パセリポリフェノールの可能性とうつ病と不安の治療に役立つそれらの抗酸化能力：invivo亜急性研究
Mar 08, 2022
詳細については。 コンタクトtina.xiang@wecistanche.com
概要：うつ病と不安神経症は、世界のすべての地域で主要なメンタルヘルスの問題です。 これらの病気は、酸化ストレスを含む多くの危険因子に関連しています。 化学的性質の向精神薬は、これらの病気の影響を高めるいくつかの副作用を示しています。 この状況に直面して、天然物は有望な代替品であるように思われます。 この研究の目的は、Petroselinumsativumの抗不安作用と抗うつ作用を評価することでした。ポリフェノールインビボ、およびその相関酸化防止剤 invitroでの特性。抗不安薬抽出物（50および100 mg / kg）の活性は、オープンフィールドおよび明暗チャンバーテストを使用して評価され、抗うつ活性は、強制水泳テストを使用して評価されました。 抽出物の抗酸化活性は、2、2-ジフェニル-1-ピクリルヒドラジル（DPPH）フリーラジカルテストとFRAP（鉄還元能力）テストによって評価されました。 フェノール抽出物は、特に100 mg / kgの用量で非常に強力な抗不安作用および抗うつ作用を示し、マウスの抑うつ行動（不動時間の短縮）および抗不安作用（中央および照明領域での発見傾向）を減少させました。 ）これらの結果に付随するパロキセチンおよびブロマゼパム（古典的な薬）のものよりも優れており、抽出物は重要な抗不安能力も示しました。 これらの予備的な結果は、Petroselinum satioumが、うつ病や不安神経症を治療するための補体または独立した植物薬として使用するための抗不安薬および抗うつ薬の可能性を示すことを示唆しています。
キーワード：Petroselinum sativum; ポリフェノール; 抗不安薬; 抗うつ薬のような; 抗酸化剤; 薬理学; 漢方薬; 天然物
1.はじめに
うつ病や不安障害は長い間メンタルヘルスの問題と考えられており、ストレスが蔓延している社会にとって大きな負担となっています。 世界保健機関（WHO）は、2030年までに、潜在的に致命的な病気としてのうつ病が、世界で2番目に多い障害の原因になると予測しています[1]。 最新のWHOの推定によると、世界中で3億人以上がうつ病に苦しんでおり、そのうち2億6000万人以上が不安障害を患っています[2]。
精神障害の診断および統計マニュアル（DSM-V）は、大うつ病性障害を、時折の悲しみまたはうつ病の発作だけでなく、少なくとも2週間連続してうつ病の気分または興味または喜びの喪失として定義しました。しばしば再発する[3]。 WHOはまた、うつ病を「一般的な悲しみ、喜びと興味の喪失、罪悪感、睡眠障害（不眠または眠気）および食欲、疲労感（精神運動遅滞）などのさまざまな心理的および生物学的症状と定義しています。 ）、そして集中力の欠如」。最も深刻なケースでは、うつ病は自殺にさえつながる可能性があります[4]。
WHOによって定義されている不安は、「倦怠感、興奮、無力感、さらには絶滅の状態を伴う、未決定の差し迫った危険の感覚」です。 それはまた、潜在的で不確実な危険によって引き起こされる予期的な恐怖の状態として説明することもできますが、実際の危険に直面して生じる恐怖とは対照的に、その原因は必ずしも意識的ではありません。 ただし、これら2つの感情は、同様の生理学的（血圧の上昇、発汗、頻脈など）および行動（覚醒と回避の増加）の反応を特徴としています[5]。
うつ病と不安神経症は、一般的に抗うつ薬や抗不安薬（精神安定剤）、多くの場合、パロキセチンやベンゾジアゼピンなどの化学物質です。 ただし、これらの薬の使用には一定の制限があり、望ましくない副作用を引き起こす可能性があります。 ブロマゼパムは不安神経症の治療に処方されます。 しかし、その消費には、眠気、鎮静、記憶喪失など、多くの負の副作用が伴います[6]。 睡眠障害、食欲不振、眠気、性機能障害も、大うつ病性障害の管理に使用されるセロトニン再取り込み阻害薬（SSRI）ファミリーの抗うつ薬であるパロキセチンの典型的な副作用です[7]。 この限られた有効性の結果として、新しく、より効果的で、毒性のない治療手段の探索が高く評価されています。
薬用植物は、特に多くの薬が副作用が少ないことが知られているため、新しく安全で効果的な治療法の適切な供給源になり得ます[8]。 複数の薬用植物が上記の障害でテストされており、それらは非常に快適な結果をもたらし、追加の植物の抗うつ薬のような抗不安薬の特性を発見するためのさらなる研究を奨励しました[9]。
一般に「パセリ」（アラビア語で「maadnous」）として知られているPetroselinum satioum Hoffm。は、セリ科のメンバーです。 Apium crispum Mill、Apium Petroselinum L.、Petroselinum Hortense Hoffm、およびPetroselinum crispum（Mill）Fuss。 PetroselinumsativumHoffmの同義語でもあります。[10。 パセリは、地中海地方を起源とする料理用ハーブとして、現代では世界的に一般的なハーブになっています[11]。 P. sativumには、次のようなさまざまな有益な特性があります。酸化防止剤、鎮痛、痙攣、抗糖尿病、免疫調節、および胃腸への影響[12]。 これらのさまざまな利点は、ポリフェノール（アピゲニン、ケルセチン、ルテオリン、ケンペロール）、ビタミン、カロテノイド、クマリン、タンニンなどの植物のコア成分に起因する可能性があります[13]。 セリ科には、Coriandrum satioum L. [14]、Pimpinella anisum L. [15]、Carum carviL.[16]などの抗うつ作用と抗不安作用で知られる複数の植物が含まれます。 50〜200 mg/kgの範囲の濃度の場合。
この研究では、パセリの潜在的な抗うつ薬のような抗不安作用ポリフェノールと一緒に、初めて評価されました抗酸化作用、相関関係があったかどうかを判断します。
2.結果
2.1。 抗酸化活性の評価
2.1.1.DPPHテスト
図1は、さまざまなレベルのPSPEおよびBHTの関数としての抗酸化活性のパーセンテージを示しています。 得られた結果は、私たちの抽出物とBHTが濃度依存性の抗ラジカル活性を示すことを明らかにしています。 つまり、DPPHラジカルの阻害率は、P。sativumおよびBHTのフェノール抽出物の濃度とともに増加します。 BHITは私たちの抽出物と比較して最も高い活性を示しました。 0 .5 ug / mLの場合、BHTは最大阻害率90％に達し、1 ug/mLの濃度で一定のままでした。 同じ濃度で、フェノール抽出物は58パーセントの最大阻害をもたらしました
合成抗酸化剤BHTは、非常に強力な抗ラジカル活性を示し、IC50は約0.024 ug / mLであり、P sativumのフェノール抽出物で記録されたもの（約0.184 ug / mL）よりも高くなっています。 。
