UPLC-Q-ORBITRAP HRMSと分子ドッキングを組み合わせて、Cistanchia Mathericaの苦味と風味と風味の関係の物質的基礎を調査する

抽象的な

 

ウルトラパフォーマンス液体クロマトグラフィー - クアドルポール電界磁場高解像度質量分析（UPLC-Q-Orbitrap HRMS）と分子ドッキングに基づいて、Cistanchis Desitericola Extractの苦い味を提示する物質は、味覚の研究基盤を築き、味の味を調査し、第一に、UPLC-Q-Orbitrap HRMSを使用して、C。destericolaの構成要素を特徴付け、69の化学成分が特定されました。これらの化学成分の苦味受容体を含む分子ドッキングは、6つのフェニルエタノールグリコシド、5つのフラボノイド、3つのフェノール酸、2つのシクロアルケニルエーテルテルペン、2つのアルカロイド、その他2つのその他の成分を含む20の苦い存在物質のスクリーニングをもたらしました。同じ起源の抽出物を同じ原点から収集し、苦い存在する物質を分子ドッキングによって調査しました。他のコンポーネント、新鮮なC.デザイトコラサンプルの9つのバッチは、同じ起源の異なる月から収集され、異なる月と異なる部分に分割され、サンプルの苦味の定量的値は、電子舌法、およびサンプルの6つの成分の含有量によって決定されました（錐体、トリコチェンglycoside、トゥベリンA、トゥベリンA、イジオ - トリチドジンシフアシド、およびジングニピノシド）は、高性能液体クロマトグラフィー（HPLC）によって決定され、サンプル中の総フェニルエタノールグリコシドは、紫外線分光光度測定法によって決定されました。総フェニルエタノールグリコシド、総多糖類、総アルカロイド、総フラボノイド、およびサンプル中の総フェノール酸の含有量を決定する測光法は、この基礎の化学測定分析と組み合わせて、ピアソンの相関分析、灰色の相関分析、およびオルソゴンLの分析分析によって検証されます。 C. Destericolaのコンポーネントは、分子ドッキングの結果と一致していました。そして最後に、苦い存在する物質を研究の対象として。

Cistanchis Destericola Extract

 

最後に、ネットワークの薬理学的予測と分析は、ターゲットとして苦い物質を使用して実施され、苦い物質の標的と苦ビトの有効性との間の関係IPが調査されました。結果は、Bティーター物質の重要な標的はEGFR、PIK3CB、PTK2であり、苦い物質が関連する疾患標的のアクションを通じて激しい有効性を発揮する可能性があることを示しました。結論として、この研究では、主にピネアロシド、マウリチアナグリコシド、ギッベレリンのフェニルエタノールグリコシドがC. saterinaの苦味の物質的基礎であり、分子ドッキング技術が伝統的な漢方薬における苦い物質のスクリーニングにおける誘導役割を持つことを示しました。将来。 C. destericaの苦い物質は苦い味と効果を持っています。

 

 

 

キーワード Cistanchis Destericola Extract; uplc-q-orbitrap hrms;ネットワーク薬理学;分子ドッキング;電子舌;苦い物質;味と効果の関係

 

