AloysiaPolystachyaからのフェニルエタノイド配糖体の単離と同定およびモノアミンオキシダーゼ-Aの阻害剤としてのその活性

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Ana Maria S. Pereira1、Camila C.Guimarães1、Sarazete IV Pereira1、Eduardo J. Crevelin2、Gustavo HT Pinto1、Lucas JF Morel1、Bianca W. Bertoni1、SuzeleiC.França1、Silvia H. Taleb-Contini1

序章

世界保健機関からの最近の報告[1]によると、3億2000万人以上（世界人口の4.4％）がうつ病と不安障害に苦しんでおり、これらの精神的問題の結果として年間約80万人が自殺しています。 。 合成抗うつ薬による治療は可能ですが、多くの患者は口渇、便秘、めまい、かすみ目、食欲増進、体重増加、不眠症、腎臓の問題などの副作用に苦しんでいます[2]。 このため、フィトセラピーを含む補完代替医療を使用したアプローチが、いくつかのタイプの精神障害の治療に使用されてきました[3]。

さまざまな前臨床および臨床研究により、一般的および特定の不安障害の治療における植物ベースの医薬品の利点を裏付ける証拠が提供されています[4、5]。 特に興味深いのは、主にアルゼンチンとパラグアイで見られる芳香族種であるAloysia polystachya（Griseb。）Moldenke（クマツヅラ科）の抗不安特性の調査です。 民族薬理学的研究によると、地元の人々は、一般にブリトーとして知られている植物を、消化器系、鎮静剤、および抗うつ剤の強壮剤として使用しています[6、7]。 A. polystachyaからのヒドロエタノール抽出物の抗不安および抗うつ特性は前臨床試験によって確認されていますが[8-10]、これらの活性に関連する化合物を特定することを目的とした植物化学的調査は行われていません。

いくつかの薬用植物、例えば、Hypericum perforatum L.（オトギリソウ科）およびPeganumharmala L.（ソーダノキ科）の抗うつ活性は、モノアミンオキシダーゼ-A（MAO-A）の阻害に関連していることが以前に示されています。 [11–13]。 MAOファミリーは中枢神経系と末梢神経系全体に分布しており、これらの酵素の過剰発現はモノアミンの酸化的脱アミノ化を促進し、神経伝達物質であるセロトニン、ノルエピネフリン、ドーパミンのレベルを低下させ、精神障害を発症させます。 このような脱アミノ化プロセスでは、過酸化水素、酸素フリーラジカル、アルデヒドなど、細胞の酸化ストレスの原因となる物質も生成されます。 MAOは、分布、基質特異性、および阻害剤に対する感受性に関して異なる2つの主要なアイソフォームで存在します。 MAO-Aアイソフォームはうつ病や不安障害に重要な役割を果たし、MAO-Bは神経変性疾患に関与しています[13–17]。

上記に照らして、我々は、A。polystachyaの抗不安および抗うつ特性が、少なくとも部分的に、MAO-Aの阻害剤の存在に由来すると仮定した。 この仮説を検証するために、A。polystachyaの葉からのハイドロエタノール抽出物に存在する有効成分を特定し、粗抽出物とそこから分離された主成分がMAO-A活性に及ぼす影響を評価しました。

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結果と考察

A. polystachyaの葉からのヒドロエタノール抽出物を超高性能液体クロマトグラフィー-質量分析（UPLC-MS）にかけ、得られたクロマトグラムを▶図に示します。 1a。 抽出物の主成分は、カラムクロマトグラフィーと逆相高速液体クロマトグラフィー（RP-HPLC）によって精製され、アクテオシド（syn verbascoside）、イソアクテオシド、6'-アセチルアクテオシド、および4'、4として同定されました。 '''、5,5''-テトラヒドロキシ-6、6''、3'''-トリメトキシ-[C7–O–C7'']-ビフラボンの1H-および13C-NMRの比較、 HSQC、HMBC（▶表1S、2S、サポート情報）、およびMSデータ（▶図1b-e）と文献[18–20]で報告されている値。 HPLCで測定したヒドロエタノール抽出物中のアクテオシドの濃度は、108.65±1.3 µg/mg乾燥抽出物でした。 これは、A。polystachyaの葉の抽出物の成分の最初の記録ですが、植物のエッセンシャルオイルは以前に分析され、主成分としてモノテルペンのカルボンとリモネンが含まれていることがわかりました[21]。

A. polystachyaの葉からの粗ヒドロエタノール抽出物は、用量依存的にMAO-A活性を阻害し（▶図2a）、IC5 0は9.2µg / mLでしたが、選択的MAO阻害剤であるクロルギリンはIC5を示しました。 0は0.06µg / mL（0.22 µM）です。 精製されたアクテオシドもMAO-Aに対して阻害活性を示し（▶図2b）、アクテオシドは5 µM（3.1 µg / mL）の最低IC50値を示し、次に10.1 µM（6.3 µg / mL）のIC50を持つイソアクテオシドを示しました。 ）および6'-アセチルアクテオシド、IC50 9.5 µM（6.3 µg / mL）。 MAO-Aの阻害は、不安神経症とうつ病の制御における重要な神経伝達物質であるセロトニン、ノルエピネフリン、ドーパミン、およびチラミンのレベルの再確立につながります[16]。 したがって、A。polystachyaの葉に多様なMAO-A阻害剤が存在することは、少なくとも部分的には、以前に報告された種の抗うつおよび抗不安活性を説明しています[8–10]。

