAのうち、miR -190 a-3pとmiR-1277-3pはqT-PCRで検出できず、miR -1269 a、miR{の発現に一貫性がありませんでした。 {18}} p、miR - 33 b -5 p、miR -33 a -5 p、およびmiR -219 a-5pが見つかりました低酸素処理後のヒトPTECおよびHK-2細胞で（図2C–G）。 miR -1266-5 p、miR -4474-3 p、およびmiR -5579-3 pレベルは、低酸素条件下でヒトPTECとHK -2細胞の両方で減少しました（図2H–J）。 miR -545-3 pの発現は、低酸素にさらされたHK -2細胞の11のmiRNAの中で最も高かっただけでなく、低酸素条件下のヒトPTECでも上昇しました（図2K）。 さらに、HIF-1がmiR-545-3 p発現の調節に関与しているかどうかを調べ（図S1）、HIF-1阻害剤がHKでmiR-545-3pの上昇を抑制することを発見しました。低酸素によって誘発された-2細胞（図2L）。 上記の発見は、HIF-1が低酸素条件下で近位尿細管におけるmiR-545-3p発現を調節したことを示した。
低酸素にさらされたHK-2細胞の11のmiRNAの中でmiR-545-3pの最高の発現によると、miR-545-3pベースの潜在的なターゲットの病態生理学的機能とmiRmapスコアmiRmapデータベースによると>90は、IPAデータベースのコア分析を使用して分析されました。 IPA分析の標準的な経路のトップ10は、miR -545-3 pの病態生理学的機能に成長因子によるEMTの調節が含まれていることを明らかにしました（図3A）。 トックスリスト分析は、miR -545-3 pが腎障害および酸化ストレス反応と相関していることを示しました（図3B）。 バイオインフォマティクス分析の結果に基づいて、低酸素症はmiR-545-3p変調を介してPTECでEMTを誘発する可能性があります。
さらに、miR -545-3 pの潜在的なターゲットのネットワーク分析では、miR-545-3pによって制御されるターゲットとしてのmiR-545-3pとTNFSF10も細胞増殖と細胞に関与していることが示されました。サイクル（表3）。
miRmapとTargetScan（バージョン7.1）を使用して、バイオインフォマティック予測を実施しました。これは、TNFSF10の3/UTRにmiR-545-3pの結合のターゲットシード配列が含まれていることを示しています。 確率的ミップマップスコアは、miR -545-3 pの予測される標的遺伝子の確率を示します（図3C）。 TRAILの3/UTRにおける種保存されたmiR-545-3pシードシーケンスを図3Dに示します。 低酸素治療は、ヒトPTEC（図3E）およびHK -2細胞（図3F）のTNFSF10mRNAレベルを低下させました。 さらに、低酸素下のHK -2細胞に由来する上清では、正常酸素状態と比較して、TNFSF10 mRNAレベルの低下が見られました（図3G）。 さらに、miR -545-3 pのトランスフェクションは、HK-2細胞の上清におけるTNFSF10mRNA発現の低下を模倣しました（図3H）。 HIF -1阻害剤は、低酸素症によって誘発されたHK-2細胞におけるTNFSF10mRNA発現の減少を逆転させました（図3I）。 したがって、低酸素はmiR -545の発現を調節し、これによりTNFSF10の発現が減少し、HIF-1はmiR-545-3 p–TNFSF10経路を調節する可能性があります。
3.4。 低酸素症はmiR-545-3p–TNFSF10調節によりHK細胞にEMTを誘導する
miR -545-3 pが近位尿細管の低酸素誘導EMTを調節したかどうかを評価するために、HK-2細胞におけるmiR-545-3pとTNFSF10の生物学的効果を評価しました。 まず、TNFSF10（20 ng / mL）による処理は、HK -2細胞の細胞生存率に影響を与えませんでした（図4A）。 さらに、EMT調節の転写因子の1つとして、ナメクジの発現を調べました。 ナメクジの発現は、miR -545-3pでトランスフェクションした後のHK-2細胞で増加し（図4B）、正常酸素状態でTNFSF10で処理したHK -2細胞では抑制されました（図4C）。 miR -545-3 pミミックのトランスフェクション後、E-カドヘリンの発現はダウンレギュレーションされ、N-カドヘリンとビメンチンの発現は正常酸素状態のHK -2細胞でアップレギュレーションされました（図4D）。 