ヒト HepG2 細胞のエネルギー代謝に対するカンカの総グリコシドの影響
Feb 24, 2023
カンカ Y. Ma の抗腫瘍効果を研究するために、HepG2 細胞を 0、3.5、10.5、21、31.5、および 42 µg/ml の総グリコシド (TG) で処理しました。 HepG2 細胞の生存率と 50% 阻害濃度 (IC50) は CCK-8 メソッドを使用して検出され、活性酸素種 (ROS) のレベルは DCFH-DA 蛍光プローブを使用して検出されました。 最後に、Seahorse XFe24エネルギーアナライザー（Agilent、米国）を使用して、細胞のミトコンドリア圧と解糖圧を検出しました。 その結果、TG は HepG2 細胞の生存率を低下させ、IC50 レベルは 35.28µg/ml であることが示されました。 TG濃度の増加に伴い、ROSのレベルは濃度依存的な上昇傾向を示しました。 エネルギー代謝は、TG の各用量群が HepG2 細胞のミトコンドリア呼吸および解糖機能を著しく低下させる可能性があることを示しました。 結論として、TG は HepG2 細胞のミトコンドリア呼吸と解糖機能を有意に阻害し、ROS のレベルを上昇させ、細胞増殖を阻害する可能性があります。 したがって、この実験は、カンカが将来的に抗がん食品または抗がん剤の供給源として使用できることを指摘しました. ただし、そのメカニズムと臨床応用に関するさらなる研究が必要です。
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1.はじめに
Cistanche Deserticola Y. Ma については、同種の医薬品および食品物質です。 オロバンチャ科の多年草の寄生植物で、「砂漠人参」と呼ばれています(1)。 最も重要なことは、Cistanche によって提供される脂肪やタンパク質などの栄養素が、正常なヒト組織の基本的なエネルギー代謝のニーズを満たし、腫瘍細胞のエネルギー供給を減らし、腫瘍細胞の増殖を阻害するという目的を達成できることです。 さらに、カンカには、抗酸化、炎症反応の抑制、および免疫力の強化の機能があります (1, 2)。 中華人民共和国の国家衛生健康委員会と国家市場監督管理総局が正式にCistanche Deserticolaの生産と運営を発表して以来. 薬と食品の相同物質としてのY. Maは2021年に試験的に導入され、その開発に関するより詳細な研究が行われました
肝臓がんは消化器系の一般的な悪性腫瘍であり、その死亡率は悪性腫瘍の最前線にランクされ (3、4)、原発性と二次性に分けることができます。 現在、クリニックには安全で有効な治療薬がまだ不足しています。 ソラフェニブなどの治療薬を長期間服用すると、薬剤耐性や副作用が起こりやすくなります (5)。 初期の肝臓がんの症状は非特異的であり、ほとんどの症状は中期および後期段階にあるため、人々は漢方薬による肝臓がんの治療に積極的です. 腫瘍のある患者や、化学放射線療法などの治癒効果が不十分な患者の間で、伝統的な中国医学は、免疫力を高め、初期および中期の腫瘍治療の補助剤になるなど、その利点を反映しています。
近年、カンカには抗がん作用があることが報告されています (6–11)。 葉ら。 (6) Cistanches herba (Cistanche salsa) から抽出されたエキナコシドは、TREM2 の発現を低下させ、PI3K/Akt シグナル経路を遮断することにより、HepG2 細胞の増殖を阻害できることを発見しました。 李等。 (7) は、エキナコシドが、肝臓がんに対して miR-503-3p/TGF- 1/Smad 軸を介して抗腫瘍活性を発揮することも発見しました。 一方、Verbascoside は STAT-3 を介して HepG2 細胞の酸化ストレスとアポトーシスを調節する可能性があり、化学予防剤として開発される可能性があります (8–10)。 さらに、研究者は、フェニルエタノイド配糖体が HepG2 細胞の増殖効果も阻害できることを発見しました (11)。 さらに、エキナコシドは、腎癌 786-O 細胞と SW480 結腸癌細胞の増殖を抑制しました (12, 13)。 別の研究では、Cistanche のフェニルエタノイド配糖体は、H22 腫瘍を有するマウスの肝損傷を軽減し (14、15)、AFP レベルを低下させることで免疫機能を改善し、それによって腫瘍の成長に悪影響を与えることも示されています (16)。 注目すべきは、エネルギー代謝の変化が腫瘍細胞の特徴の 1 つであることです。これは、腫瘍細胞が好気環境または嫌気環境に関係なく、エネルギー供給の方法としてグルコース解糖を使用するという事実として表れます。 「ワールブルグ効果」。 したがって、理論的には、グルコースの取り込みを制限することにより、腫瘍細胞の増殖を制限するために腫瘍細胞を選択的に飢餓状態にすることが可能です (17)。
