肝障害に対するCistancheDeserticolaの保護効果：アルコール性肝障害

概要：現代の薬理学的研究は次のことを示していますCistancheニクジュヨウ（C.deserticola）は肝臓を保護する効果がありますが、その活性部分とメカニズムは明らかではありません。 C.deserticola YC Maの有効画分を特定するために、56-プルーフの二鍋頭酒とC.deserticola YC Maのさまざまな画分抽出物（総配糖体、多糖類、オリゴ糖）を使用して、マウスの急性アルコール性肝障害モデルを確立しました。 ）投与された。 経口投与の14日後、肝臓の病理と脂質沈着を測定し、核因子E 2-関連因子（Nrf -2）、ケルチ様ECH関連タンパク質-1（ Keap -1）、および原形質膜小胞関連タンパク質-1（PV1）を蛍光抗体法で測定しました。 血清中のアラニンアミノトランスフェラーゼ（ALT）、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（AST）、エンドトキシン（ET）、ジアミンオキシダーゼ（DAO）、およびD-乳酸（D-LA）、およびスーパーオキシドジスムターゼ（SOD）、グルタチオンペルオキシダーゼ（GSH）のレベル-肝臓のPx）、カタラーゼ（CAT）、およびマロンジアルデヒド（MDA）をELISAで測定しました。 すべての動物実験は、北京大学健康科学センターの実験動物福祉倫理委員会の承認を得て実施されました。 結果は、C.deserticola YC Maの総グリコシド（400mg・kg -1）が肝臓の病状を減少させ、血清エンドトキシン、ジアミンオキシダーゼ、およびD-乳酸を減少させ、肝臓の脂質沈着を減少させる可能性があることを示しています。 総配糖体はまた、核へのNrf -2の移動を促進し、Keap-1とPV1の発現を減少させました。 要約すると、C.deserticola YC Maの総配糖体は急性アルコール性肝障害において保護効果があり、そのメカニズムはNrf -2 / Keap -1経路の活性化、腸の改善に関連している可能性があります壁の完全性、および肝臓への有害物質の輸送の阻害。

キーワード：CistancheニクジュヨウYCMa; アルコール性肝疾患; C.deserticolaYCMaの総配糖体; 肝臓の保護; Nrf -2 /Keap-1経路

保護 効果 の the 合計 配糖体 の Cistanche ニクジュヨウ Y. C. 馬 の アルコール依存症 肝臓 けが の マウス

連絡先：ali.ma@wecistanche.com

アルコール性肝疾患（ALD）とは、長期の大量飲酒によって引き起こされる肝疾患のことで、通常、初期段階ではアルコール性脂肪性肝として現れ、その後、アルコール性肝炎、肝線維症、肝硬変、さらには肝不全に発展します[1 ]。 近年、人々の生活水準の向上に伴い、アルコール性肝疾患の患者さんの割合が増加しており、人々の健康を著しく脅かしています[2]。 研究によると、ALDは主に、炎症反応、酸化ストレス、エタノールとその代謝物によって直接的または間接的に誘発される腸由来のエンドトキシン、特に腸の障害によって引き起こされる腸由来の腸由来のエンドトキシンなどの複数の要因の相互作用の結果です。バリア機能。 クッパー細胞の内毒素血症と内毒素活性化は、ALDの発生と発症に重要な役割を果たします[3]。

繁体字中国語Cistancheの多肉植物の茎ですCistancheニクジュヨウ（C.ニクジュヨウ）YCMaまたはCistancheカンカニクジュヨウ（シェンク）R。乾燥した鱗状の葉を持つLidanaceae植物のワイト。 研究によると、Cistancheは体の免疫機能、老化防止、放射線防止、酸化防止、脂質過酸化防止、およびアルコール性肝障害に対する保護を強化できることが示されています[4-7]。 以前の研究は主にニクジュヨウに焦点を当てており、ニクジュヨウとその有効成分の肝保護効果は明ら​​かではありません。 この論文では、急性アルコール性肝障害モデルに基づいて、肝保護効果とニクジュヨウのさまざまな部分からの抽出物のメカニズムについて議論し、肝臓保護におけるニクジュヨウのその後の研究開発の理論的基礎を提供しました。