ただし、TNFSF10は、HK-2細胞のEMT誘導におけるmiR-545-3pの効果を逆転させました。 さらに、TNFSF10（20 ng / mL）で処理すると、E-カドヘリンのダウンレギュレーションが防止され、N-カドヘリンとビメンチンのアップレギュレーションが抑制され、HK-2細胞の低酸素によって誘発されたHK-2細胞のEMTが逆転しました（図4E）。 これらの発見は、低酸素がmiR -545-3 p– TNFSF10経路の調節を通じてPTECのEMTに寄与し、TNFSF10が低酸素とmiR-545-3pによって誘発されたPTECのEMTを減衰させる可能性があることを意味しました。
4。議論
低酸素症は、形態学的および病態生理学的機能障害を引き起こします肝臓、の急激な減少につながる腎臓機能[16]。 この研究では、トランスクリプトーム解析を使用して、PTECの低酸素誘導EMTプロセスに関与する潜在的なmiRNAを調査し、miR -545-3 pが低酸素で処理されたPTECでアップレギュレーションされ、HIF-1がmiR{{ 4}}pおよびTNFSF10の発現。 miR -545-3 pのアップレギュレーションは、低酸素下のPTECでEMTを引き起こしました。 さらに、TNFSF10は低酸素症で治療されたPTECのEMTを改善しました。 したがって、miR -545-3 p–TNFSF10の独自の調節を実現することで新しい認識を得ており、そこから腎臓病の進行を解釈することができます（図5）。
私たちの調査結果は、近位尿細管における低酸素調節miR-545-3p発現を示した。 miRNAは、遺伝子の発現または活性の調節に重要な役割を果たし、疾患の発症または進行の病態生理学的メカニズムをさらに調節することが知られています[19]。 以前の研究では、miR -545が腫瘍プロモーターとして機能し、細胞増殖、浸潤、および遊走を調節し、さらに肝細胞癌を引き起こすことが明らかになりました[20,21]。 miR -545は炎症過程を誘発し、Tim-3を標的とすることでB型肝炎関連の肝硬変に寄与しました[22]。 逆に、miR -545-3pはlncRNAXISTを部分的にブロックし、低酸素/再酸素化によって誘発される心臓筋芽細胞のアポトーシスを増強しました[23]。 ただし、miR-545が腎臓病の病因に関与しているかどうかは十分に調査されていません。 いくつかの研究は、miR-545-3pが敗血症関連の急性腎障害に関与していることを示しました[24,25]。 タンら。 circ_0091702はmiR-545-3pのスポンジとして機能し、トロンボスポンジン2のアップレギュレーションを介してリポ多糖（LPS）によって誘導されるHK-2細胞のアポトーシスを抑制すると報告されています[24]。 Huetal。 長い非コーディングのCancerSusceptibility2の過剰発現は、miR -545-3 p /ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体軸を調節することにより、HK-2細胞におけるLPS誘導アポトーシスを軽減することを発見しました[25]。 Shietal。 circPRKCIは、miR -545/ジンクフィンガーEボックス結合ホメオボックス2を抑制することにより、HK-2細胞でLPSによって誘発された炎症性損傷を救済したことを示しました[26]。 この現在の研究は、最初に、腎臓の低酸素誘発性EMTに対するmiR-545-3pの影響を示しました。 低酸素症はmiR-545-3pレベルを上昇させ、HIF-1はPTECにおけるmiR-545-3p発現を調節しました。 miR -545-3 pはナメクジの上昇を誘発し、さらにEMTを促進しました。これには、miR -545-3 p E-カドヘリン発現の抑制、PTECにおけるN-カドヘリンおよびビメンチン発現の増強が含まれます。 低酸素下の近位尿細管におけるEMTプロセスを調節する新しいシグナル経路を示した。