多くの研究で、エキナコシドやベルバスコシドなどのフェニルエタノイド配糖体の抗腫瘍効果が研究されていますが、TG (フェニルエタノイド配糖体、およびその他の配糖体) の抗腫瘍活性は一般的ではありません (18)。 TG が腫瘍細胞のエネルギー代謝に影響を与えるかどうかについての研究はわずかしかありません。 したがって、この実験では、HepG2 細胞に対する TG の阻害活性を調査するために、エネルギー代謝、酸化的損傷、および解糖能とミトコンドリア圧による細胞生存の関係を分析しました。
2。材料と方法
2.1. 細胞培養と処理
HepG2 細胞は、基礎医学研究所の細胞センター、北京連合医科大学 (北京、中国) から購入し、10 パーセントのウシ胎児血清と 1 パーセントの抗体 (ペニシリン、ストレプトマイシン、およびゲンタマイシン）を使用した。 細胞は、37℃、5% CO2 飽和湿度のインキュベーターで培養されました (19)。 細胞が 80 ～ 90% のコンフルエンスまで増殖した後、EDTA を含まない 0.25% のトリプシンで消化し、1:3 で継代培養しました。 細胞増殖の2〜3日後、対数増殖期の細胞を継代培養またはその後の実験のために採取しました。 各実験では、HepG2 細胞をさまざまな濃度の TG に曝露しました。
Cistanche Deserticola の総グリコシドは、Inner Mongolia Sankou Technology Co., Ltd (Ordos、内モンゴル、中国) (20) から提供されました。 ＴＧは最終濃度が０、３．５、１０．５、２１、３１．５、４２μｇ／ｍｌになるまでＤＭＥＭ培地に溶解した。
2.2. HepG2 細胞形態に対する TG の効果
対数増殖期の HepG2 細胞を 24- ウェルプレートに 5×104 /ウェルの濃度で接種した。 細胞が壁に接着した後、最終濃度が 0、21、および 42 μg/ml になるまで TG を添加し、24 時間培養しました。 次に、各グループの細胞形態を蛍光顕微鏡で観察しました
2.3. HepG2細胞の増殖に対するTGの効果
HepG2細胞の細胞増殖期の対数を1×104/ウェルとし、96-ウェルプレートに接種し、各ウェルに100μl接種した。 細胞が壁に接着した後、最終的な薬物濃度が 0、3.5、10.5、21、31.5、および 42 μg/ml になるように無血清 DMEM 培地に溶解しました。 各濃度は 6 つの複数のウェルに割り当てられ、インキュベーター内で 5% CO2 下、37℃で 24 時間インキュベートされました。 最後に、各ウェルに10% CCK8溶液を含むDMEM培地を100μl添加し、インキュベーター内で30分間インキュベートし、450nmにおける吸光度(A)を検出した。
2.4. 細胞内ROSレベルの測定
4 × 105 個の細胞を含むウェルあたり 2 ml のシステムを 6- ウェル プレートに置き、37℃、5% CO2 のインキュベーターに入れました。 24時間の治療後、細胞内ROSレベルを測定しました。 次に、1 ml の DCFH-DA (10 μM) を添加し、暗所で 37 °C で 30 分間インキュベートしました。 その後、PBS で 3 回洗浄し、最後にフローサイトメトリーで ROS 活性を検出しました。
2.5。 HepG2 ceのエネルギー代謝に対するTGの効果
(A) 試験条件の最適化: 対数増殖期の HepG2 細胞を選択し、Seahorse XFe 24 バイオエネルギー アナライザーの細胞培養プレートにウェルあたり 500 μl で接種しました。細胞数は、1、2、4、および 8 (×104 ) でした。 各グループの 5 つの複製が作成され、そのうち A1、B3、C4、および D6 のみが培地に追加されました。 (B) ミトコンドリア圧力検出: ミトコンドリア圧力キットは、オリゴマイシン、カルボニルシアニドトリフルオロメトキシフェニルヒドラゾン (FCCP)、およびロテノン/アンチマイシン A (Rot/AA) を含む事前に取り出しました。 それらは検出媒体で希釈され、それぞれの濃度が 1 μM、0.5 μM、および 0.5 μM になりました。
次に、水和したプローブ プレートを取り出し、ポート A、B、および C にそれぞれ 56 µl、62 µl、および 69 µl の容量で追加しました。 酸化的リン酸化のレベルを反映するために、異なる時間間隔での酸素消費率 (OCR) 値を測定しました。 (C) 解糖圧力検出: グルコース、オリゴマイシン、および 2- デオキシグルコース (2- DG) を検出媒体で希釈して、濃度をそれぞれ 10 mM、1 μM、および 50 mM にしました。 次に、水和したプローブプレートを取り出し、前述の容量でそれぞれポート A、B、および C に追加しました。 細胞の解糖機能を反映するために、異なる時間間隔での細胞外酸性化率 (ECAR) 値が測定されました (21)。
2.6. ウエスタンブロット