2.1.2。FRAPテスト
図2は、PSPEとBHT（ポジティブコントロール）のさまざまな濃度の関数としての光学密度（OD）の変化を示しています。 還元のパーセンテージは、抽出物とBHTの両方の濃度に比例することがわかります。 後者は、抽出物と比較して高い割合の減少を示しました。
P.sativoum（PSPE）のポリフェノール画分の効率をBHTの効率と比較するために、FRAP（IC50）の50％を減少させる濃度を決定しました。
BHT（合成抗酸化剤BHT）は、IC50が約0.09ug / mLで、P。sativumのフェノール抽出物で記録されたもの（約0.38 ug / mL）よりも高い非常に強力な抗酸化活性を示しました。 ）。
2.2。 抗うつ活性の評価強制水泳試験
実験の3週間における強制水泳試験のダウンタイムの変化を図3に示します。試験中の不動時間は、PSPE処理マウス（PSPE 50 mg / kg（34s±3.286））で有意に短かった。 PSPE 100 mg / kg（33.8s±2.653））対照（パロキセチン（100.8s±6.837）、ビヒクル（176s±6.550）と比較）。
これらの結果は、P。sativumのフェノール抽出物の抗うつ効果がパロキセチンのそれよりも大きいことを示しています。
2.3。 抗不安作用の評価
2.3.1。 オープンフィールドでの不安行動
図4は、3週間の抽出物処理中にオープンフィールド試験の中心で費やされた時間の変化を示しています。 PSPE（50および100 mg / kg）で治療されたマウスは、対照群と比較して中央部でより多くの時間を費やしたことがわかります。 この有意な増加は、治療期間だけでなく、抽出物の濃度にも比例します。 最適値は、100 mg / kgの濃度で得られました（33.4s±1.208が50 mg / kgの用量であったのに対し、37.4s±1.778）。 これは、抗不安薬この植物の効果。
3週間の実験中に交差したタイルの数の変化を図5に示します。分析では、PSPE処理マウス（50 mg / kg（161.2±5.490）、100 mg /）が通過したタイルの数が著しく増加したことが示されました。 kg（173±10.104））ブロマゼパム1 mg / kg（115.8±1.393）およびビヒクル（147.4±1.568）治療群と比較。 これらの結果は、1mg/kgのブロマゼパムよりもFPPSの抗不安作用が大きいことを示しています。
2.3.2。 明暗室での不安行動
図6は、調査期間中に照明付きチャンバーで費やされた時間の変化の結果を示しています。 結果は、PSPEで治療されたマウスの時間の経過とともに照明付きチャンバーで費やされる時間が漸進的に増加することを示しています。 この増加は21日目に特に顕著です。このテストでは、ブロマゼパム治療およびPSPE治療マウスは、照明付きコンパートメント（ブロマゼパム1 mg / kg（146.8 s±1.068）、PSPE 50mg / kg（199.6s± 6.838）、PSPE 100 mg / kg（213.6s±9.331）対照マウス（ビヒクル（75.8s±4.352））と比較。これは、P。sativumポリフェノール抽出物の抗不安作用の証拠として解釈されました。
![Variation in time spent in the lighted chamber during the three weeks of treatment in control and treated mice (*** p ≤ 0.001 in comparison to negative controls, ≠≠ p ≤ 0.01 and ≠≠≠ p ≤ 0.001 in comparison to positive controls). PSPE: Polyphenolic fraction of P. sativum. Figure 7 shows the variation in the number of transitions between the light and dark chambers during this test. A remarkable difference was found during the 21 days between PSPE-treated mice (50 mg/kg (16 ± 0.548), 100 mg/kg (12.4 ± 0.510)) and control mice (vehicle (10 ± 0.837), bromazepam 1 mg/kg (12 ± 0.949)). These results are consistent with the results of the time spent in the lighted chamber, as these two parameters are inversely proportional to the level of anxiety the mice displayed. Figure 7. Variation in the number of transitions during the four weeks of treatment in control and treated mice (** p ≤ 0.01 and *** p ≤ 0.001 in comparison to negative controls, ≠ p ≤ 0.05, ≠≠ p ≤ 0.01 and ≠≠≠ p ≤ 0.001 in comparison to positive controls). PSPE: Polyphenolic fraction of P. sativum. 3. Discussion We demonstrated in this study that the phenolic extract of P. sativum displays antioxidant activity in vitro and anxiolytic and antidepressant activities in vivo. Ferulic acid and cinnamic acid have been found to have antidepressant effects in some studies [17,18], while quercetin and hydroxytyrosol demonstrated an approved anxiolytic effect [19,20]. Those compounds could be behind the observed effect. The effectiveness of an antioxidant can be exerted in different forms, such as the scavenging of free radicals, the decomposition of free