材料および方法

実験動物健康なKunmingマウス、雄、体重（22±5）gは、Beijing Weitong Lihua Laboratory Animal Technology Co.、Ltd.から購入し、ライセンス番号はSCXK（Beijing）2016-0011で、動物で飼育されています。北京大学医学部実験センター、室温20〜25度、湿度56〜60％。 実験動物に対するすべての操作は、北京大学医学部の動物倫理委員会（LA2019123）の基準に厳密に従って実施されました。

の準備と内容決定のためにCistancheニクジュヨウ抽出物。 の調製方法および含有量決定方法Cistanche研究グループによって以前に報告されたニクジュヨウ抽出物は[8-10]に言及されました。 10kgのCistanchedeserticolaを水とエタノール沈殿で抽出して3.7％の多糖類を得、精製水中の溶出液を濃縮して38％の厚さの総オリゴ糖のペーストを得、40％のエタノールを溶出して乾燥させて3.7％の総グリコシドを得た。 。 これらの3つの抽出物は、それぞれ実験研究に使用されました。

（G1260）、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ALT）活性検出キット（バッチ番号BC1555）およびアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（AST）活性検出キット（バッチ番号BC1560）は、Beijing Soleibo Biotechnology Co.、Ltd.Companyから購入しました。 スーパーオキシドジスムターゼ（SOD）キット（ロットA 001-3）、グルタチオンペルオキシダーゼ（GSH-Px）キット（ロットA005）、マロンジアルド（ロットA005）-ハイド、MDA）キット（ロットA 003-1）、カタラーゼ（カタラーゼ、CAT）検出キット（A 007-1）、エンドトキシン（ET）キット（E 039- 1- 1）、ジアミンオキシダーゼ（DAO）キット（A 088-2-1）およびD-乳酸（D-LA）キット（H263）はすべてNanjing Jiancheng InstituteofBioengineeringからのものでした。 ビフェニルジエステル（ビフェンデート、BIF、バッチ番号：S4890）は、Shanghai Lanmu Chemical Co.、Ltd.から提供されました。 56パーセント（アルコール含有量56パーセント）Hongxing Erguotouは、Beijing Hongxing Co.、Ltd.から提供されました。 原形質膜小胞関連タンパク質1（血漿レンマ小胞）関連タンパク質-1、PV1）抗体（ab32570）、核因子E2関連因子（Nrf -2）抗体およびケルチ様ECH-asso -ciated protein -1（Keap）-1）（ab66620）はAbcamから購入しました。

実験機器パラフィンミクロトーム（ライカ、ドイツ）; サンライズ-ベーシックマイクロプレートリーダー（TECAN、スイス）; 高速冷蔵遠心分離機（ベックマン、米国）; 倒立型蛍光顕微鏡（IX73）（オリンパス、日本）。

急性アルコール性肝障害のマウスモデルの準備とグループ化60人の健康な男性のKunmingマウスの体重を測定し、正常グループ（NOR）では1 0、残りのマウスには強制経口投与によりHongxing Erguotouを投与しました[9]、 0。01mLg - 1の強制経口投与、1日1回、連続7日間。 7日後、体重に応じて、モデルグループ（MOD）、二座グループ（BIF、0.9 mg kg -1）、および総配糖体グループ（TG、400 mg kg -1）にランダムに分けられました。 ）、Cistancheニクジュヨウ多糖類グループ（PS、400mg・kg -1）およびニクジュヨウオリゴ糖グループ（OS、400mg・kg -1）、および投与量は、研究グループの以前の研究に従って設定されました[ 11]。 各グループには、通常の生理食塩水、ビフェニルジエステル、Cistancheニクジュヨウ、ニクジュヨウの多糖類、およびニクジュヨウのオリゴ糖をそれぞれ14日間強制経口投与した。 薬はすべて通常の生理食塩水で調製されました。 アルコールの継続的な強制経口投与により、一部のマウスが死亡し、最後の投与実験試薬HE染色液（G1120）、オイルレッドO染色液、グループあたり8個。