処理した細胞を、タンパク質を溶解するために使用した 80 μl の溶解バッファー (RIPA: PMSF=100:1) でプレーティングした後、ドデシル硫酸ナトリウム-ポリアクリルアミドゲル電気泳動 (SDS-PAGE) を実行して、細胞を分離しました。タンパク質サンプル (ウェルあたり 50 μg のローディング ボリューム)。 その後、PVDF 膜へのタンパク質の転写は氷浴を使用して達成され、タンパク質は BSA によって室温で 1 時間ブロックされ、一次抗体 (Bcl-2、Bax、カスパーゼ-3)を比例的に添加し、4℃で一晩インキュベートしました。 その後、PVDFメンブレンを希釈した二次抗体とともに室温で1〜2時間インキュベートしました。 - アクチンを内部参照タンパク質として使用し、PVDF メンブレンを展開して固定し、標的タンパク質の発現変化を観察しました (22、23)。
2.7. 統計処理
テスト データは、χ ± SD (標準偏差) として表され、SPSS 25.0 (SPSS、米国) を使用した一元配置分散分析 (ANOVA) によって分析されました。 Flowjo10 と Graphpad プリズム 8.0.2 は、図形を描画するために使用されたソフトウェアです。 ∗P < 0.05 および ∗∗P < 0.01。
3. 結果
3.1. HepG2 細胞形態に対する TG の効果
アポトーシスの過程では、まず細胞の体積がゆっくりと減少して変形し、次に壁に近づいて成長する細胞がゆっくりと収縮し、丸くなり、脱落し、染色体濃縮を引き起こします。 一部の核は壊れ、取り残され、アポトーシス小胞を形成します。 図 1 から、HepG2 細胞を TG で処理すると、細胞体積が徐々に減少することが観察されました。 21μg/mlのTGで処理した細胞の核が収縮し始め、体積が小さくなることが直感的に観察された。 42µg/ml TG では、細胞は浮遊と細胞の断片化を伴いました。 細胞膜が完全に壊れ、ひびが入り、壊死し、境界が不明確で、崩壊と死が差し迫った状態にある
3.2. HepG2細胞の増殖に対するTGの効果
in vitro での TG の抗腫瘍効果を確認するために、HepG2 細胞を一連の濃度の TG (0、3.5、10.5、21、31.5、および 42µg/ml) で 24 時間処理しました。 次に、CCK8 アッセイ法を使用して、HepG2 細胞の増殖に対する TG の効果を調べました。
HepG2 細胞の増殖に対する TG の効果を調べます。 図 2 は、異なる濃度の TG で 24 時間処理した後、HepG2 の増殖がさまざまな程度に影響を受けたことを示しています。 対照群の細胞生存率と比較して、治療群の細胞生存率は、それぞれ 96.95%、92.59%、92.78%、77.28%、31.04% でした。 濃度の増加に伴い、細胞生存率は減少傾向を示しましたが、3.5、10.5、21μg/ml の濃度で有意差はなく (P > 0.05)、阻害範囲は小さい。 濃度 31.5 と 42µg/ml の間に有意差があり (P < 0.01)、阻害率は 42µg/ml で 68.96% と高かった。 したがって、この実験は、TG が HepG2 細胞の生存を濃度依存的に有意に阻害できることを示しており、TG の細胞毒性を確認するにはさらなる実験が必要になる可能性があります。
3.3. 細胞内ROSレベルの測定
図 3 に示すように、TG 濃度の増加に伴い、ROS のより高い相対含有量が DCFH-DA 蛍光プローブ法によって検出され、用量勾配の傾向が示されました。 24 時間の TG 処理後、DCF の相対蛍光強度は 0.91%、13.64%、24.61%、45.91%、および 105.33% 増加しました。 10.5、21、31.5、および 42µg/ml (P < 0.01)。 TG 濃度が 42μg/ml のとき、ROS の最大蓄積レベルは対照群の約 2 倍であることが観察されました。 したがって、安定した高いROS生産能力が、TGのより優れた細胞毒性の理由である可能性があると推測しました。 これらの結果は、ROS 産生能と細胞毒性との密接な関係も示している可能性があります。
3.4。 Hep2 ceのミトコンドリア好気呼吸に対するTGの効果
3.4.1. 細胞数の決定
ミトコンドリア圧と解糖圧の検出では、最初に最適な細胞播種密度を決定する必要がありました (21)。 この実験では、細胞密度を特徴付けるために、基本的な酸素消費率 (OCR) 値と細胞外酸性化率 (ECAR) を使用することをお勧めします。 まず、最適な細胞密度を概算するために視覚的評価が使用されました。細胞は、50 ～ 90% の融合度で各ウェルに均等に分布する必要があります。 一方、24- ウェル バイオ エネルギー アナライザーを使用して細胞の OCR または ECAR 値を決定する場合、細胞接種密度は 1×104 -8×104 細胞/ウェルである必要があります。 一方、基本的な OCR 値と ECAR 値を使用して、最適な播種密度を決定し、データの精度を確保できます。 Seahorse XFe24 アナライザーの製品説明によると、正常な増殖状態のセル OCR は . 50 ～ 400 pmol/min の範囲であり、通常の基本的な ECAR の範囲は 20 ～ 120 mpH/min の範囲である必要があります。 したがって、2 つの側面を組み合わせて、細胞を 8 x 104 /ウェルで維持することがより適切になります (図 4)。