多成分植物混合物の使用は、不安、鬱病、および他の神経学的状態などの複雑な病因の疾患の治療に有利である可能性があります。 現在、神経系に影響を与える疾患の治療におけるフィトメディシンの使用は、マルチターゲット指向性リガンド、すなわち、抗酸化剤を含むポリフェノールなどの物質の存在に起因するマルチターゲット活性を有する医薬品のパラダイムに基づいています。神経保護を与えることができる炎症性、抗酸化性、およびMAO阻害特性[20、22–25]。 ただし、ポリフェノール物質の極性が分子標的との相互作用を妨げる可能性があることは注目に値します。 それにもかかわらず、臨床研究は、抽出物に存在するポリフェノールと非極性二次代謝産物との接触が細胞膜の透過性を変更し、極性化合物の取り込みを促進する可能性があることを示しています[23]。 したがって、受容体と多面的に相互作用するマルチターゲット剤を含む複雑な植物抽出物は、細胞膜を横切る極性代謝物の移動を含む多くのプロセスに影響を与える薬理学的相乗作用を生成します。 これに関連して、Lietal。 [26]はゼブラフィッシュモデルを使用して、アクテオシドが血液脳関門に浸透する可能性があることを実証し、フェニルエタノイド配糖体がパーキンソン病に潜在的な治療効果をもたらす可能性があることを提案しました。

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モノアミン作動性神経伝達物質は、その欠乏がうつ病の衰弱症状の原因であるため、現代の抗うつ薬の主な標的です。 最近のinvivo研究では、Lippia citriodora（クマツヅラ科）のエタノール抽出物と水性抽出物およびそれらの主成分であるアクテオシドが抗不安作用、催眠作用、筋弛緩作用を示し、これらの特性は一部、A型ガンマとの相互作用に起因することが示されました。 -アミノ酪酸（GABAA）受容体[27]。

臨床研究により、TNF-などの炎症性サイトカイン、または炎症性シグナル伝達経路の他の成分、たとえばシクロオキシゲナーゼ-2（COX -2）を遮断する能力を持つ薬剤が有効であることが明らかになりました。関節リウマチ、乾癬、および癌の患者、ならびに主要な精神障害に苦しむ患者の抑うつ症状を軽減することにおいて[28]。 これに関連して、アクテオシドは、リポ多糖/インターフェロンガンマ（LPS）中の一酸化窒素（NO）、TNF-、およびインターロイキン12（IL -12）などの炎症性分子の産生と放出を弱めることができると報告されています。 / IFN-）で刺激されたマクロファージ[29]、およびRBL-2H3肥満細胞のヒスタミンとアラキドン酸[30]。 さらに、アクテオシドは、TNF-、IL -1、IL -8、IL -6、およびNOのレベルを低下させ、核因子であるカスパーゼ-1を活性化することができます。 -カッパ-B（NF-κB）、NOシンターゼ、および活性化タンパク質-1 [31]は、TH-1細胞およびマクロファージでIL-32および/またはLPSによって誘導されます[32]。 IFN、IL -6、IL -8、IL -1などのこれらの炎症性メディエーターの一部は、うつ病の人の末梢組織サンプルと死後組織サンプルの両方で異常なレベルで発見されています。 、およびうつ病の症状に関連している[33]。 心理社会的ストレッサーによるこれらの分子の活性化は、脳の重要な機能的変化を促進し、抑うつ行動や他の精神障害の発症につながる可能性があります。 たとえば、IFN、IL -1、およびTNF-は、セロトニン、ノルアドレナリン、およびドーパミン受容体ポンプの発現と機能を増加させ、シナプス間隙におけるこれらの神経伝達物質の利用可能性を低下させる可能性があります[28]。 さらに、IFN-、IL -6、TNF-、および酸化ストレスは、トリプトファンの分解に関与する酵素であるインドールアミン2,3ジオキシゲナーゼ（IDO）を活性化し、それによって、セロトニン合成[34]。

アクテオシド、イソアクテオシド、および6'-アセチルアクテオシドは、抗酸化特性に関連することが知られているヒドロキシフェニルエチルおよびカフェオイル部分を含み[35、36]、アクテオシド自体はかなりの抗酸化活性を示します[37]。 研究によると、アクテオシドは用量依存的にアミロイドペプチド（A）の凝集を阻害し、神経保護剤として機能し、記憶力を高めます。これらの特性は、薬剤の抗酸化活性に起因するとされています[38、39]。 。 抗酸化作用を持つ多くのフェノールに富む種が神経障害の治療に使用されていることを考えると[15]、A。polystachyaから単離されたフェニルエタノイド配糖体の抗うつ作用と抗不安作用もそれらの抗酸化作用に起因する可能性があることが示唆されています。 この仮定は、Xuらによって支持されました。 [40]、酸化ストレスの増加とうつ病/不安との関係に関する証拠を提示した。