radicals, and also the chelation of metal ions [17]. This activity can be evaluated by FRAP and DPPH assays, the latter of which, due to its rapidity, is often used to screen molecules present in plant extracts [18]. Our results showed antioxidant activity in the phenolic extract of parsley. Previous work by Hinneburg et al. [21] showed that the aqueous extract of parsley exerted weak inhibitory activity of the DPPH radical, with an IC50 on the order of 12.0 ± 0.10 mg/mL (compared to the polyphenolic extract in our study, 0.184 μg/mL). Conversely, the chelating Figure 6. Variation in time spent in the lighted chamber during the three weeks of treatment in control and treated mice (*** p ≤ 0.001 in comparison to negative controls, 6 =6= p ≤ 0.01 and 6 =6=6= p ≤ 0.001 in comparison to positive controls). PSPE: Polyphenolic fraction of P. sativum](/Content/uploads/2022842169/2022030810163131a6e27a34a84988a48a1d1b3f388b18.png "Variation in time spent in the lighted chamber during the three weeks of treatment in control and treated mice (*** p ≤ 0.001 in comparison to negative controls, ≠≠ p ≤ 0.01 and ≠≠≠ p ≤ 0.001 in comparison to positive controls). PSPE: Polyphenolic fraction of P. sativum. Figure 7 shows the variation in the number of transitions between the light and dark chambers during this test. A remarkable difference was found during the 21 days between PSPE-treated mice (50 mg/kg (16 ± 0.548), 100 mg/kg (12.4 ± 0.510)) and control mice (vehicle (10 ± 0.837), bromazepam 1 mg/kg (12 ± 0.949)). These results are consistent with the results of the time spent in the lighted chamber, as these two parameters are inversely proportional to the level of anxiety the mice displayed. Figure 7. Variation in the number of transitions during the four weeks of treatment in control and treated mice (** p ≤ 0.01 and *** p ≤ 0.001 in comparison to negative controls, ≠ p ≤ 0.05, ≠≠ p ≤ 0.01 and ≠≠≠ p ≤ 0.001 in comparison to positive controls). PSPE: Polyphenolic fraction of P. sativum. 3. Discussion We demonstrated in this study that the phenolic extract of P. sativum displays antioxidant activity in vitro and anxiolytic and antidepressant activities in vivo. Ferulic acid and cinnamic acid have been found to have antidepressant effects in some studies [17,18], while quercetin and hydroxytyrosol demonstrated an approved anxiolytic effect [19,20]. Those compounds could be behind the observed effect. The effectiveness of an antioxidant can be exerted in different forms, such as the scavenging of free radicals, the decomposition of free radicals, and also the chelation of metal ions [17]. This activity can be evaluated by FRAP and DPPH assays, the latter of which, due to its rapidity, is often used to screen molecules present in plant extracts [18]. Our results showed antioxidant activity in the phenolic extract of parsley. Previous work by Hinneburg et al. [21] showed that the aqueous extract of parsley exerted weak inhibitory activity of the DPPH radical, with an IC50 on the order of 12.0 ± 0.10 mg/mL (compared to the polyphenolic extract in our study, 0.184 μg/mL). Conversely, the chelating Figure 6. Variation in time spent in the lighted chamber during the three weeks of treatment in control and treated mice (*** p ≤ 0.001 in comparison to negative controls, 6 =6= p ≤ 0.01 and 6 =6=6= p ≤ 0.001 in comparison to positive controls). PSPE: Polyphenolic fraction of P. sativum")
