腸内細菌コンソーシアムの in vivo 投与によりウロリチン非産生ラットモデルⅡにおけるウロリチン代謝型 A および B が再現される

結果

エラジバクターおよびエンテロクロスターに対する設計されたプライマーおよびプローブの特異性および感度の分析

Ellagibacter および Enterocloster のプライマーおよびプローブの特異性は、配列アラインメント プログラム ProbeMatch にそれらの配列をアップロードすることによって確認されました。31 結果を示します。† その後、プライマーとプローブの特異性を、「材料と方法」セクションに記載されている最適化された反応条件を使用した qPCR によって検証しました。 ヒトの腸内で頻繁に検出される他の密接に関連した種に加えて、16S rRNA 遺伝子配列においてエラジバクターおよびエンテロクロスターと最も類似しているエッガーテラ科およびラクノスピラ科の代表的な細菌種を試験した（表 1S および 2S†）。 図２は、標準定量曲線に対応する増幅プロットを示す。

クリックして便秘治療へ

CT 値を細菌濃度 (Co) に対して log 10 ゲノム当量/反応としてプロットしました (6.25 × 10 -6 ng、半数体ゲノムの場合)。 ゲノム DNA を使用して計算された線形回帰曲線の傾きは -3.78 で、R2 値は 0.99 より大きかった。 qPCR システムの感度に関しては、TaqMan モードを使用した陽性反応には最低 1.5 ゲノム当量が必要でした。 E. イソウリチニファシエンスおよび E. ボルトテッドの検量線で得られた CT 値は 15.5 ± 0.7 から 37.8 ± 0.7 の範囲でしたが、試験した他の菌株では DNA 増幅は検出されませんでした。

ラットの糞便サンプル中のエラジバクテリウムとエンテロクロスターの定量化は、3 回の反復の平均を考慮して、この方法 (qPCR) で実行されました。 結果は、糞便１ｇ当たりの細菌のｌｏｇ１｛｛４｝｝として表され、１６Ｓ ｒＲＮＡ配列決定によって得られた相対存在量値と比較された。 エラジバクター菌 (r=0.660、p < 0.001) とエンテロクロスター菌 (r=0.459、p< 0.001) (data not shown).

経口投与された細菌集団が生体内ウロリチンの産生に及ぼす影響

糞便中のウロ分析では、最初（T{{0}}）、ラットはEA粉末を摂取した後にウロを生成しなかったことが示されました（図3A〜C）。しかし、細菌コンソーシアムAを投与した後は（図3A） ）およびB（図3B）、ラットはウロを生成できるようになりました。グループAとBのラットがEA粉末のみを摂取した最初の3週間で、ウロ濃度（範囲：0〜1.43μg g−） 1) および糞便中の EA 前駆体の濃度 (範囲: 0.07 ～ 4.54 µg g-1) は低かった。 しかし、21日目から、2番目のEA源としてクルミの消費が始まったとき、グループA（図3A）とグループB（図3B）で糞便EA（図3A〜C）とウロ産生が非常に大幅に増加しました。 ）。

さらに、グループ A とグループ B の間で Uro プロファイルの違いが観察されました。グループ A では、糞便 Uro-C、Uro-M6、Uro-M7、および最終代謝産物 Uro-A が優勢でした。 対照的に、グループ B では、3 つの最後の Uro (Uro-A、UroB、および IsoUro-A) が存在しましたが、中間体はほとんどありませんでした。 しかし、最近報告された Uro-G の糞便中濃度は、A グループよりも B グループで検出されました。さらに、Uro-B 濃度は、B グループの Uro-A および IsoUro-A の濃度よりも低かったです。 IsoUro-A はグループ B のすべてのラットで産生されましたが、Uro-B は産生されませんでした (図 3B)。 21 日目に対照ラット (グループ C) の食事にクルミを追加すると、糞便中の EA 濃度の上昇も観察されました。クルミ摂取前よりも、糞便EA濃度は非常に低かった(図3C)。 しかし、EApowder の摂取もクルミの摂取も、対照ラット (すなわち、細菌連合を持たないラット) の腸内でのウロスの生成を促進しませんでした。

経口投与された細菌の腸内定着当初、グループ A および B のラットが細菌コンソーシアムの摂取を開始する前、MiSeq-Illumina プラットフォームを使用してメタゲノム配列解析を実行したとき、ゴルドニバクターまたはエラギバクターは糞便サンプル中の検出限界未満でした (図 3D–F) ）。 qPCR を使用すると、ラットのゴルドニバクターレベルは低かった（<5.8 log bacteria per g faeces), and Ellagibacter levels were under the limit of detection (data not shown). In contrast, Enterocloster was detected using the MiSeq-Illumina and qPCR in the faeces of rats from all groups (A, B, and C) at the baseline (Fig. 3D–F). 