Cistanche Destericola YC Ma。は、オロバンチャ科家族の多年生根寄生虫であるサイスンチ属、一般的に砂漠のサイスチェとして知られています[1]。シェノンのハーブクラシックは、シスタンチが甘くて少し暖かい味がしていると述べています。しかし、実際には、服用された後、持続的でわずかな苦味があります。伝統的な漢方薬の5つのフレーバーの「風味」は、もともと味がしたときに薬の実際の味に基づいて決定されていましたが、薬の味はその効果に密接に関連しているため、「フレーバー」による薬の効果を説明し、要約するように徐々に進化しました[2]。サイスチェは、多くの古典的な古代の医療書に録音されています。腎臓に栄養を与え、本質を補充し、腸を湿らせ、便秘を和らげる効果があります。古代以来、性機能障害、女性の不妊症、エッセンスと血の喪失、腰と膝の痛み、乾燥腸と便秘など、腎不全に関連する病気の治療に使用されてきました[3]。伝統的な漢方薬の苦味は、伝統的な漢方薬理論の5つのフレーバーの1つであり、伝統的な漢方薬の臨床使用を導くための重要な理論的根拠です。苦味は、伝統的な漢方薬の5つの味の1つです。その特性は、煉獄、乾燥、および火災[4]であり、伝統的な漢方薬の臨床的使用を導く上で重要な役割を果たしています。ほとんどの伝統的な漢方薬と伝統的な漢方薬の準備は苦味があります。伝統的な漢方薬は、苦い薬の苦い香料物質（以下、苦い物質と呼ばれる）は、効果的な物質であると考えています[5]。しかし、伝統的な漢方薬における苦い物質とその苦い効果の関係はまだ不明です。苦い伝統的な漢方薬の苦い物質が激しい有効性を持っているかどうかについて、関連する科学的研究の欠如がまだあります。サイスンチェには、主にフェニルエタノールグリコシド、シクロペンタンエーテルテルペン、リグナン、およびそのグリコシド、糖など、さまざまな化学成分が含まれています。さらに、フラボノイド、フェノール酸、アルカロイド、揮発性油、アミノ酸、無機酸性油なども含まれています。その中でも、フェニルエタノールグリコシド化合物は、シスチャンチの主要な効果的な成分であると考えられています[7]。 Cistanche Deserticolaには、春と秋の2つの収穫シーズンがあります。研究では、春のサイスンチェデザイトコラの多糖類含有量は低く、フェニルエタノールグリコシドの含有量は高く、味は苦いが、その抗酸化能力は強いことを示しています[8]。その苦い成分は、薬物の有効性と特定の相関があることがわかりますが、サイスンチェデザイトコラの苦い味の物質的根拠はまだ不明であり、さらなる開発を制限する可能性があります。

の苦い物質の基礎を探求するためCistanche Deserticolaそして、激しい有効性（味と効果の関係）との関係で、この研究では、Cistanche Deserticola Extractを研究オブジェクトとして採用し、Cistanche Destericolaの苦い物質を、超高性能液体クロマトルクロマトル - エレクトロスタティックフィールド軌道高解像度質量マススペース測定（UPLC-Q-ORBITRAP HRMS）の分解能測定（UPLC-Q-ORBITRAP HRMS）によってスクリーニングしました。主な苦い薬用成分の含有量は、高性能液体クロマトグラフィー（HPLC）、および苦い物質の各主要なカテゴリーの含有量は、紫外線分光光度測定によって決定されました。苦味の程度は電子的な舌で評価され、苦い成分は化学測量と組み合わせて発見されました。ネットワーク薬理学技術を使用して、KEGG経路を実行し、伝統的な漢方薬の苦い物質の標的に関する濃縮分析を行い、苦い物質のターゲットは、苦い物質と伝統的な漢方薬における苦味の有効性との関係を探るために、苦い効果の標的と相関していました。研究のアイデアを図1に示します。この研究では、現代の技術研究方法を最大限に活用して、Cistanche Destericicolaの味覚情報を探求し、その苦い物質的基礎と味覚効果の関係を明らかにしました。伝統的な漢方薬の味の物質的根拠の科学的分析のための参照を提供し、サイスンチェデザイトコラ資源の詳細かつ正確な開発と利用の基礎を提供することが期待されています。 薬。

 

 

図1苦い存在する物質とCistanche Destericola Extractsの激しい有効性との関係に関する研究のルート

 

1つの材料

1.1薬剤

新鮮なシスチャン砂漠のサンプルは、2023年4月から12月まで新jiangのアクシュで収集されました。サンプルは、シャヤ郡人民病院の薬剤師であるLi Mingjieによって特定されました。バウチャー標本は、新jiang医科大学の薬局研究所に保管されていました。サンプルは不純物をきれいにし、文献によれば新鮮なスライスし、5分間水で湯通しし、処理され、60度乾燥し、砕いて、40-メッシュシーブを通してふるいにかけられます。表1を参照してください。

 

テーブルは、サイスンチェデザイトコラの情報をサンプリングします

 