最後の投与から30分後、マウスの各臓器係数が得られ、各臓器は次の式に従って得られた：臓器係数= [臓器湿重量（g）/ラット体重（g ）]×100％各臓器を計算する統計分析はSPSS19.0ソフトウェアを使用して実行されました。

HE染色上記の肝臓組織を組織固定液で固定した後、切片をパラフィンに定期的に包埋し、ヘマトキシリン-エオジン（HE）で染色し、光学顕微鏡で組織病理学的変化を観察しました。

指標検出のために、各グループのマウスの血清を採取し、キットの説明書に従って、ALT、AST、ET、DAO、およびD-LAの内容物を検出しました。 マウスを犠牲にして肝臓を除去し、肝臓組織ホモジネートを調製した。 キットの説明によると、CAT、SOD、GSH-Pxアクティビティ、およびMDAコンテンツ。

オイルレッドO染色は、固定されたマウス肝臓組織を取り、それを30パーセントのショ糖溶液に入れました。 肝臓組織が底に落ち着いた後、それを20パーセントのショ糖溶液に移した。 、スライス厚は100μmです。 1×PBSを滴下して10分間洗浄し、60％イソプロパノールに入れて20-30秒間浸漬します。 次に、それを修正オイルレッドO染色液に加え、10-15分間密封します。 60％イソプロパノール溶液にしばらく入れ、染料溶液を除去するために洗浄し、水道水で10分間すすぎ、グリセロールゼラチンを取り付け、顕微鏡で観察および写真撮影しました。

パラフィン切片を脱ロウし、免疫蛍光化学染色のために再水和し、クエン酸ナトリウムで抗原を回収した。 一次抗体PV1（1：200）、Nrf -2（1：100）、およびKeap -1（1：200）を滴下し、細胞を4度で一晩インキュベートしました。 PBSでリンスし、TRITC蛍光二次抗体（1：100）を滴下し、暗所で室温で1時間インキュベートします。 核をHoechst33258で染色し、暗所で抗蛍光減衰封入剤を封入し、蛍光顕微鏡で写真を撮りました。

TUNELで染色したパラフィン切片を脱ロウして再水和し、2 0 ug・mL -1のDNaseフリープロテイナーゼK希釈液を滴下し、37度で30分間反応させた後、3パーセントH2O2溶液を滴下し、室温で20分間インキュベートしました。 0.01mol・L- 1PBS緩衝液で3回洗浄します。 50μLのビオチン標識溶液を滴下し、37度で60分間インキュベートして反応を停止します。 50μLのストレプトアビジン-TRITC作業溶液を滴下し、室温で30分間暗所でインキュベートし、核をDAPIで染色し、スライドにマウントし、顕微鏡で観察し、蛍光顕微鏡で写真を撮りました。

統計分析は、SPSS19.0ソフトウェアを使用して実行されました。 測定データは平均±標準偏差（x-±s）として表され、正規分布の測定データはグループ間の一元配置分散分析（ANOVA）によって比較されました。 分散が均一である場合はSNK法が使用され、分散が等しくない場合はダネットの方法が使用されました。 T3法、カイ2乗検定（カイ2乗検定）を使用してデータをカウントし、データマッピングにGraphPad Prism 5を使用して、最小有意差レベルをP<>

