CistanchePhelypaeaの生理活性脂質と酪酸プロファイル
Mar 16, 2022
詳細情報：ali.ma@wecistanche.com
モハメッド・ファウジー・ラマダン他
概要
の野生植物から抽出された油Cistanche phelypaea酪酸、ステロール、炭化水素、およびトコフェロールの含有量を分析しました。 総脂質（TL）含有量は10 g / kg（乾燥重量ベース）でした。脂肪酸の大部分は不飽和型（総脂肪酸の50.4％）でしたが、飽和（主にパルミチン酸）は約43.2％でした。総脂肪酸。 オレイン酸が支配的な脂肪酸であり、パルミチン酸とリノール酸がそれに続いた。 主成分b-シトステロールを含むオイルには、大量のステロールが含まれていました。 他の植物ステロール（例えば、スチグマステロール、D 7-アベナステロール、およびD 5-アベナステロール）は、ほぼ等しい量（総ステロールの6〜9パーセント）で存在していました。 同定された主な炭化水素化合物は、全炭化水素の約61.2パーセントを構成するC21、C26、およびC32でした。 ただし、少量のC12、C18、およびC22も検出されました。 トコフェロールレベルは油中で高く（3.36 g / kg油）、b-トコフェロールが主成分であり、その後にa-異性体が続きました。 両方のトコフェロール成分が油中の総ビタミンE含有量の87％以上を占めていました。さらに、c-およびd-トコフェロールが油中に少量検出され、総ビタミンE含有量の14〜16％を占めていました。 本研究によって提供される情報は、食品用途および化学分類学にとって重要である。Cistanchephelypaea.
キーワード： Cistanchephelypaea、油、酪酸、ステロール、炭化水素、トコフェロール
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1はじめに
Orobanchaceae科に属するCistanche属には、16種が含まれます。 それらは幻覚性の根の寄生虫の魅力的なグループを形成します。この属の発生は、アフリカ、アジア、および南ヨーロッパの一部を含む地中海地域の特定の乾燥および半乾燥地域に限定されています。 ハマウツボ科は、ホンオニク属とハマウツボ属の2属を表しています。 Tackholm（1974）によると、エジプトでは、Cistanche属は、C。phelypaea（図1）、C。tubulosa、およびC.violaceaの3つの種によって表されます。 多くの食用および薬用用途は、この属に起因しています。 カンカニクジュヨウの植物全体は、パキスタンで下痢やただれの治療薬として医学的に使用されています（Kobayashi et al.1987）。 Cistanche種の芽と茎は、腎臓の欠乏のための伝統的な漢方薬の食品用途と強壮剤に使用することができます。 さらに、ライオンや膝の冷感、女性の不妊、老人の腸の乾燥による便秘にも使用されます（Mabberley 1997; Namba1994）。 オロバンシュ属（ハマウツボ科）は、約100種のホロ寄生植物で構成されています。 Beack-Mannagetta（1930）は、Gymnocaulis Nutt。、Myzorrhiza（Phil。）Beck。、TrionychenWallrの4つのセクションで属の亜属分類を提案しました。 とOsproleonWallr。後者は今日では宗派として知られています。 国際植物命名法（Greuter1988）の規則に従ったオロバンシュ。 抗菌作用、抗炎症作用（Endo et al。1982）、鎮痙作用、筋弛緩作用（El-Shabrawy et al。1989）、心臓作用（Pennacchio et al。）など、このファミリーの一部の種について多くの生物学的活性が報告されました。 1969）。 さらに、最近ルビアレスらが述べたように、オロバンシュはアスパラガスのように食べられます。 （1999）。
図1壮観な植物はハマウツボ科（ハマウツボ科）の一員ですが、ルピナスの形をしており、5葉の2つの唇を持つ花を持ち、高さ0.5メートルまで成長することができます
この植物には、フェニルエタノイド配糖体（フェニルプロパノイドと呼ばれることもあります）、イリドイド（Xiong et al.1996）、および多糖類（Naran et al.1995）を含む多くの成分が含まれています。 アミノ酸は、Cistanche solesaで決定および同定されました（Jiao et al.1989）。 酪酸が報告され、Orobancheファミリーの種子中のトコクロマノール組成が最近調査されました（Velasco et al.2000）。 の脂質組成に関する情報Cistanchephelypaeaただし、不十分であり、利用可能なデータは不完全です。 本研究では、有益な教授を得るために、植物全体を分析しましたi脂質のルCistanchephelypaeaこれは、ハーブのさらに詳細な化学的調査と栄養評価の基礎として役立ちます。