低酸素症はまた、TNFSF10の発現と生理学的プロセスを調節することが報告されています[27,28]。 Fangetal。 HIF -1は、外傷性脳損傷におけるTNFSF10デコイ受容体1（DcR1）の発現を増加させることにより、TNFSF10-誘導アポトーシスを増加させることを示唆しました[27]。 原島ほか HIF-2が低酸素条件下で膵臓癌細胞のTNFSF10に対する感受性を増加させることを示した[28]。 それにもかかわらず、特に低酸素症誘発性腎障害において、miRNAの転写後を介してTNFSF10を調節する方法は明らかではありません。 私たちの発見は、低酸素症がmiR-545-3pを介して近位尿細管のTNFSF10発現を調節するという新しい洞察を提供します。 低酸素症はmiR-545-3pレベルを増加させ、次にPTECとその上清でのTNFSF10発現を抑制してEMTプロセスを誘発しました。 さらに、低酸素症がHIF-1を介して近位尿細管のmiR-545-3 p–TNFSF10経路を調節することもわかりました。 ただし、HIF-2が低酸素環境下で腎臓のこの経路を調節するかどうかは明らかではありません。 腎臓損傷におけるmiR-545-3p–TNFSF10調節に対するHIF転写因子のサブタイプの影響を調査するには、さらなる研究が必要です。
蓄積された証拠は、TNFスーパーファミリーのメンバーが腎臓病の発症と進行の病態生理に積極的に関与していることを示しています[29]。 TNFスーパーファミリーのメンバーは、腎障害のさまざまな段階に応じて、分化、増殖、壊死、アポトーシス、線維症などの細胞のパフォーマンスを調節します[30,31]。 潜在的な抗癌治療薬としてのTNFSF10は、特定のI型膜貫通死受容体への結合を介して細胞増殖を阻害し、細胞アポトーシスを増強し、それによってさまざまな癌の化学療法治療の有効性を支援する可能性があります[29,32]。 最近の研究では、血清TNFSF10と非癌性疾患の臨床転帰との間に負の関係があることがわかりました[33,34]。 ただし、腎臓病におけるTNFSF10の役割は完全に調査されていません。 循環TRAILの発現の上昇は、糖尿病性腎疾患や最小限の変化の疾患などのいくつかの腎疾患の患者で見られました[35,36]。 TNFSF10を阻害すると、虚血再灌流腎臓のinvivoモデルで損傷が軽減されます[37]。 逆に、常染色体優性多発性嚢胞腎の患者では、正常な個人と比較して循環TNFSF10が減少しました[38]。 そうでなければ、腎臓病に対するTNFSF10の一貫性のない影響も報告されています。 糖尿病性腎症におけるPTECへのアポトーシス効果とは対照的に[30]、Nguyenetal。 TNFSF10がループス腎炎において炎症反応と細胞増殖を発揮したことを報告しました[39]。 これらの矛盾する記述は、腎臓病のさまざまな種類と段階の間でのTNFSF10のさまざまな規制に関連している可能性があります。 現在まで、腎臓病の発症と進行におけるTNFSF10の実際の役割について結論を出すことは依然として困難です。 この現在の研究は、TNFSF10がPTECの生存率に影響を及ぼさないことを発見し、このタイプの細胞でアポトーシスを誘導しなかったことを示唆しています。 TNFSF10の過剰発現は、近位尿細管の低酸素症によって誘発されるEMTを改善する可能性があり、低酸素症関連の腎障害におけるmiR -545-3 p–TNFSF10の潜在的な治療効果を示唆しています。
5。結論
この研究は、低酸素がmiR -545-3 p– TNFSF10変調を介してEMTに寄与し、miR-545-3p阻害とTNFSF10がPTECにおける低酸素誘発EMTを逆転させたことを示しました。 したがって、これらの発見は、miR -545-3 p–TNFSF10の独自の調節と、低酸素症によって誘発される腎障害におけるそれらの潜在的な治療効果についての新しい洞察を提供します。
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参考文献
1. Liu、M .; 劉、L .; バイ、M .; 張、L .; Ma、F .; ヤン、X .; Sun、S. Twist / miR -214 / E-カドヘリン軸の低酸素誘発性活性化は、腎尿細管上皮細胞間葉移行および腎線維化を促進します。 生化学。 生物物理学。 解像度 コミュン。 2018、495、2324〜2330。
2.ヘイマン、SN; Khamaisi、M .; ローゼン、S .; Rosenberger、C.腎実質低酸素症、低酸素症反応および慢性腎臓病の進行。 午前。 J.ネフロール。 2008、28、998〜1006。
3. Giaccia、AJ; サイモン、MC; ジョンソン、R。低酸素症の生物学：発達、正常な機能、および病気における酸素感知の役割。 GenesDev。 2004、18、2183〜2194。