図7は、このテスト中の明室と暗室の間の遷移数の変化を示しています。 PSPEで治療したマウス（5 0 mg / kg（16±{{1 0}}。548）、1 0 0 mg /の間で、21日間に顕著な違いが見られました。 kg（12.4±0.510））および対照マウス（ビヒクル（10±0.837）、ブロマゼパム1 mg / kg（12±0.949）。これらの2つのパラメーターは、照明付きチャンバーで過ごした時間の結果と一致しています。マウスが示した不安のレベルに反比例します。
![Variation in the number of transitions during the four weeks of treatment in control and treated mice (** p ≤ 0.01 and *** p ≤ 0.001 in comparison to negative controls, ≠ p ≤ 0.05, ≠≠ p ≤ 0.01 and ≠≠≠ p ≤ 0.001 in comparison to positive controls). PSPE: Polyphenolic fraction of P. sativum. 3. Discussion We demonstrated in this study that the phenolic extract of P. sativum displays antioxidant activity in vitro and anxiolytic and antidepressant activities in vivo. Ferulic acid and cinnamic acid have been found to have antidepressant effects in some studies [17,18], while quercetin and hydroxytyrosol demonstrated an approved anxiolytic effect [19,20]. Those compounds could be behind the observed effect. The effectiveness of an antioxidant can be exerted in different forms, such as the scavenging of free radicals, the decomposition of free radicals, and also the chelation of metal ions [17]. This activity can be evaluated by FRAP and DPPH assays, the latter of which, due to its rapidity, is often used to screen molecules present in plant extracts [18]. Our results showed antioxidant activity in the phenolic extract of parsley. Previous work by Hinneburg et al. [21] showed that the aqueous extract of parsley exerted weak inhibitory activity of the DPPH radical, with an IC50 on the order of 12.0 ± 0.10 mg/mL (compared to the polyphenolic extract in our study, 0.184 μg/mL). Conversely, the chelating Figure 7. Variation in the number of transitions during the four weeks of treatment in control and treated mice (** p ≤ 0.01 and *** p ≤ 0.001 in comparison to negative controls, 6 = p ≤ 0.05, 6 =6= p ≤ 0.01 and 6 =6=6= p ≤ 0.001 in comparison to positive controls). PSPE: Polyphenolic fraction of P. sativum](/Content/uploads/2022842169/2022030810164428debec4b2c84509af32543ad45e3b76.png "Variation in the number of transitions during the four weeks of treatment in control and treated mice (** p ≤ 0.01 and *** p ≤ 0.001 in comparison to negative controls, ≠ p ≤ 0.05, ≠≠ p ≤ 0.01 and ≠≠≠ p ≤ 0.001 in comparison to positive controls). PSPE: Polyphenolic fraction of P. sativum. 