2。材料と方法
2.1材料
の野生植物全体Cistanchephelypaea2008年4月に南シナイ（エジプト）から収集されました。植物は、エジプトのカイロ大学理学部のエル・ハディディ博士によって親切に認証されました。植物標本は、ザガジグ大学農学部の農業生化学科に保管されました。 ステロールの特性評価、コレステロール、β-シトステロール、スチグマステロール、ラノステロール、エルゴステロール、カンペステロール、D 5-アベナステロール、およびD 7-アベナステロールに使用される標準は、Supelco（Bellefonte、PA、USA）から購入しました。 ビタミンE（a-、b-、c-、およびd-トコフェロール）の特性評価に使用される標準は、Merck（ダルムシュタット、ドイツ）から購入しました。使用したすべての試薬と化学物質は、入手可能な最高純度のものでした。
2.2方法
2.2.1総脂質（TL）の抽出
無傷の植物を乾燥させ、粉砕した。 ソックスレー抽出器を使用して、60〜80℃で石油エーテルによって全脂質を抽出しました。 溶媒をロータリーエバポレーターで40℃の減圧下で蒸発乾固させた。
2.2.2脂肪酸メチルエステルの気液クロマトグラフィー分析
Metcalfe et al。によって報告された手順に従って、三フッ化ホウ素（メタノール中の1 0パーセント溶液、Merck、ダルムシュタット、ドイツ）で加熱することにより、脂肪酸をメチルエステルにエステル交換しました。 （1966）。 脂肪酸メチルエステル（FAME）は、火炎イオン化検出器とC-R4AXクロマトパックインテグレーター（京都、日本）を備えたShimadzu GC-14Aで同定されました。 キャリアガス（ヘリウム）の流量は0.6 mL / minで、スプリット値は1:40の比率で使用しました。 1lLのサンプルを30m9 0。25mm9 0。2gの膜厚のSupelcoSPM-2380（Bellefonte、PA、USA）キャピラリカラムに注入しました。 インジェクターと検出器の温度は250に設定されました程度。初期カラム温度は100でした程度5によってプログラム程度/分175度まで、175で10分間保持程度、次に8程度/分220まで程度そして220で10分を保ちました程度。 同定を容易にするために、同じカラムで同じ条件で分析した、サンプルのリテンションタイムと本物の標準混合物（Sigma、セントルイス、ミズーリ州、米国、GLCに固有の純度99％）のリテンションタイムを比較しました。 各脂肪酸の定量は、そのメチルエステルのピーク面積をノナデカン酸メチルのピーク面積と比較することにより、補正係数を適用せずに実行されました。
2.2.3ステロールの気液クロマトグラフィー分析
ステロールの分離（ST）は、オイルサンプルの鹸化後に実行されました（Ramadan and Morsel 2 0 0 2a）。 内部標準脂質（250 mg）として酢酸コレステロール（1.5 mg; Sigma、MO、USA）を添加した後、プローブを5 mLのエタノール性KOH溶液（6％、w / v）および数個のアンチバンピング顆粒で60分間還流しました。分。 不けん化物は、最初に10mLの石油エーテルで3回抽出されました。 抽出物を合わせ、10 mLの中性エタノール/水（1：1、v / v）で3回洗浄した後、無水硫酸ナトリウムで一晩乾燥させました。 抽出物を減圧下で２５度の回転式エバポレーターで蒸発させ、次に溶媒を窒素下で完全に蒸発させた。 不けん化物のガスクロマトグラフィー分析は、FIDを備えたメガシリーズ（HRGC 5160、Carlo Erba Strumentazione、ミラノ、イタリア）を使用して実施しました。 カラムはIDフェーズDB5で、5％のフェニルメチルポリシロキサン（J＆W Scientific; Falsom、CA、USA）、長さ30 m、内径0.25 mm、ピン膜厚0.25 mm、キャリアガス（ヘリウム）流量38 mL / min、スプリットレスを充填しました。注入。 検出器とインジェクターは280に設定されました程度。 オーブン温度は310℃で一定に保たれました程度注入量は2μLでした。 すべてのSTホモログは45分以内に溶出され、すべてのSTの溶出を確実にするために全分析は60分に設定されました。 ステロール化合物の定量は、コレステロール酢酸内部標準を使用して実行され、シトステロールの検出器応答を適用することによって計算されました。 分析手順の再現性がテストされ、単一サンプルの3回の繰り返し分析の相対標準偏差は次のようになりました。<5 %.="" quantitative="" analyses="" were="" performed="" with="" a="" shimadzu="" (c-r6a="" chromatopac;="" kyoto,="" japan)="">