4. Movafagh、S .; クルック、S .; Vo、K.活性酸素種による低酸素誘導因子-1 aの調節：古い議論における新たな展開。 J.CellBiochem。 2015、116、696〜703。
5. Manotham、K .; 田中徹; 松本正明; 大瀬、T .; 稲城亮; 宮田徹; 黒川健一; 藤田徹; インゲルフィンガー、JR; Nangaku、M.低酸素症によって誘発された培養尿細管細胞の分化転換。 KidneyInt。 2004、65、871〜880。
6.罰金、LG; Bandyopadhyay、D .; Norman、JTタンパク尿以外のさまざまなタイプの腎疾患の進行に共通のメカニズムはありますか？ 慢性低酸素症の統一テーマに向けて。 KidneyInt。 補足 2000、75、S22〜S26。
7. Li、Y .; カン、YS; ダイ、C .; キス、LP; ウェン、X .; Liu、Y.上皮間葉転換は、有足細胞の機能不全とタンパク尿につながる潜在的な経路です。 午前。 J.病理学。 2008、172、299〜308。
8.山口恭子; 岩野正明; 鈴木D.; 中谷健一; 木村健一; 原田健一; 久保晃; 赤井恭子; 豊田正明; 川口正明; etal。 糖尿病性腎症における有足細胞枯渇の潜在的な説明としての上皮間葉転換。 午前。 J.KidneyDis。 2009、54、653〜664。
9.ヒギンズ、DF; 木村健一; Bernhardt、WM; シュリマンカー、N .; 赤井恭子; Hohenstein、B .; 齋藤恭子; ジョンソン、RS; Kretzler、M .; コーエン、CD; etal。 低酸素症は、上皮から間葉への移行のHIF-1刺激を介してinvivoで線維形成を促進します。 J.Clin。 調査。 2007、117、3810〜3820。
10. Haase、VH酸素は上皮から間葉への移行を調節します：分子メカニズムへの洞察と病気との関連性。 KidneyInt。 2009、76、492–499。
11. Nallamshetty、S .; チャン、SY; Loscalzo、J. Hypoxia：マイクロRNAの生合成と活性のマスターレギュレーター。 フリーラジカル。 Biol。 Med。 2013、64、20〜30。
12. Zell、S .; シュミット、R .; ウィッティング、S .; クライペ、HH; フセイン、K .; ベッカー、JU低酸素症は腎尿細管上皮細胞で間葉系遺伝子発現を誘導する：腎移植線維症のinvitroモデル。 Nephron Extra 2013、3、50–58。
13. Du、R .; Sun、W .; Xia、L .; 趙、A .; Yu、Y .; 趙、L .; 王、H .; 黄、C .; Sun、S.低酸素によるマイクロRNA -34 aのダウンレギュレーションは、尿細管上皮細胞のNotchシグナル伝達経路を標的とすることでEMTを促進します。 PLoS ONE 2012、7、e30771。
14. Xie、S .; チェン、H .; Li、F .; 王、S .; Guo、J.低酸素誘導マイクロRNA -155は、近位尿細管細胞の線維化を促進します。 モル。 Med。 Rep。2015、11、4555〜4560。
15.オンラインで入手可能：
16.オンラインで入手可能：
17.ツァイ、YC; 郭、MC; ハング、WW; ウー、LY; ウー、PH; チャン、WA; クオ、PL; Hsu、YL High Glucoseは、miR -15 b -5 pを介してメサンギウム細胞のアポトーシスを誘導し、細胞外小胞送達により糖尿病性腎症を促進します。 モル。 そこに。 2020、28、963〜974。
18. Lewington、AJ; セルダ、J .; Mehta、RL急性腎障害の意識を高める：サイレントキラーのグローバルな視点。 KidneyInt。 2013、84、457–467。
19.チットウッド、DH; Timmermans、MCTargetの模倣物はmiRNAを調節します。 ナット ジェネット。 2007、39、935〜936。
20. Changjun、L .; Feizhou、H .; Dezhen、P .; 趙、L .; Xianhai、M. MiR -545-3 p / MT1M軸は、肝細胞癌における細胞増殖、浸潤、および遊走を調節します。 Biomed。 薬局。 2018、108、347〜354。