3. Discussion We demonstrated in this study that the phenolic extract of P. sativum displays antioxidant activity in vitro and anxiolytic and antidepressant activities in vivo. Ferulic acid and cinnamic acid have been found to have antidepressant effects in some studies [17,18], while quercetin and hydroxytyrosol demonstrated an approved anxiolytic effect [19,20]. Those compounds could be behind the observed effect. The effectiveness of an antioxidant can be exerted in different forms, such as the scavenging of free radicals, the decomposition of free radicals, and also the chelation of metal ions [17]. This activity can be evaluated by FRAP and DPPH assays, the latter of which, due to its rapidity, is often used to screen molecules present in plant extracts [18]. Our results showed antioxidant activity in the phenolic extract of parsley. Previous work by Hinneburg et al. [21] showed that the aqueous extract of parsley exerted weak inhibitory activity of the DPPH radical, with an IC50 on the order of 12.0 ± 0.10 mg/mL (compared to the polyphenolic extract in our study, 0.184 μg/mL). Conversely, the chelating Figure 7. Variation in the number of transitions during the four weeks of treatment in control and treated mice (** p ≤ 0.01 and *** p ≤ 0.001 in comparison to negative controls, 6 = p ≤ 0.05, 6 =6= p ≤ 0.01 and 6 =6=6= p ≤ 0.001 in comparison to positive controls). PSPE: Polyphenolic fraction of P. sativum")
3.ディスカッション
この研究では、P。satioumのフェノール抽出物が、in vitroで抗酸化作用を示し、invivoで抗不安作用と抗うつ作用を示すことを示しました。
フェルラ酸と桂皮酸はいくつかの研究で抗うつ効果があることがわかっていますが[17,18]、ケルセチンとヒドロキシチロソールは承認された抗不安効果を示しました[19,20]。 これらの化合物は、観察された効果の背後にある可能性があります。
抗酸化剤の効果は、フリーラジカルの除去、フリーラジカルの分解、金属イオンのキレート化など、さまざまな形で発揮されます[17]。 この活性は、FRAPおよびDPPHアッセイによって評価できます。後者は、その迅速性のために、植物抽出物に存在する分子をスクリーニングするためによく使用されます[18]。 私たちの結果は、パセリのフェノール抽出物に抗酸化活性を示しました。 Hinneburgらによる以前の研究[21]は、パセリの水性抽出物が、12のオーダーのIC50でDPPHラジカルの弱い阻害活性を発揮することを示しました。0±{{8} } .10 mg / mL（私たちの研究のポリフェノール抽出物と比較して、0.184 ug / mL）。 逆に、この抽出物のキレート効果は、同じ研究で使用された他の抽出物と比較してより効果的でした。
最近の研究では、気分障害と酸化ストレス[22,23]および心理的ストレス[24,25]との関連も見出されており、抗酸化物質の潜在的な適用に関する不安やうつ病を予防および/または管理する新しい道が開かれています。 Desrumauxetal。 [26]マウスの脳のビタミンE欠乏は、酸化ストレスと不安を誘発する行動の重要な兆候のレベルを上昇させることに気づきました。 同様に、ビタミンCを与えられたマウスは最近、この化合物が尾懸垂試験の結果に基づいて抗うつ作用を持っていることを明らかにしました[27]。 フラボノイドやフェノール酸などのポリフェノールは、強力な抗酸化作用でよく知られています[28,29]。 不安やうつ病を回避および管理する方法としてこれらの二次植物化学代謝物を使用することは、有望な戦略である可能性があります[9]。 Akinciらによって実施された研究。 [30]は、パセリが細胞の抗酸化防御システムをサポートすることにより、経口摂取した場合のストレス誘発性胃損傷を最小限に抑えることに成功していることを示しました。これは、平均組織グルタチオンレベル（53.31±9.50）およびスーパーオキシドジスムターゼの活性の増加に反映されます（ 15.18±1.05）およびカタラーゼ（16.68±2.29）。
オープンフィールド実験は、動物の感情状態を評価するために使用されます。 ホームケージから離れて別の設定に置かれた動物は、歩行活動、探索、固定化の減少など、すべてまたは一部のパラメーターの変化を示すことによって苦痛と不安を示すことがよくありますが、グルーミングは増加します行動[31]。 100 mg / kgの用量のエンドウ豆抽出物は、フィールドの中心で費やされる時間と総歩行活動の有意な増加によって示されるように、非常に有意な抗不安効果をもたらしました。 この増加は、1 mg/kgのブロマゼパムで治療されたマウスで見られたものよりも大きかった。
明暗室の実験は、薬の抗不安作用を予測するのにも役立ちます。 この試験中のマウスの不安の程度を測定するために、2つのパラメーターが注目されます：（1）動物が暗い部屋で過ごした時間の割合が低いことは、その不安レベルに関連しています。 言い換えれば、照明付きコンパートメントで費やされる時間の割合が最小である場合、不安は高いと見なされ、（2）遷移の数、つまり2つのコンパートメント間の通過の数は不安のレベルに反比例します（遷移の数が少ないということは、不安レベルが高いことを意味します）[32]。 この研究の結果は、100 mg /kgのP.sativumポリフェノール抽出物が、研究期間中の対照と比較して、照明付きチャンバーで過ごした動物の時間の増加と遷移の数に基づいて最適な抗不安効果を示したことを明らかにしました。