3.4.2. HepG2細胞の酸化的リン酸化に対するTGの効果
ls、ミトコンドリア機能の評価は、細胞のエネルギー代謝に関連する疾患の理解とそれに対応する医薬品の開発に不可欠であり、OCR は最も重要な評価指標の 1 つです。 HepG2 細胞の酸化的リン酸化プロセスに対する TG の影響を調べるために、Seahorse XFe24 アナライザーを使用して、TG で処理した細胞の OCR レベルを検出し、関連する指標を分析しました。 TG 濃度の増加に伴い、OCR 値は徐々に低下し（図 5A、B）、特に FCCP 添加後は投与群と対照群の OCR 値の差が大きくなった。 同時に、図 5C ～ F および表 1 は、基礎呼吸が徐々に減少したことを示しています。 0µg/ml と比較すると、各投与群でそれぞれ 39.24%、41.43%、47.10%、78.22%、95.26% 減少しました。 最大呼吸数は、それぞれ 52.95%、65.06%、77.76%、94.48%、98.61% 減少しました。 非ミトコンドリアの酸素消費量は、それぞれ 37.34%、37.45%、47.27%、76.10%、79.79% 減少しました。 ATP 生産は、それぞれ 42.49%、47.91%、57.83%、87.28%、98.16% 減少しました。
減少の理由は、TG で処理された細胞がアポトーシスの状態にあり、ROS のレベルが増加したためである可能性があります。これにより、細胞の酸化的損傷が増加し、ミトコンドリア呼吸鎖複合体の活性が低下し、能力に影響を与える可能性があります。ミトコンドリア ATP 合成の。 結果は、TG が細胞ミトコンドリアの好気性呼吸の全体的なレベルを有意に阻害し、TG 処理後の細胞生存率が有意に低下したことを示しました。これは、ミトコンドリアのエネルギー代謝の障害に直接関連している可能性があります。 ただし、メカニズムのより詳細な研究が必要です
3.4.3. HepG2の解糖能力に対するTGの効果
解糖系は細胞基質内で行われ、生成された乳酸はH plus を細胞外に放出します。 さらに、Seahorse XFe24 アナライザーを使用して、TG 処理後の ECAR 値と関連するアッセイパラメーターを検出することにより解糖機能を分析し、TG が HepG2 細胞の解糖プロセスに影響を与える特定の方法を決定しました。 時間が経つにつれて、グルコースとオリゴマイシンを追加すると、ECAR 値は徐々に増加し、2- DG を追加すると下降傾向を示しました (図 6A)。 TG 濃度の増加に伴い、全体的な ECAR レベルは徐々に減少し (図 6B)、これは解糖能力と解糖予備値の漸減に反映されました (図 6D、E; 表 2)。 非グリコシル化レベルは、対照群よりもほとんど低かったが、濃度依存性はなかった (図 6C)。 コントロール グループと比較して、TG 治療グループの解糖能力は、それぞれ 1.12%、9.29%、34.46%、92.15%、および 100.00% 減少しました。 解糖予備値は、それぞれ 4.78%、34.17%、79.50%、93.39%、98.63% 減少しました。
結果は、TG が HepG2 の解糖機能を低下させ、細胞毒性を生成することにより、HepG2 細胞の増殖と成長を阻害できることを示しました。 注目すべきことに、低用量での解糖機能の損傷度は、細胞の酸化的リン酸化のさまざまなパラメーターの低下度よりも低かったのに対し、高用量では解糖機能と細胞の酸化的リン酸化が大幅に減少しました。 したがって、TGは低用量では主にミトコンドリア機能を損傷し、高用量ではミトコンドリア機能と解糖機能の両方を同時に損傷し、腫瘍細胞のアポトーシスと壊死の程度を加速し、細胞増殖を阻害することが示唆されました
3.5。 TG処理後のHepG2細胞タンパク質の発現
図 7 は、さまざまな濃度の TG で 24 時間処理した後、HepG2 のタンパク質発現レベルが 0.01 であることを示しています。 同時に変化します。 TG の濃度が増加すると、アポトーシス促進因子の Bax とカスパーゼ -3 の発現レベルが増加し、濃度がそれぞれ 31.5 μg/ml と 10.5 μg/ml のときに相対的なタンパク質発現が最高になりました。 さらに、濃度が低い場合 (0、3.5、10.5、および 21 μg/ml TG)、抗アポトーシス因子 Bcl-2 の相対発現が増加しました。 TG 濃度が 31.5µg/ml および 42µg/ml のとき、有意な減少傾向を示しました。 したがって、TGがHepG2のアポトーシスを促進する可能性があると推測しました
4. 考察と結論