グループ A、B、および C におけるエンテロクロスターの相対存在量 (平均 ± SD) は、{{0}}.03 ± 0.02、{{10) でした。それぞれ、}}.04 ± 0.06、および 0.13 ± 0.17% でしたが、有意差はありませんでした (p=0.570)。 細菌集団AおよびBの投与により、それぞれ対応するグループAおよびBの糞便中にゴルドニバクターおよびエラジバクターが出現し、徐々に増加した(図3DおよびE)。 さらに、グループ A および B では、研究全体を通じて糞便エンテロクロスター レベルが増加しました (図 3D および E)。

しかし、LEfSe分析では、グループAおよびBのメタゲノム配列データを対照グループのメタゲノム配列データと比較した場合、他の腸内細菌グループではほとんど差がありませんでした（図4AおよびB）。興味深いことに、グループAでは連鎖球菌属および連鎖球菌科の減少が観察されました。およびBを対照群と比較しました（図4AおよびB）。 細菌コンソーシアムの経口投与を中止してから 5 日後 (研究の終了日)、B 群ではエラギバクテリウムとエンテロクロスターの存在量の減少が検出され、これにより尿路産生も大幅に減少しました (図 3B および E)。 グループ A では、エンテロクロスターではなくゴルドニバクターの存在量の減少も観察され (図 3A)、その結果尿濃度が減少しましたが、グループ B よりも顕著ではありませんでした (図 3D および E)。 対照群では、エラギバクターは研究全体を通じて検出限界以下であり、エンテロクロスターとゴルドニバクターは非常に低いレベルに留まりました（図3F）。

経口投与された腸内細菌の毒性に関する研究

細菌コンソーシアムの摂取による潜在的な副作用が調査されました。 対照群と比較して、グループAおよびBのラットに細菌群集を強制経口投与した4週間後、成長、体重増加、食物摂取および重要な器官に対する悪影響は観察されなかった。 ただし、雄ラットは 107.4 ± 2.4 g 増加しましたが、雌ラットはそれよりも減少しませんでした。研究終了時の体重（25.7±5g）は、対照群と比較して差がありませんでした。 ケージごとの摂餌量は雄ラットで 63.1 ± 1.4 g、雌ラットで 33.8 ± 1.8 g であった。ただし、水分摂取量はケージごとに雄ラットで 136.1 ± 37.2 g、雌ラットで 76.0 ± 12.6 g であった。 。

赤血球分布 (RDW、p {{0}}.005)、白血球 (p=0.005)、血小板分布幅 (PDW、p =0.005)、および網赤血球ヘモグロビン含量 (CHr、p=0.013)(表 2)。 それでも、細菌コンソーシアムを摂取したグループ (グループ A および B) と対照グループ (グループ C) の間の変数には差異は観察されませんでした。 生化学値も分析され、クレアチニン指数（p < 0.001）、リン（p=0.007）、アルカリホスファターゼ（ALP）（p {{13 }}.003)、チロキシン (T4) (p=0.002) (表 3)。 しかし、細菌コンソーシアムを摂取したグループ (グループ A および B) と対照グループ (グループ C) の間では、どの変数についても差異は観察されませんでした。

便秘を解消するための天然漢方薬 - カンクサ

カンクサは、Orobanchaceae 科に属する寄生植物の属です。 これらの植物は薬効があることで知られており、何世紀にもわたって伝統的な中国医学 (TCM) で使用されてきました。 カンカ種は主に中国、モンゴル、中央アジアの他の地域の乾燥地帯と砂漠地帯で見られます。 カンカ属の植物は、多肉質で黄色がかった茎が特徴で、潜在的な健康上の利点が高く評価されています。 TCM では、カンカには強壮作用があると考えられており、腎臓に栄養を与え、活力を高め、性機能をサポートするために一般的に使用されます。 また、老化、疲労、健康全般の問題に対処するためにも使用されます。 シスタンケは伝統医学で使用されてきた長い歴史がありますが、その有効性と安全性に関する科学的研究は進行中であり、限界があります。 ただし、フェニルエタノイド配糖体、イリドイド、リグナン、多糖類などのさまざまな生理活性化合物が含まれており、これらが薬効に寄与している可能性があります。

ウェシスタンチェさんカンクパウダー、カンカンタブレット、カンカンカプセル、その他の製品は以下を使用して開発されています。砂漠カンクン便秘解消に効果のある成分を原料としています。 具体的なメカニズムは次のとおりです。 シスタンケは、その伝統的な使用法とそれに含まれる特定の化合物に基づいて、便秘を軽減する潜在的な利点があると考えられています。 便秘に対するシスタンケの効果に関する具体的な科学的研究は限られていますが、便秘を軽減する潜在力に寄与する可能性のある複数のメカニズムがあると考えられています。 下剤効果:シスタンケ伝統的な中国医学では便秘の治療法として古くから使用されてきました。 穏やかな下剤効果があると考えられており、腸の動きを促進し、便秘を誘発するのに役立ちます。 この効果は、フェニルエタノイド配糖体や多糖類など、Cistanche に含まれるさまざまな化合物に起因すると考えられます。 腸の保湿：伝統的な使用法に基づいて、シスタンケには特に腸をターゲットにした保湿特性があると考えられています。 腸の水分補給と潤滑を促進すると、道具が柔らかくなり、通過が容易になり、便秘が解消されます。 抗炎症作用: 便秘は消化管の炎症と関連している場合があります。 シスタンシュには、フェニルエタノイド配糖体やリグナンなど、抗炎症作用があると考えられている特定の化合物が含まれています。 腸内の炎症を軽減することにより、排便の規則性が改善され、便秘が解消される可能性があります。