上記に基づいて、A。polystachyaの葉からのヒドロエタノール抽出物、およびそこから単離された精製フェニルエタノイドの抗うつ特性は、MAO-Aの阻害、炎症性分子、および酸化反応の中和。 したがって、本明細書に提示された結果は、A。polystachyaのヒドロエタノール抽出物の抗不安および抗うつ活性が、少なくとも部分的に、MAO-Aの阻害に起因するという我々の最初の仮説を支持する。 ただし、この研究で特定されたフェニルエタノイド配糖体の構造活性相関は、特定の神経障害の治療のために新しい分子を設計できるように、さらに注意を払う必要があります。

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参考文献

[1]世界保健機関。 うつ病およびその他の一般的な精神

障害：グローバルヘルスの見積もり。 ジュネーブ：WHO; 2017年

[2]ファーガソンJM。 SSRI抗うつ薬：副作用と忍容性。 Prim Care Companion J Clin Psychiatry 2001; 3：22–27

[3] van der Watt G、Laugharne J、JancaA.不安とうつ病の治療における補完代替医療。 Curr Opin Psychiatry 2008; 21：37–42

[4] Sarris J、McIntyre E、CamfieldDA。 不安障害のための植物ベースの薬：cistanche、パート1：前臨床試験のレビュー。 CNSドラッグ2013; 27：207–219

[5] Sarris J、McIntyre E、CamfieldDA。 不安障害のための植物ベースの薬、パート2：前臨床の証拠を裏付ける臨床研究のレビュー。 CNSドラッグ2013; 27：301–319

[6] Del Vitto LA、Petenatti EM、PetenattiME。 Recursos herbolarios de San Luis（アルゼンチン共和国）。 Primera parte：PlantasNativas。 Multequina 1997; 6：49–66

[7]ゴンザレスY、アルアRD、ロハスGD、ガルシアMG。 Etnofarmacobotánicafoliarde"burrito"、Aloysia polystachya（Griseb。）Moldenke（Verbenaceae）、cultivadoenParaguay。 Rojasiana 2014; 13：31–41

[8] Mora S、Díaz-VélizG、MillánR、Lungenstrass H、QuirósS、Coto-Morales T、Hellión-IbarrolaMC。 ラットにおけるAloysiapolystachyaからの水性アルコール抽出物の抗不安薬および抗うつ薬のような効果。 Pharmacol Biochem Behav 2005; 82：373–378

[9]Hellión-IbarrolaMC、Ibarrola DA、Montalbetti Y、Kennedy ML、Heinichen O、Campuzano M、Tortoriello J、FernándezS、Wasowski C、Marder M、De Lima TCM、Mora S.Aloysiapolystachyaの抗不安薬のような効果（Griseb。）マウスのモルデンケ（クマツヅラ科）。 J Ethnopharma- col 2006; 105：400〜408

[10]Hellión-IbarrolaMC、Ibarrola DA、Montalbetti Y、Kennedy ML、Heinichen O、Campuzano M、Ferro EA、Alvarenga N、Tortoriello J、

De Lima TCM、Mora S.マウスにおけるAloysiapolystachya（Griseb。）Moldenke（クマツヅラ科）の抗うつ薬のような効果。 Phytomedicine 2008; 15：478–483

[11] Herraiz T、GonzálezD、Ancín-AzpilicuetaC、AránVJ、GuillénH。

-ペガヌムハルマラのカルボリンアルカロイドとヒトモノアミンオキシダーゼ（MAO）の阻害。 Food Chem Toxicol 2010; 48：839–845

[12] Herraiz T、GuillénH、AránVJ、Salgado A.ペガヌムハルマラにおけるキナゾリンアルカロイドの同定、発生および活性。 Food Chem Toxicol 2017; 103：261–269

[13] Herraiz T、GuillénH.モノアミンオキシダーゼ-潜在的な抗うつ作用を伴う植物抽出物における阻害および関連する抗酸化活性。 Bio Med Res Int 2018; 1018：4810394

[14] Carradori S、D'Ascenzio M、Chimenti P、Secci D、Bolasco A.選択的MAO-B阻害剤：天然物からの教訓。 Mol Divers 2014; 18：219–243

[15] Fajemiroye JO、Silva DM、Oliveira DR、CostaEA。 不安とうつ病の治療：振り返ってみると薬用植物。 Fundam Clin Pharmacol 2016; 30：198–215

[16]FišarZ。モノアミンオキシダーゼ活性に関連する薬物。 Prog Neuropsy- chopharmacol Biol Psychiatry 2016; 69：112–124

[17] Naoi M、Maruyama W、Shamoto-Nagai M. A型モノアミンオキシダーゼとセロトニンは、神経伝達物質の不均衡から神経新生障害まで、うつ病性障害に協調的に関与しています。 J Neural Transm 2017; 125：53–66

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