カンカとその有効成分には、抗酸化、抗疲労、アンチエイジング、抗腫瘍、腫瘍、および記憶改善特性があり、骨形成を促進することが研究で証明されています (11, 12)。 現在、肝がんの治療は有効な手段がありません。 多くの場合、手術、放射線療法、化学療法などの包括的な治療に基づいています。 化学療法は毒性や副作用が大きく、薬剤耐性を生じやすい。 伝統的な漢方薬は、効果の低い抗腫瘍毒性と副作用があります。 同時に、有機免疫を強化し、癌を予防することができます(24)
.01. 濃度の増加を伴う用量依存的な方法での HepG2 細胞の増加は、代謝、腫瘍細胞の再プログラミング、栄養獲得、および代謝経路を変更することにより、腫瘍細胞の生合成および酸化還元の必要性を満たし、腫瘍細胞が制限なく増殖することを可能にします (25 ）。 したがって、上記の方法で腫瘍細胞の増殖を制限することが、その後の実験の焦点でした。 特定の濃度の TG は、成長と増殖を有意に阻害することがわかった.01。 濃度の増加に伴う用量依存的な方法での HepG2 細胞の
イオン。 通常の状況下では、ROS レベルがわずかに上昇すると、正常細胞の増殖が促進されます。 しかし、がん細胞の ROS レベルが大幅に上昇すると、細胞死を引き起こす可能性があります (26)。 高用量の ROS は、細胞増殖の阻害、損傷、アポトーシス、さらには死を引き起こす可能性があり、これは HepG2 細胞の増殖に対する TG の阻害効果と一致していました。 また、ROS 産生は通常、癌細胞の増殖を阻害するという証拠もあります (27)。 細胞の生存または死は、ミトコンドリアの機能状態に大きく依存します(28)。 ROS は、ミトコンドリアに作用し、ミトコンドリアの損傷を引き起こす主な方法の 1 つであるため、細胞代謝の過程で避けられない生成物です。 細胞内のミトコンドリアの主な機能は、細胞の代謝と生合成にエネルギーを提供することです。正常細胞と腫瘍細胞の生存に非常に重要な ATP (29)。 ROSレベルが体内で増加し、細胞によって分解されない場合、ROSはミトコンドリア呼吸鎖複合体の活性に影響を与え(30)、したがってミトコンドリアの酸化的リン酸化に影響を与え、細胞内のATP合成を減少させます(31)。細胞内レドックスシステムの不均衡と腫瘍細胞の増殖の阻害において(32)。 実際、化学予防剤はROSのレベルを高めて毒性閾値に達し、正常細胞への毒性を最小限に抑えながら癌細胞のアポトーシスを促進することができます(33)。 結果は、ROS の相対含有量の増加が HepG2 細胞の生存率を大幅に低下させる可能性があることも確認しました。
変化する外部環境に適応するために、生物はいつでも細胞の生物学的活動を調整する必要があります。 それに対応して、生物による細胞の生物活性の調節は、細胞代謝ネットワークの調節に基づいています。 したがって、細胞のエネルギー状態は常に調節され、正常な生理学的条件下で一定範囲の動的バランスに維持されます。これが細胞エネルギー代謝の定常状態です (34)。 さらに、ミトコンドリアは、薬物誘発性肝細胞損傷の主な標的の 1 つと考えられています (35)。 同時に、研究者は、解糖と酸化的リン酸化 (OXPHOS) によって細胞のエネルギー需要を満たすことができると考えています。 例えば、低酸素効果やミトコンドリアの損傷により OXPHOS が利用できなくなると、これらの細胞株は解糖系に切り替わり、継続的な生存に十分な ATP を生成することができます (36)。
Otto Warburg (37, 38) は、酸素の存在下で、腫瘍細胞がグルコースを吸収し、それを発酵させて乳酸にするという異常な特性を示すことを観察しました。 この特徴的な好気性解糖は、十分な酸素があれば、腫瘍細胞がミトコンドリアの酸化的リン酸化の代わりにグルコース代謝に解糖を使用してより多くのATPを生成することを好むことを示しています。 これは、腫瘍細胞が急速な成長に十分なエネルギーを迅速に生成し、より多くの乳酸を放出し、酸性の微小環境を維持し、免疫監視から逃れ、容易に転移するのに役立ちます (39, 40)。 したがって、Warburg は、ミトコンドリアの呼吸障害が好気性解糖と癌の潜在的な原因であると提案しました (37, 38)。 この研究では、すべての濃度の TG がミトコンドリアの好気性呼吸の全体的なレベルを有意に阻害し、解糖機能を制限しました。これは、ミトコンドリアのエネルギー代謝の障害に直接関係している可能性があります。 ただし、メカニズムのより詳細な研究が必要です
Bax は Bcl-2 活性の主な調節因子であり、その発現レベルはアポトーシス調節に直接関連しており、Bax 発現の増加は薬剤によるアポトーシスの促進を示し、Bcl-2 の増加はアポトーシスの阻害を示します (41 ）。 さらに、カスパーゼプロテアーゼはアポトーシスに大きく影響し、その活性化は不可逆的なアポトーシス段階への細胞の進行を表します (42)。 したがって、TG で処理した HepG2 細胞では、カスパーゼ-3の活性化の程度が増加し、TG が不可逆的なアポトーシスを引き起こし、細胞増殖を防止できることを示しています。