結果

1 TGは、アルコール性肝障害マウスの肝係数を大幅に低下させる可能性があります。 図1に示すように、NORグループと比較して、MODグループの肝臓係数は大幅に高くなっています。

MOD群と比較して、肝臓係数はTG介入後に有意に減少しましたが、PSとOSは肝臓係数に影響を与えず、TGとBIFの間に有意差はありませんでした。

2 TGは、アルコール性肝障害のあるマウスの肝組織の病理学的形態を大幅に改善することができます

HE染色の結果は、NORグループの肝臓組織細胞が正常な形態、きちんと配置された細胞、均一な染色、完全な細胞構造、および密な細胞間空間を持っていることを示しました。 MODグループは、無秩序な構造、不規則な細胞配列、ゆるい細胞間スペース、および不明瞭な細胞境界を持っていました。 BIFとTG介入後、細胞形態の変化はモデルグループよりも有意に良好であり、細胞数はモデルグループよりも多かった。 TGとBIFの間に有意差はなく、PSとOSのグループでは肝臓の病理学的形態に有意な改善は見られず、TGが肝保護効果を持っていたことを示しています。 ただし、図2に示すように、PSとOSには大きな改善は見られませんでした。

3 TGは、アルコール性肝障害のあるマウスの肝脂質沈着を大幅に減少させることができます

オイルレッドO染色は、NORグループで少量の脂質沈着があったことを示しましたが、MODグループでの脂質沈着は有意に増加しました。 MODグループと比較して、脂質沈着はTG介入後に有意に減少しました。 TGとBIFの間に有意差はありませんでした。 PSとOSは、肝臓の脂質沈着を有意に変化させませんでした。 実験結果は、TGがアルコール性肝障害マウスの肝脂質沈着を減少させる可能性があるのに対し、PSおよびOSはアルコール性肝障害マウスの肝脂質沈着を改善せず、脂質低下効果がないことを示しました（図3）。

4 TGは、アルコール性肝障害のあるマウスの肝臓のALTおよびASTレベルを大幅に低下させる可能性があります

図4に示す結果は、NORグループと比較して、MODグループのALTおよびASTレベルが大幅に増加したことを示しています。 MODグループと比較して、TGグループのALTおよびASTレベルは大幅に減少しました。 TGとBIFの間に有意差はありませんでした。 ALTとASTのレベルは有意に変化しなかった。これは、TGが肝障害を抑制し、肝保護効果があることを示している。

5 TGは、アルコール性肝障害のあるマウスの肝細胞のアポトーシスを有意に阻害する可能性があります

アルコールが肝細胞に損傷を与えた後、核内のDNAが破壊され、TUNEL染色で陽性の発現が見られます。 図5に示すように、MODグループの肝臓の多数の細胞がアポトーシスを起こしました。 MODグループと比較して、TGグループのアポトーシスは有意に減少し、TGとBIFの間に有意差はありませんでした。 有意な変化はなく、TGがアポトーシスを阻害する可能性があることを示しています。

6 TGは、アルコール性肝障害のあるマウスの小腸の病理学的形態を大幅に改善することができます

HE染色の結果は、NORグループの小腸組織学細胞が正常な形態、きちんと配置された絨毛、均一な腸壁、無傷の細胞構造、および密な細胞間空間を持っていることを示しました。 MODグループは、構造が乱れ、絨毛が不規則に配置され、骨折し、腸壁が薄い。 BIFとTG介入後、細胞の形態が大幅に変化し、腸壁が厚くなった。 PSおよびOSグループは、小腸の病理学的形態を有意に改善しませんでした。これは、図6に示すように、TGが腸壁および絨毛の完全性に保護効果をもたらしたことを示しています。

7 TGは、アルコール性肝障害のあるマウスの小腸壁におけるPV1タンパク質の発現を有意に低下させます

PV1タンパク質は、腸の血管バリア透過性の指標であるII型内在性膜糖タンパク質であり、腸壁透過性に対するニクジュヨウ抽出物の効果を観察するために、その発現を蛍光抗体法で検出しました。 図7に示すように、NORグループと比較して、MODグループの小腸壁におけるPV1タンパク質の発現レベルは大幅に増加しました。 MODグループと比較して、TGsグループのPV1タンパク質発現レベルは有意に減少しました。 TGはBIFと比較して有意差がありました。 一方、PSは2つのグループとOSグループの間でPV1タンパク質の発現に有意な変化はなく、TGが小腸壁の修復を促進できることを示しています。