強制水泳実験は1970年代に開発されました。 また、発明者の名前でポルソルトテストとして知られています[33]。 我々の発見は、処理されたマウスの不動時間が対照マウスのそれよりも短かったことを示しており、P.sativumのフェノール抽出物の抗うつ効果を示している。 しかし、この不動時間の減少は、水泳時間または登山時間の増加に有利に働いた可能性があります。 理論的には、強制水泳中に、主にノルアドレナリン作動性またはドーパミン作動性の上昇をもたらす抗うつ薬は、エスカレーションの時間を増やすことによって不動を減らしますが[34]、5HTを活性化する抗うつ薬は、代わりに水泳時間を増やすことによって不動を減らします。 [35]。 CNS機能に関しては、ポリフェノールの大部分は神経伝達物質システムと直接相互作用します[36]。 パセリについて行われた研究は、フラボノイドの優勢を示しています37]。 従来の伝統的な薬用抽出物に見られる多種多様なフラボノイドは、GABAA受容体に直接結合することによって鎮静/抗不安効果があると報告されています[38]。
Pripremらによって実施された研究。 [39]は、ポリフェノールケルセチンが300 mg / kgの用量で1週間繰り返し投与した後、抗不安作用を示すことを示しています。これは、低用量での投与の1時間後にその効果を示すジアゼパムほど効果的ではありません。 ペレイラ他 [40]は、ロスマリン酸が非常に低用量（2〜4 mg / kg）で抗不安作用を示すことを示しました。 別の例はアピゲニンであり、これはベンゾジアゼピン受容体に対して選択的で低い親和性を示し、副作用がほとんどない抗不安作用をもたらします[41。 フラボノイドはまた、モノアミンオキシダーゼの阻害と、その結果としての脳の特定の領域における5- HT、DA、およびノルエピネフリンレベルの増加を通じて、うつ病に関与します[42]。
アスパラギン酸、グルタミン酸、ホモシステイン、システインなどの興奮性アミノ酸はシナプス後細胞を刺激しますが、アラニン、グリシン、GABA、タウリンなどの抑制性アミノ酸はシナプス後細胞の発達を抑制します43]。 芳香族L-アミノ酸デカルボキシラーゼと呼ばれる酵素。DOPAデカルボキシラーゼ、トリプトファンデカルボキシラーゼ、5-ヒドロキシトリプトファンデカルボキシラーゼ、またはAAADとも呼ばれ、L-ドーパと5-ヒドロキシトリプトファンのドーパミンと{{ 7}}ヒドロキシトリプタミンも役割を果たす可能性があります。 パセリはこの酵素の過剰発現を引き起こし、その抗うつ効果に寄与する可能性があります。 同じセリ科に属する植物であるCentellaAsiaticaで行われた研究では、総トリテルペンの抗うつ効果は、視床下部-下垂体-副腎皮質軸の機能の改善とモノアミン神経伝達物質の含有量の増加によるものであることが示されました[44]。 これらの研究は、P。sativumのフェノール抽出物による抗不安および抗うつ活性の存在を示唆しています。
4.材料と方法
4.1。 植物材料
PetroselinumsativumHoffm。 空中部分は、開花前の段階（2018年春）に北モロッコのタノウネート地域（34度32'9 "N4度38'24"W）から収集されました。 この植物の分類、識別、および植物名は、資格のある植物学者Prによって検証されました。 バリアミナ。 植物のサンプルは、理学部のダールエルマフレズフェズ植物標本館に保管されています（バウチャー標本：18TA5001）。
4.2。 抽出
抽出は、Slighouaらによって説明されているように実行されました。 [11]。 簡単に説明すると、P。sativum微粉末の乾燥した空中部分10gをメタノール（100 mL）と混合し、50度の温度で3時間浸軟させました。 その後、完全な溶媒蒸発を確実にするために、濾液を乾燥するまでロータリーエバポレーターを使用して濃縮した。 得られた抽出物を蒸留水（200 mL）に再溶解し、3つのヘキサンとクロロホルム（200 mLを3回）で洗い流して、色素やその他の不純物を取り除きました。 最終水相を酢酸エチル（200mLで3回）で抽出した。 有機相（酢酸エチル）を濃縮して、ポリフェノール抽出物を得た。 抽出の収率は10.52パーセントです。
以前に、HPLC-DAD分析を使用して、次のポリフェノールで構成されていることを示した同じ抽出物に関する研究を発表しました：（1）フェルラ酸、（2）桂皮酸、（3）没食子酸、（4）ケルセチン、（5）ミリセチン、（6）ナリンゲニン、（7）ハイドロックス-チロソール[11]。
4.3。 動物を研究する
この研究では、マウス（Swiss albino）は、理学部のDhar elMahrazFezの動物の家から提供されました。 実験に含める前に、それらを従来のケージに6匹ずつ入れ、2週間の適応期間を与え、餌と水を自由に摂取させ、温度を22±2度に制御し、明暗サイクルを12時間/12時間。
実験は、実験動物の治療と使用に関する国際基準[16]および内部動物倫理委員会（＃09-12 / 2019 / LBEAS）に従って実施されました。
4.4。 抗酸化活性の評価
4.4.1.2、2-ジフェニル-1-ピクリルヒドラジル（DPPH）テスト
DPPHは、フェノール化合物の抗酸化活性を評価するために使用される最も一般的な化合物の1つです|45。 DPPHは、窒素の架橋原子上に不対電子を持っています。 このテストの原理は、抽出物が濃い紫色のDPPHフリーラジカルを分光光度法で測定可能な黄色がかった還元に還元する能力に要約されています[28]。 一連の抽出物濃度をメタノールで調製しました。100μLをそれぞれ750μLのDPPHのメタノール溶液（0.004パーセント）に添加しました。 25度で30分間のインキュベーション期間の後、517nmで吸光度を測定しました。 ネガティブコントロールでは、サンプルをメタノールに置き換えました。 DPPHのパーセンテージは、次の式で決定されました。
（1）I=[（空白-サンプル）/空白]×100
抗ラジカル活性のパーセンテージで、サンプルはサンプルの吸光度であり、ブランクはネガティブコントロールの吸光度です。
4.4.2。 鉄還元力（FRAP）テスト
研究された抽出物中の鉄（Fe3 plus）の還元力は、Mechchateetal。によって記述された方法に従って決定されました。 【28】。 簡単に説明すると、さまざまな濃度の1 00μLの抽出物を500μLのリン酸緩衝液（PBS、0.2 M、pH6.6）と混合しました。 ）およびフェリシアン化カリウムK、Fe（CN）の1％溶液500μL。 これらを50度の水浴中で20分間インキュベートした。 次に、トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）の１０％水溶液５００μＬ、塩化第二鉄ＦｅＣｌ ３の０．１％溶液１００μＬ、および蒸留水０．５ｍＬを反応混合物に加えた。 この混合物の吸光度の読み取りは、植物抽出物を除く培地のすべての試薬を含むブランクに対して700nmで行われました。 結果は、50％の有効濃度（EC50）として表されます。これは、0.5の吸光度を得るのに必要な抗酸化剤の濃度を表します。 吸光度の増加は、テストされた抽出物の還元力の増加に対応します。
4.5。 抗うつ活性強制水泳試験（FST）
ポルソルトモデル、または強制水泳テストは、抗うつ薬タイプの活動の予測テストです。 マウスは、12cmの高さまで水で満たされた円筒形の容器の中で個別に泳ぐことを余儀なくされます。 テストは6分間続きますが、テストの最後の4分間のみが分析されます。 動物が直立した姿勢で浮かんでいるとき、動物は不動であると見なされ、水中でのバランスを維持するためにほんの少しの動きをします（不動時間）。