いいえ。	コード	収集時間	乾燥する前の前処理	検出サイト
1	M1	2023-04-10	全体 - 植物のスライス	植物全体
2	M2	2023-05-08	全体 - 植物のスライス	植物全体
3	M3	2023-06-15	全体 - 植物のスライス	植物全体
4	M4	2023-07-10	全体 - 植物のスライス	植物全体
5	M5	2023-08-11	全体 - 植物のスライス	植物全体
6	M6	2023-09-10	全体 - 植物のスライス	植物全体
7	M7	2023-10-09	全体 - 植物のスライス	植物全体
8	M8	2023-11-14	全体 - 植物のスライス	植物全体
9	M9	2023-12-10	全体 - 植物のスライス	植物全体
10	P1	2023-08-11	セクション - 特定のスライス	表皮上部
11	P2	2023-08-11	セクション - 特定のスライス	上皮質
12	P3	2023-08-11	セクション - 特定のスライス	上の髄
13	P4	2023-08-11	セクション - 特定のスライス	中表皮
14	P5	2023-08-11	セクション - 特定のスライス	中皮質
15	P6	2023-08-11	セクション - 特定のスライス	真ん中の髄
16	P7	2023-08-11	セクション - 特定のスライス	下表皮
17	P8	2023-08-11	セクション - 特定のスライス	下皮質
18	P9	2023-08-11	セクション - 特定のスライス	下の髄

 

1.2データベースとソフトウェア

TCMSP（https://tcmspw.com/tcmsp.php）、genecards（https://www.genecards.org）、omim（https://www.omim.org）、uniprot（https://www.uniprot.org）、pdb （http://www.rcsb.org）、string（https://string-db.org）、pubchem（https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/）、david（https：//david.ncifcrf.gov/） （https://alphafold.ebi.ac.uk/）、alphafold2およびautodockvina（https://alphafold.ebi.ac.uk/）を分子ドッキングに使用しました。 IBM SPSS Statistis 25は、ピアソン分析に使用されました。ソフトウェア：オンラインWebサイトSPSSPRO（https://www.spsspro.com）を使用してグレイアソシエーション分析を実行し、SIMCA14.1ソフトウェアを使用して正の部分的な最小二乗分析（OPLS-DA）を実行し、Cytoscapeソフトウェアを使用してネットワーク薬理学分析を実行しました。

 

1.3機器と試薬

Vanquish Ultra-High Performance Liquid Chromatograph、Orbitrap Exploris 120高解像度質量分析計（Thermofisher Scientific、USA）; sa -402 b電子舌（Insent、日本）; LC -20高性能液体クロマトグラフ（Shimadzu、日本）; UV可視分光光度計（Shanghai Youke Instrument Co.、Ltd。）; AUW2200 Electronic Balance（Shimadzu Philippines Factory）; SK250超音波クリーナー（Shanghai Kedao Ultrasonic Instrument Co.、Ltd。）; dhg -9246電気一定温度爆風乾燥オーブン（上海Jinghong Experimental Equipment Co.、Ltd。）; Plusel+Chorusl Ultrapure Water Instrument（Veolia、France）。
参照物質エキナコシド（純度は98％以上、バッチ数PCL-＃-A003）、ベルバスコシド（純度が98％以上、バッチ番号PCL-＃-M235）、チューブロシドA（純度が99％以下または等しい）、＃-t003以上）、scutelrarin（scutelrarin（scutelrarin） PCL-＃-D005）、およびイソババスシド（純度は98％以上、バッチ番号PCL - ＃-I236）は、Sichuan Puxi'ao Standard Material Technology Co.、Ltd。から購入しました。コレファンス物質ジェニポシド（98％以上の純度、バッチ数WP23120502）、ルチン（純度は98％以上、バッチ数WP32110405）、ガリア酸（98％以上の純度、バッチ数WP32140706）、およびベタイン（純粋さ以上の純度98％） wp3654874）は、Sichuan Weikeqi Biotechnology Co.、Ltd。から購入しました。 Rensteinの塩、無水グルコース（分析グレード）、アセトニトリル、メタノール（クロマトグラフィーグレード）、およびリン酸は、Sinopharm Chemical Reagent Co.、Ltdから購入しました。