8 TGは、アルコール性肝障害のあるマウスの血清ET、DAO、およびD-LA含有量を大幅に改善できます。

図8に示す結果は、NORグループと比較して、MODグループのET、DAO、およびD-LAの血清レベルが有意に増加したことを示しています。 MODグループと比較して、TGグループのET、DAO、およびD-LAのレベルは大幅に減少しました。 グループ内のこれらの指標の内容に大きな変化はありませんでした。

9つのTGは、アルコール性肝障害のあるマウスの肝臓組織でNrf -2 /Keap-1シグナル伝達経路を活性化します

免疫蛍光染色の結果は、NORグループと比較して、MODグループの肝臓におけるNrf-2核侵入率が有意に減少したことを示しました。 Keap-1のタンパク質発現レベルは大幅に増加しました。 MODグループと比較して、TGグループのNrf-2核侵入率は大幅に増加しました。 Keap-1タンパク質の発現レベルが大幅に低下しました。 TGはBIFと比較して有意差はありませんでした。 図9に示すように、PSおよびOSグループは、Nrf-2核侵入およびKeap-1発現に有意な影響を及ぼしませんでした。

10 TGは、アルコール性肝障害のあるマウスの肝臓組織における酸化ストレス因子のレベルを大幅に改善することができます

この実験的研究は、NORグループと比較して、MODグループのSOD、CAT、およびGSH-Pxの活性が大幅に減少し、MDAの含有量が大幅に増加したことを示しました。 図10に示すように、MODグループと比較して、SOD、CAT、およびGSH-Pxの活動は、BIFおよびTGの介入が増加した後、大幅に増加し、MDA含有量は大幅に減少しました。

討論

この研究では、急性アルコール性肝障害のマウスモデルを使用して、14日間投与した場合の急性アルコール性肝障害に対するCistanchedeserticolaのさまざまな部分からの抽出物の影響を調査しました。 、血清中のALTおよびAST含有量および肝臓組織中のMDA含有量、抗酸化酵素SOD、CAT、およびGSH-Pxの活性を有意に増加させ、肝臓組織の形態学的構造および腸壁透過性を改善し、血清ET、DAO、およびDを減少させた-LA含有量は、肝臓への細菌の二次代謝物の移動を阻害します。 同時に、Cistanchedeserticolaの総グルコシドはNrf-2の核への侵入を大幅に促進する可能性があります。 腸壁でのKeap-1タンパク質とPV1タンパク質の発現を阻害し、Cistanchedeserticolaの総グルコシドがNrf-2 / Keap -1シグナル伝達経路を活性化し、腸壁を修復できることを示します。 肝臓の保護を達成するための損傷。

伝統的な漢方薬であるCistancheは、CistanchedeserticolaまたはCistancheCistancheの乾燥した鱗状の茎であり、肝臓保護におけるこれら2種類のCistancheの総グリコシドは、肝臓組織の形態を改善し、線維性ラットの線維化の程度を低下させることができます[12]。 Luo Huiyingの研究グループ[13]は、ニクジュヨウに関するいくつかの研究を実施し、その結果、ニクジュヨウの総グルコシドが、アルコール性肝障害のあるマウスの肝臓組織におけるSOD、GSH-Px、およびCATの活性を高める可能性があることが示されました。この研究の結果と同じです。 2つの化学成分は、フェニルエタノイド配糖体の含有量のみが異なり、最も研究されているのはCistanchepiensisです。 ニクジュヨウの肝臓保護成分は主にフェニルエタノイド配糖体であることが研究により示されていますが、ニクジュヨウのフェニルエタノイド配糖体の含有量はニクジュヨウよりも少ないため、研究した人は多くありません。 含有量がCistancheCistancheの含有量よりも低い場合、それでも肝保護効果があるかどうか。 他の成分の比較研究は、肝臓保護成分を明らかにし、肝臓保護におけるニクジュヨウの効果の実験的基礎を提供し、後の製品開発の理論的基礎を提供するために実施されました。