この試験には、それぞれ5匹のマウスからなる合計4つのバッチを使用しました。 すべての植物抽出物は21日間強制経口投与され、試験は21日間の抽出物投与の1時間後に実施されました。 ネガティブコントロールであるグループAは、ビヒクルとして生理学的溶液を受け取りました。 陽性対照群であるグループBは、11 mg/kgのパロキセチンを投与されました。 グループCおよびDは、それぞれ50および100 mg/kgでPSPEを投与されました。
植物抽出物投与の1時間後、不動時間を6分間カウントした。 最初の2分間は、マウスがストレスに順応するのを許し、その後、マウスは疲れて、時間とともに動けなくなりました。 不動時間を秒単位で数え、参考のために陽性対照群（パロキセチン）のマウスの不動時間と比較した[33]。
4.6。 An.xiolyticアクティビティ
4.6.1。オープンフィールド
動物は周辺部に比べて中央部の高度な回避を示すため、オープンフィールド（OF）テストは抗不安作用を予測するために使用されます。 また、探索および移動テストとしても使用されます。 この領域は、50×50cmの領域に配置された高さ40cmの4つの木製の壁で構成され、黒い線でマークされた同じサイズの25のタイルに分割されました。
この試験には、それぞれ5匹のマウスからなる合計4つのバッチを使用しました。 すべての植物抽出物は21日間強制経口投与されました。 次に、1、7、14日目に植物抽出物を投与してから1時間後に試験を実施し、陰性対照であるグループAにビヒクルとして生理的溶液を投与し、陽性対照であるグループBに1mg/kgのブロマゼパムを投与した。 。 グループCおよびDは、それぞれ50および100 mg/kgでPSPEを投与されました。
60分後、各マウスを中央の正方形に配置してアリーナを探索し、マウスの総歩行活動（マウスが横切った総タイルの数、つまり周辺タイルの数と数）を測定することによってテストを実行しました。 4本の足すべてを持つマウスが交差する中央のタイルの数）とオープンフィールドの中央で費やされた時間[3146]。
4.6.2。 明暗室テスト
明暗室テストは、異なる色と照明の2つの区画間の動物の動きを分析することにより、不安に関連する動物の行動を簡単に評価できるため、抗不安作用の予測にも使用されます。 より不安な動物は、明るい部屋で過ごす時間が少なくなる傾向があります。 寸法44×21×21cmの木製の明暗ボックスは、通路（中央に7×7cmの穴があり、2つのコンパートメントを分離し、どちらか一方にアクセスできるようにする）で接続された2つの黒と白のコンパートメントで構成されていましたコンパートメントの）。 照らされたコンパートメントはランプによって照らされました。
この試験には、それぞれ5匹のマウスからなる合計4つのバッチを使用しました。 すべての植物抽出物は21日間強制経口投与されました。 試験は、1、7、14、および21日目に植物抽出物を投与してから1時間後に実施しました。ネガティブコントロールであるグループAは、ビヒクルとして生理的溶液を受け取りました。 陽性対照であるグループBは、1 mg/kgのブロマゼパムを投与されました。 グループCおよびDは、それぞれ50および100 mg/kgでPSPEを投与されました。
60分後、各マウスを暗いコンパートメントに結合する開口部に向けて配置することにより、5分間のテストを実行しました[47]。 各テストの後、箱はアルコールで洗浄されました。 測定されたパラメータは、照明付きチャンバーで費やされた時間とチャンバー遷移の数でした[48]。
5。結論
世界中で毎日使用されている料理用ハーブであるパセリは、莫大な健康上の利点を示し、この研究を通じて、特に100 mg / kgの用量で、古典的な薬よりも優れた、顕著な抗うつ薬のような抗不安作用があることが示されました。 副作用が少ない、またはほとんどない効果的な薬を探す上で、この植物は適切に配置された代替品になる可能性があります。 この作品は、その毎日の消費だけでなく、確立された植物薬への開発を奨励しています。
この作業を完了するには、その有効性を確認するために同じ抽出物を使用した他の行動テストの実行を含め、さらなる研究が必要です。 したがって、P。satioumのフェノール抽出物のバイオガイド分画は、観察された抗不安薬および抗うつ薬のような活性の原因となる主要成分を特定し、それらの正確な作用機序を決定するために計画されています。
参考文献
1.フリードリヒ、MJうつ病は、世界中の障害の主な原因です。 JAMA 2017、317、1517。[CrossRef] [PubMed]
2.リム、GY; タム、WW; ルー、Y .; ホー、CS; 張、MW; Ho、1994年から2014年までの30カ国からのコミュニティにおけるうつ病のRC有病率。Sci。 Rep。2018、8、2861。[CrossRef]
3.アメリカ精神医学会。 精神障害の診断および統計マニュアル（DSM -5®）; アメリカ精神医学会：米国ワシントンDC、2013年; ISBN0-89042-557-4。
4. Dinga、R .; マーカンド、AF; Veltman、DJ; ビークマン、AT; Schoevers、RA; ヴァンヘマート、AM; Penninx、BW; Schmaal、L.広範囲の臨床的、心理的、生物学的データからうつ病の自然主義的経過を予測する：機械学習アプローチ。 翻訳 精神医学2018、8、1–11。 [CrossRef]
5. Daviu、N .; ブルチャス、MR; Moghaddam、B .; サンディ、C .; バイエラー、A。ストレスと不安の間の神経生物学的リンク。 Neurobiol。 ストレス2019、11、100191。[CrossRef]
6. Sanabria、E .; クエンカ、RE; Esteso、M.Á.; マルドナド、M。ベンゾジアゼピン：必須医薬品または毒性物質としての使用。 Toxics 2021、9、25。[CrossRef] [PubMed]
7. Kanekar、S .; シェス、CS; オムバッハ、HJ; オルソン、PR; ボグダノバ、OV; ピーターセン、M .; レンショー、CE; 宋、Y.-H .; D'Anci、KE; Renshaw、PFラットにおける低圧低酸素曝露は、選択的セロトニン再取り込み阻害薬であるフルオキセチン、パロキセチン、エスシタロプラム、およびセルトラリンの抗うつ効果を差別的に変化させます。 Pharmacol。 生化学。 振る舞い。 2018、170、25〜35。 [CrossRef]
8. Es-Safifi、I .; Mechchate、H .; Amaghnouje、A .; Jawhari、FZ; バーリ、A .; Cerruti、P .; アベラ、M .; Andriy、A .; Andriy、D.モロッコのフェズメクネス地域で急性消化器系の問題を治療するために使用される薬用植物：民族薬理学的調査。 民族植物学。 解像度 Appl。 2020、20。[CrossRef]