結論として、この研究はカンカの抗腫瘍メカニズムに関する詳細な研究に重要な参考文献を持っています。 肝臓がんの臨床治療薬の原料となり、日常の食事で摂取することで効果的に腫瘍を予防できる可能性があります。
データの可用性に関する声明
この調査で提示されたデータセットは、オンライン リポジトリで見つけることができます。 リポジトリ/リポジトリの名前と受入番号は、記事/補足資料に記載されています
著者の貢献
DF：調査、原案作成、プロット分析。 S-qZ および Y-xZ: 正式な分析と視覚化。 Y-jJ: 調査。 Q-dS、WS、および Q-qC: リソースと材料のサポート。 W-jY：執筆レビュー・編集、企画監修、資金調達。 JW: レビューの執筆と編集と検証。 すべての著者が原稿の最終版を承認しました
資金調達
この作品は、中国国立自然科学基金 (32172244) と北京連合大学 (JB202101) の学術研究プロジェクトによって支えられました。
利益相反
Y-jJは内蒙古三光生物科技有限公司に採用されました。
残りの著者は、潜在的な利益相反と解釈される可能性のある商業的または金銭的関係がない状態で研究が行われたと宣言しています.
出版社のメモ
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参考文献
1. Feng D、He Y、Jiang YJ、Wang YJ、Yan WJ。 カンカンのアンチエイジング機能に関する研究の進展。 J Food Saf Qual. (2021) 12:4429–37. doi: 10.19812/j.cnki.jfsq11- 5956/ts.2021.11.018
2. Feng D、Duan H、Lv YN、Jiang YJ、Wang YJ、Yan WJ。 中国の機能性食品におけるCistanche Deserticola Maの応用。 フードサイエンス (2021) 46:76–81. doi: 10.13684/j.cnki.spkj.2021.12.012
3. Ma GZ、Chen JR、Wei TT、Wang J、Chen WS。 microRNA103a3pを転写的に抑制し、GREM2/LATS2/YAP軸を活性化することにより、肝がん細胞の移動と浸潤におけるFOXA2の役割を阻害します。 細胞工学。 (2021) 73:523– 37. doi: 10.1007/s10616-021-00475-2
4. Zheng RS、Zhang SW、Zeng HM、Wang SM、Sun KX、Chen R など。 中国におけるがんの発生率と死亡率、2016 年。J 国立がんセンター。 (2022) 2:1– 9. doi: 10.1016/j.jncc.2022.02.002
5. Sun Y、Song YY、Zhang C、Lu YZ、Zheng GH、Tian XX など AMPKシグナル経路の活性化による肝細胞癌HepG2細胞の増殖に対するセラストロールの効果とメカニズム。 中国の薬剤師。 (2021)。 24:1961– 6. doi: 10.19962/j.cnki.issn1008-049X.2021.11.001
6. Ye Y、Song Y、Zhuang J、Wang G、Ni J、Xia W. 肝細胞癌マウスモデルおよび HepG2 細胞におけるエキナコシドの抗癌効果。 J細胞生理。 (2019) 234:1880– 8. doi: 10.1002/jcp.27063
7. Li W、Zhou J、Zhang Y、Zhang J、Li X、Yan Q 他 エキナコシドは、肝臓がんにおいて miR-503-3p/TGF- 1/Smad 軸を介して抗腫瘍活性を発揮します。 癌細胞の内部。 (2021) 21:304. ドイ: 10.1186/s12935-021-01890-3
8. Zhang Y、Zhu BL、Yang XJ、Hui J、Ma Q、Yu XH。 ベルバスコシドの悪性腫瘍抑制に関する研究の進展。 Res Pract Chin Med. (2019) 33:78–82. doi: 10.13728/j.1673-6427.2019.06.018
9. Alipieva K、Korkina L、Orhan IE、Georgiev MI。 ベルバスコシド - その発生、（生）合成、および薬理学的意義のレビュー。 バイオテクノロジーアドバンス。 (2014) 32:1065–76. ドイ: 10.1016/j.biotechadv.2014.07.001
10. Peerzada KJ、Faridi AH、Sharma L、Bhardwaj SC、Satti NK、Shashi B 他 アクテオシドは、STAT-3 制御の酸化ストレスとアポトーシスを介して、実験的肝発癌の化学予防を媒介します。 環境毒性。 (2016) 31:782–98. doi: 10.1002/tox.22089