肝疾患の発症は、Nrf -2 / Keap -1シグナル伝達経路、特にアルコール性肝障害と密接に関連しています。 研究によると、エタノールはNrf -2- /-マウスでステロール調節エレメント結合タンパク質1（SREBP -1）の発現を誘導し、血清トリグリセリドレベルを大幅に上昇させる可能性もあります[14]。 長期のアルコール摂取は、マウスの肝臓でNrf -2の活性化を引き起こし、それによってエタノール誘発性の酸化ストレスを軽減する可能性があります。 酸化ストレスは、肝疾患の発生と発症にも密接に関係しています。 体が酸化ストレスの状態にあるとき、Nrf -2は核の抗酸化応答エレメント（ARE）に結合し、次に下流の抗酸化遺伝子の発現を開始します。 野生型マウスと比較して、Nrf -2- /-マウスは、抗酸化能力が低下しているため、肝臓の損傷に対してより敏感であり、外部刺激に対してより敏感です。 しかし、Nrf -2タンパク質の過剰発現は、明らかな肝障害を示さなかった[15]。 Nrf -2の活性化は、肝障害の新しい潜在的な治療標的および経路である可能性があることがわかります。 この研究では、ニクジュヨウの3つの抽出物が急性アルコール性肝障害に及ぼす影響を比較することにより、ニクジュヨウの総グルコシドがNrfを活性化することにより、抗酸化酵素SOD、CAT、およびGSH-Pxの活性を高めることができることがわかりました{{ 19}} / Keap -1シグナル伝達経路であり、したがってNrf -2 /Keap-1シグナル伝達経路の活性化に役割を果たします。 肝臓保護の役割。

アルコール乱用はアルコール性肝障害を引き起こす主な要因であり、アルコールは慢性肝障害のある患者の腸内でグラム陰性菌の異常増殖を促進する可能性があります。 門脈は肝臓に到達し、それによって肝臓の損傷を悪化させます[16]。 研究によると、ALD患者と動物モデルでは、アルコールとその代謝物であるアセトアルデヒドの両方が腸透過性を高め、リポ多糖（LPS）やD-LAなどの有害物質が血液に侵入する可能性があることがわかっています[17]。 この研究では、ニクジュヨウの総グルコシドが腸管内のアルコールの透過性を低下させ、それによって血中のLPS、DAO、およびD-LAの含有量を減らし、有害物質が門脈から肝臓に入るのを防ぐことができることを発見しました、それによって肝臓の保護に役割を果たしています。

ビフェンデートは私の国で肝炎の治療のための最初の薬です。 酵素低下、抗酸化、免疫調節などの薬理作用があります。 この研究はまた、二座が脂質沈着に有意な影響を及ぼし、その効果がその抗炎症効果に関連している可能性があることを発見しました。 酸化は損傷した肝臓組織の改善に関連しており、それによって肝臓の脂質代謝を改善しますが、それが脂質代謝を直接調節するかどうかは報告されていません。 同時に、結果から、ニクジュヨウの総グルコシドの肝保護効果は二座のそれと有意差がなく、両方とも抗酸化効果があり、ET、DAO、およびD-LAの含有量を減らすことがわかります。血清、これは、Cistanchedeserticolaの総グルコシドに有意差がないことを意味します。 配糖体と二座の間の同様の肝臓保護には違いがあります。これは、二座が腸透過性の低下に有意な影響を及ぼさないことを示しており、血清ET、DAO、およびD-LAを低下させるメカニズムについてはさらに研究する必要があります。