9. Amaghnouje、A .; Mechchate、H .; Es-Safifi、I .; Boukhira、S .; Aliqahtani、AS; ノーマン、OM; Nasr、FA; コンテ、R .; Calarco、A .; Bousta、D.スイスアルビノマウスにおけるOriganumMajoranaL.ポリフェノールの毒性および抗うつ薬様効果の亜急性評価。 Molecules 2020、25、5653。[CrossRef]
10. Agyare、C .; Appiah、T .; Boakye、YD; Apenteng、JA Petroselinum crispum：レビュー。 Med。 スパイス野菜。 Afr。 2017、527〜547。 [CrossRef]
11. Slighoua、M .; マハディ、私。 ディクリスト、F .; Amaghnouje、A .; グラフ、A .; Boucetta、N .; バーリ、A .; Bousta、D.パセリ（Petroselinum sativum Hoffm。）のハイドロエタノール抽出物およびポリフェノール画分のinvivoエストロゲンおよび抗炎症活性の評価。 J.エスノファーマコール。 2020、265、113290。[CrossRef] [PubMed] 12. Farzaei、MH; アバサバディ、Z .; Ardekani、MRS; Rahimi、R .; Farzaei、F。Parsley：民族薬理学、植物化学、および生物活性のレビュー。 J.トラディット。 顎。 Med。 2013、33、815〜826。 [CrossRef]
13. Chaves、DS; Frattini、FS; アサフィフィム、M .; デアルメイダ、AP; ジンガリ、RB; コスタ、SSペトロセリナムクリスプム抽出物のフェノール化学組成および止血に対するその効果。 ナット 製品 コミュン。 2011、6、1934578X1100600709。 [CrossRef]
14. Mahendra、P .; Bisht、S.さまざまな実験的不安モデルを使用して評価されたCoriandrumSativumの抗不安活動。 IndianJ.Pharmacol。 2011、43、574。[CrossRef]
15. Shahamat、Z .; Abbasi-Maleki、S .; Mohammadi Motamed、S.マウスにおけるPimpinellaAnisum果実の水性およびエタノール抽出物の抗うつ薬様効果の評価。 AvicennaJ.Phytomed。 2016、6、322〜328。 [PubMed]
16. Es-Safi、I .; Mechchate、H .; Amaghnouje、A .; Jawhari、FZ; アルカマリー、OM; Imtara、H .; グラフ、A .; バーリ、A .; Bousta、D. CarumcarviL.の抗不安薬および抗うつ薬のような特性とその抗酸化活性との関連についての洞察。 ライフ2021、11、207。[CrossRef]
17. Zheng、X .; チェン、Y .; チェン、Y .; ユエ、Y .; Li、Y .; Xia、S .; Li、Y .; Deng、H .; 張、J .; Cao、Y.フェルラ酸は、抗炎症作用とHPA軸を介して、出生前にストレスを受けた子ラットの抑うつ様行動を改善します。 Int。 J.Mol。 科学 2019、20、493。[CrossRef]
18. Diniz、LRL; de Souza、MTS; バルボザ、JN; de Almeida、RN; de Sousa、ケイ皮酸のDP抗うつ薬の可能性：作用機序と医薬品開発の展望。 Molecules 2019、24、4469。[CrossRef]
19. Lee、B .; Yeom、M .; シム、私。 リー、H .; ハーム、D.-H。 ラットのリポ多糖によって誘発される不安様症状および神経炎症に対するケルセチンの保護効果。 証拠。 ベースの補数。 オルタナ。 Med。 2020、2020、4892415。[CrossRef]
20. Karkovi´c Markovic、A .; Tori's、J .; 野蛮、M .; Jakobuši´c Brala、C。ヒドロキシチロソール、チロソールおよび誘導体とそれらが人間の健康に及ぼす可能性のある影響。 Molecules 2019、24、2001。[CrossRef]
21. Hinneburg、I .; ドーマン、HD; Hiltunen、R。選択された料理用ハーブおよびスパイスからの抽出物の抗酸化活性。 食品化学。 2006、97、122〜129。 [CrossRef]
22. Nunes、CS; Maes、M .; Roomruangwong、C .; モラエス、JB; ボニファシオ、KL; バルガス、HO; バルボサ、DS; アンダーソン、G .; de Melo、LGP; Drozdstoj、S.気分障害における生活の質の低下は、神経酸化ストレスおよび基礎甲状腺刺激ホルモンレベルの上昇と抗けいれん性気分安定薬の使用に関連しています。 J.評価 クリン。 練習する。 2018、24、869 –878。 [CrossRef] [PubMed]
23.ボニファシオ、KL; バルボサ、DS; モレイラ、EG; コネグリアン、CF; バルガス、HO; Nunes、SOV; モラエス、JB; Maes、M.気分障害における血圧上昇の主要な決定要因としてのニトロ酸化ストレス毒性の増加。 J.影響。 不和。 2021、278、226–238。 [CrossRef] [PubMed]
24. Eick、SM; バレット、ES; van't Erve、TJ; グエン、RH; ブッシュ、NR; ミルン、G .; 白鳥、SH; ファーガソン、KK出生前の心理的ストレスと妊娠中の酸化ストレスとの関連。 Paediatr。 ペリナト。 エピデミオール。 2018、32、318〜326。 [CrossRef]
25.マカリスター、MJ; Basham、SA; Waldman、HS; スミス、JW; Mettler、JA; ブタワン、MB; Bloomer、RJ運動中の心理的ストレスが、健康で訓練を受けた若い男性の酸化ストレスのマーカーに及ぼす影響。 生理。 振る舞い。 2019、198、90〜95。 [CrossRef] [PubMed]
26. Desrumaux、C .; Risold、P.-Y .; Schroeder、H .; デッカート、V .; マッソン、D .; Athias、A .; ラプランシュ、H .; Le Guern、N .; Blache、D .; 江、X.-C。 リン脂質転移タンパク質（PLTP）の欠乏は、脳のビタミンE含有量を減らし、マウスの不安を高めます。 FASEB J. 2005、19、1–16。 [CrossRef]