11. Qi XX、You SP、He ZX、Zhao J、Liu T. In vitro での HepG2 細胞の増殖とアポトーシスに対するカンカ フェニルエタノイド配糖体の効果。 J 新疆医科大学 (2021) 44:1041–7.
12.謝YT。 786-O 細胞のアポトーシスおよびインビトロ誘導メカニズムに対するエキナコシドの効果。 ニューヨーク: Baotou Teachers' College (2020)。
13. Han YM、Jin WM、Zeng H、Wang C、Zhang H. インビトロおよびインビボでの結腸癌 SW480 細胞の増殖、浸潤および転移に対するエキナコシドの影響。 J 広州大学 Trad Chin Med. (2020) 37:1542– 9. doi: 10.13359/j.cnki.gzxbtcm.2020.08.024
14. Hou XT、Liu T、Su DQ。 H22腫瘍担持マウスに対するCistanche Deserticola由来のフェニルエタノイド配糖体の抗腫瘍効果。 J トキシコール。 (2021) 35:231–40. doi: 10.16421/j.cnki.1002-3127.2021.03.010
15. Hou XT、Su DQ、Qi XX、Liu T. H22 担癌マウスの腫瘍細胞のオートファジーに対するカンカ属のフェニルエタノイド配糖体の効果。 J トキシコール。 (2022) 36:137–41. ドイ: 10.1155/2022/3993445
16. Hu Q、You SP、Liu T、Wang B、Liu X、Jiang YD。 Cistancheの抗肝がん効果に関する調査。 Carcinog Teratog Mutag. (2018) 30:194–9.
17. カマリアン L、ダグラス O、ジョリー CE、スノイーズ J、シミック D、モンショウワー M 他 生体エネルギー調査および薬物誘発性ミトコンドリア毒性の検出のための HepaRG 細胞の有用性。 In Vitro での毒性。 (2018) 53:136–47. 土井: 10.1016/j.tiv.2018. 08.001
18. Wang FJ、Li RY、Tu PF、Chen JP、Zeng KW、Jiang Y. カンカンカの総グリコシドは、MCAO の Nrf-2/Keap-1 経路を介して神経血管再生を誘導することにより、神経機能の回復を促進します/R ラット。 (2020) 11:236。 ドイ: 10.3389/fphar.2020.00236
19. Wang J、Zhang XX、Ni ZJ、Elam E. Thakur Kiran、Li KX 他。 miRNAオミクスに基づくヒト肝癌細胞HepG2に対するリコカルコンAの抗癌メカニズム。 Food Sci Hum Well. (2023) 12:1136–48. ドイ: 10.1016/j.fshw.2022.10.039
20. Feng D、Chang X、Jiang YJ、Guo Y、Zhao J、Zhao JYなど。 応答曲面法によるカンカの水抽出調製技術の最適化とその活性研究。 Sci Technol Food Ind. (2023) 5:1– 16. doi: 10.13386/j.issn1002-0306.2022050033
21. Ji XJ、Wang J、Ma AJ、Feng D、He Y、Yan WJ。 ヒト結腸癌DLD-1細胞のアポトーシスとエネルギー代謝に対するカイコ蛹タンパク質の影響。 Food Sci Hum Well. (2022)。 2022:1171–6. ドイ: 10.1016/j.fshw.2022.04.011
22. Zhang ZG、Wang ML、Xing S、Zhang C. Rosa rugosa のフラボノイド Thunbin ヒト肝細胞癌 HepG2 細胞の腫瘍増殖と転移を阻害する Food Sci Hum Well. (2022) 11:374–82. ドイ: 10.1016/j.fshw.2021.11.016
23. Liu X、Jiang N、Xu X、Liu C、Liu Z、Zhang Yなど。 Scheflera heptaphylla (L) におけるスペクトル効果関係、成分ノックアウト、および UPLC-MS2 法による抗ヘパトーマ化合物決定から、害とそのメカニズム。 フロントファーマコル。 (2020) 11:1342。 ドイ: 10.3389/fphar.2020.01342
24. Liu XQ、Wang SY、Cui LL、Zhou HH、Liu YH、Meng LJ など。 花：貴重な食料と薬の資源。 Food Sci Hum Well. (2023) 12:1020–52. doi: 10.1016/j.fshw.2022.10.022