2.2.4炭化水素の気液クロマトグラフィー分析
2.2.4.1不けん化物の調製は、AOAC（2000）に記載されている方法に従って決定されました。 既知の重量の油（5 g）をエタノール（30 mL）に溶解し、次に1.5 mLのアルコール性KOH（50パーセント）を添加しました。 油は、還流空気凝縮器の下で水浴上で30分間鹸化された。 アルコール溶液を濃縮し、合計50mLの蒸留水と50mLの石油エーテルを使用して分離器漏斗に定量的に移しました。 不けん化物を石油エーテルで３回抽出し、蒸留水で数回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた後、秤量したフラスコに濾過した。 沸騰水浴を使用して溶媒を蒸発させ、フラスコを105℃で乾燥させた。程度一定の重量に達するまで。
2.2.4.2 GLCによる炭化水素の分析炭化水素化合物は、水素炎イオン化検出器（FID）を備えたPYEUNICAMPRO-GCガスクロマトグラフを使用して同定されました。 不けん化物を分離するために使用されたカラムは、メチルフェニルシリコーン液でコーティングされた（OV -17）1.5 m 9 4mmidのフューズドシリカキャピラリカラムでした。 次のクロマトグラフィー条件を実行しました：スプリット比1：200、サンプルサイズ1 mL、1 mL / minの流量のキャリアガス窒素、注入温度250程度、70からプログラムされたオーブン程度270まで程度5時に程度/分間隔とそれに続く270で20分程度、検出器温度は300でした程度; 30 mL / minでの補助（検出器構成）ガス窒素流量、水素および空気流量は、それぞれ33および330 mL/minでした。 ピーク面積は、Hewlett-Packard3392インテグレーターを使用して測定しました。
2.2.5トコフェロールの順相高速液体クロマトグラフィー（NP-HPLC）分析
2.2.5.1手順NP-HPLCは、余分なサンプル処理（鹸化など）を避けるために選択されました。 分析は、溶媒デリバリーLC -9 A HPLC（島津製作所、京都、日本）を使用して実施しました。 クロマトグラフィーシステムには、モデル87。00可変波長検出器と250 9 4 mm id LiChrospher-Si 60、5 lm、カラム（Knauer、ベルリン、ドイツ）が含まれていました。 すべての成分の分離は、溶媒の流量が約65〜70バールのカラム背圧で1 ml/minに維持されるアイソクラティック溶出に基づいていました。 トコフェロール溶出用に選択された溶媒システムは、イソオクタン/酢酸エチル（96：4、v / v）で、295nmで検出されました。 選択した移動相中のTLの希釈溶液20μLをHPLCカラムに直接注入しました。 トコフェロールは、それらの保持時間を本物の標準のものと比較することによって識別されました。
2.2.5.2検量線の作成トコフェロールの標準溶液は、約5 mg / mLのビタミンEの濃度に段階希釈して調製しました。標準溶液は、-20℃で暗所に保存したストック溶液から毎日調製しました。20 lLを注入し、検量線データを生成するためにピーク面積を決定しました。
2.2.5.3定量化すべての定量化は、ShimadzuC-R6Aクロノトピックインテグレーター（京都、日本）を使用したピーク面積測定によって実行されました。 標準曲線（濃度対ピーク面積）は、線形回帰によって6つの濃度レベルから計算されました。 確立されたクロマトグラフィー条件に基づいて、異なる濃度の標準トコフェロールをHPLCシステムに3回繰り返し注入しました。 すべての作業は、落ち着いた光の条件下で実行されました。提示されたすべての結果は、少なくとも3回の実験の平均値であり、実験間で統計的に有意な差（P [0。05）は見つかりませんでした。
3。結果と考察
オロバンシュ属の脂質組成に関するデータはほとんどありません。 オロバンシュの植物全体から抽出された総脂質は、乾燥重量ベースで10g/kgであることがわかりました。 オロバンシュ属の脂質プロファイルを研究するのはこれが初めてです。
3.1脂肪酸組成