要約すると、Cistanchedeserticolaの総グルコシドは伝統的な漢方薬Cistanchedeserticolaの活性部位であり、肝臓の酸化ストレスを軽減し、肝臓への有害な腸物質の侵入を抑制し、急性アルコール中毒の保護的役割を果たします肝障害。 そのメカニズムは、Nrf -2 /Keap-1シグナル伝達経路の活性化に関連している可能性があります。 一方、Cistanchedeserticolaの多糖類とオリゴ糖は急性アルコール性肝障害に対する保護効果はありません。 関連する研究結果は、Cistanchedeserticolaのさらなる研究開発のための有用な参考資料を提供します。

cistanche paraquesirveで肝臓を保護する

参考文献

[1] Zhang YW、Li YJ、Hu BF、他。 アルコール性肝疾患の3つの短期動物モデルの評価[J]。 Acta Pharm Sin、2018、53：236-243。

[2] Vonghia L、Leggio L、Ferrulli A、他。 急性アルコール中毒[J]。 Eur J Intern Med、2008、19：561-567。

[3] Hou J、Lu Y、ZhangDK。 腸内毒素症と肝疾患との関連[J]。 J Clin Hepatol、2018、34：1128- 1132。

[4] Liu Y、Wang H、Yang M、他。 Cistanchedeserticola多糖類はPC12細胞をOGD/RP誘発性損傷から保護します[J]。 Biomed Pharmacother、2018、99：671-680。

[5] Song DZ、Cao Z、Liu ZB、他。 ニクジュヨウ多糖類は、RANKLシグナル伝達と活性酸素種の産生を阻害することにより、破骨細胞形成と骨吸収を抑制します[J]。 J Cell Physiol、2018、233：9674-9684。

[6] Zhang AL、Yang XM、Li QX、他。 invitroおよびinvivoでの植物アジュバントとしてのCistanchedeserticolaからの水抽出性多糖類の免疫刺激活性[J]。 PLoS One、2018、13：e0191356。

[7] Zhang H、Xiang Z、Duan X、他。 脊髄損傷に対するCistanchedeserticola抽出物からのオリゴ糖の抗腫瘍および抗炎症効果[J]。 Int J Biol Macromol、2019、124：360-367。

[8] Li RY、Zhao MB、Tu PF、他。 単一マーカーによる多成分の定量分析を使用した、CistanchesHerba中の5つのフェニルエタノイド配糖体の同時定量[J]。 J Chin Pharm Sci、2019、28：537-546。

[9] Li SQ、Lu HJ、Wang P、他。 マウスのアルコール性肝障害における細胞アポトーシスの時期に関する研究[J]。 Chin J Clin Pharmacol、2017、33：2154-2157。

[10] Shi ZY、Wu Y、Zhu YM、他。 Cistanches 2019、21：1641- 1646におけるベタイン、マンニトール、フルクトース、グルコース、およびスクロースの定量分析。

[11] Gao YJ、Jiang Y、Dai F、他。 Cistanchedeserticola YCMa[J]の下剤成分に関する研究。 Mod Chin Med、2015、17：307-310。

[12] You SP、Zhao J、Ma L、他。 免疫学的肝線維症のラットに対するCistancheフェニルエタノイド配糖体の効果とメカニズム[J]。 Chin J Pharmacol Toxicol、2016、30：504-510。

[13] Luo HY、Liu Y、Xi GZ、他。 マウスのエタノール誘発性肝障害に対するCistanchis配糖体の保護効果[J]。 Chin J Clin Pharmacol Ther、2009、14：1225- 1228。

[14]呉国楨、劉J、クラッセンCD。 エタノール誘発性の酸化ストレスと脂質蓄積の防止におけるNrf2の役割[J]。 Toxicol Appl Pharmacol、2012、262：321-329。

[15] Qu Q、Liu J、Zhou HH、他。 Nrf2はフロセミド誘発性肝毒性から保護します[J]。 毒性学、2014、324：35-42。

[16] Zhang L、Zu XP、Xie HS、他。 人間の病気における腸内微生物のメカニズムの研究の進歩[J]。 Acta Pharm Sin、2016、51：843-852。

[17] Parlesak A、SchäferC、SchützT、他。 アルコール誘発性肝疾患のさまざまな段階で慢性アルコール乱用を患っている患者の高分子に対する腸透過性の増加と内毒素血症[J]。 J Hepatol、2000、32：742-747。