脂肪酸の定性的および定量的組成に関するデータを表1にまとめています。Cistanchephelypaea、脂肪酸プロファイルは、脂質が栄養的に必須のリノール酸の優れた供給源であることを示しています。ここで、オレイン酸とリノール酸の比率は約3：2でした。 オレイン酸（28.1パーセント）が支配的な脂肪酸であり、パルミチン酸（25。0パーセント）とリノール酸（16.6パーセント）がそれに続きました。 オーランドら。 （1987）リノール酸の栄養価は、ホルモンのようなプロスタグランジンを生成する組織レベルでのその代謝によるものであると述べました。 これらのプロスタグランジンの活性には、血圧の低下と平滑筋の収縮が含まれます。 脂肪酸の大部分は不飽和脂肪酸（総脂肪酸の50.4パーセント）でしたが、飽和脂肪酸（主にパルミチン酸）は総脂肪酸の約43.2パーセントでした。 脂肪酸組成と大量の不飽和脂肪酸はCistanchephelypaea栄養用途に適した特別なハーブ。
3.2ステロールと炭化水素の組成
無料のステロールの分析は、調査された油の品質とアイデンティティに関する豊富な情報を提供します。 固定油では、育種プログラムによって劇的に変化した脂肪酸組成とは対照的に、新しい育種系統の栽培も環境要因も遊離ステロールの含有量と組成を大幅に変えることはありません（Lechneretal。1999;Ramadanetal.2006）。 。 さらに、ステロールは多くの油に含まれる不けん化物の大部分を占めています。 それらは健康への影響のために興味深いものです。 最近、成功した機能性食品の例としてステロールが植物油に追加されました（Ntanios 2001; Ramannet al.2009）。 このタイプの製品は現在入手可能であり、健康的な食事の一部として血中LDLコレステロールを約10〜15パーセント低下させることが科学的に証明されています（Jones et al.2000）。 のほとんどのステロールの含有量と組成Cistanchephelypaea油は表2に示されています。29.4g/kgの油を構成する油には高レベルのステロールが推定されました。b-シトステロール、D 7-アベナステロール、スチグマステロール、およびD5-アベナステロールが主成分でした。 主成分は、caを表すβ-シトステロールでした。 総ステロール含有量の77.4パーセント。 他の成分、例えばスチグマステロール、D 7-アベナステロール、およびD 5-アベナステロールは、ほぼ等しい量（総ステロールの6-9パーセント）で存在していました。
の炭化水素プロファイルCistanchephelypaea不けん化物で気液クロマトグラフィーを使用して推定し、表3に示しました。主に同定された化合物はC21、C26、およびC32であり、これらを合わせて同定された炭化水素全体の約61.2パーセントを占めています。 少量のC12、C18、およびC22も不けん化物で検出されましたCistanchephelypaea。 炭化水素の写真は、植物の化学分類学において価値があるかもしれません。
3.3トコフェロール組成
トコフェロール（ビタミンE）などの栄養的に重要な成分は、油の安定性を向上させます。 ビタミンEの定性的および定量的組成に関するデータを表4にまとめています。NP-HPLC手法を使用して、カラム汚染の問題を排除し、トコフェロール分離に一般的な脂質抽出を使用できるようにしました（RamadanandMo¨rsel2002b、2003）。 私たちの研究では、オイルサンプルの鹸化は必要ありませんでした。これにより、分析時間が短縮され、分析中のビタミンの安定性が向上しました。 すべてのトコフェロール誘導体は、両方のサンプルで同定されました。 油中のビタミンEレベルは高かった（3.35g / kg）。 b-トコフェロールが主成分であり、その後にa-トコフェロールが続きました。 両方のトコフェロール異性体は、油中の総ビタミンE含有量の87パーセント以上を含んでいました。 c-およびd-トコフェロールは、総ビタミンE含有量の14〜16％を占める油中に少量検出されました。 油で検出された高レベルのビタミンEは、酸化に対する優れた安定性に寄与する可能性があります。
4結論
健康を促進する天然成分や製品への傾向が高まる可能性があります。 得られたデータは、栄養補助食品および経済的有用性の可能性を示すものとして重要になります。Cistanchephelypaea. Cistanchephelypaea油の収量は少ないですが、必須の脂肪酸、ステロール、脂溶性ビタミンが豊富に含まれています。
差出人：'の生物活性脂質および酪酸プロファイルCistanchephelypaea' にモハメッド・ファウジー・ラマダン他
---J.Verbr。 Lebensm。 （2011）6：333–338 DOI 10.1007 / s 00003-010-0648-1 Journal of Consumer Protection and Food Safety