25. Yin XZ、Liu ZJ、Guo Y. 細胞エネルギー代謝分析によるヒト肝細胞癌細胞に対するテトラヒドロパルマチンの影響の評価。 チンJ免疫。 (2021) 37:426–30.
26. Liu GY、Sun YZ、Zhou N、Du XM、Yang J、Guo SJ。 3,3'-OH クルクミンは、ROS を介した経路を介して HepG2 細胞のアポトーシスを引き起こします。 Ｅｕｒ Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ． (2016) 112:157–63. ドイ: 10.1016/j.ejmech.2016.02.019
27. パル LC、プラテクシャ、シン BN、パンデ V、ラオ CV. Pterospermum lanceifolium Roxb のフェノール濃縮画分。 NDEA誘発HCCラットの肝細胞癌を効率的に逆転させます。 栄養がん。 (2022) 74:1106–21. ドイ: 10.1080/01635581.2021.1922716
28. Bras M、Queenan B、Susin SA。 ミトコンドリアを介したプログラムされた細胞死: 死のさまざまなモード。 生化学（Mosc）。 （2005）。 70:231–9。 ドイ: 10.1007/s10541-005-0105-4
29. Galber C、Acosta MJ、Minervini G、Giorgio V. がんにおけるミトコンドリア ATP シンターゼの役割。 生物化学。 (2020) 401:1199–214. ドイ: 10.1515/hsz-2020-0157
30. Piantadosi CA、Zhang J. ラットにおける脳虚血後の活性酸素種のミトコンドリア生成。 脳卒中。 (1996) 27:327–31. ドイ: 10.1161/01.STR.27.2.327
31.エイブリーSV。 酸化ストレスの分子標的。 Biochem J. (2011) 434:201–10. doi: 10.1042/BJ20101695
32. Cui Z、Li S、Wang HJ、Ma J、Qin TT、Shi H 他 HepG2細胞の酸化的損傷およびエネルギー代謝に対するジヒドロアルテミシニンの効果、およびソラフェニブとの相乗効果。 Chin J Exp Trad Med Formula. (2021) 27:24–32. ドイ: 10.13422/j.cnki.syfjx.20211202
33. Hail N Jr、Cortes M、Drake EN、Spallholz JE。 がんの化学予防: 根本的な視点。 フリーラジカルバイオメッド。 (2008) 45:97–110. doi: 10.1016/j.freeradbiomed.2008.04.004
34. Jiang B、Zhao WT、Ouyang C、Wang HH、Zhang FQ、Zhao GH、他。 細胞代謝の調節ネットワーク。 J 厦門大学 (Nat Sci)。 (2022) 61:346–64.
35. Dragovic S、Vermeulen NP、Gerets HH、Hewitt PG、Ingelman-Sundberg M、Park BK、他。 ヒトにおける薬物誘発性肝障害のメカニズムに基づく統合予測に使用するためのトレーニング化合物の証拠に基づく選択。 アーチトキシコール。 (2016) 90:2979–3003. doi: 10.1007/s00204-016-1845-1
36. Diaz-Ruiz R、Rigoulet M、Devin A. Warburg および Crabtree 効果: 癌細胞のエネルギー代謝および酵母のグルコース抑制の起源について。 Biochim Biophys Acta。 (2011) 1807:568–76. ドイ: 10.1016/j.bbabio.2010.08.010
37. Warburg O. がん細胞の呼吸障害について。 化学。 (1956) 124:269–70. doi: 10.1126/science.124.3215.269
38. Warburg O. がん細胞の起源について。 化学。 (1956) 123:309– 14. doi: 10.1126/science.123.3191.309
39. Zhang X、Fryknäs M、Hernlund E、Fayad W、De Milito A、Olofsson MH、他。 代謝が損なわれた微小環境で腫瘍細胞を標的とするための戦略としてのミトコンドリア機能障害の誘導。 ナット・コミュ。 (2014) 5:3295。 ドイ: 10.1038/comms 4295
40. Rios Garcia M、Steinbauer B、Srivastava K、Singhal M、Mattijssen F、Maida A、他。 アセチル CoA カルボキシラーゼ 1- 依存性タンパク質アセチル化は、乳がんの転移と再発を制御します。 細胞代謝。 (2017) 26:842–55.e5. ドイ: 10.1016/j.cmet.2017.09.018
41. ヤン E、ザ J、ジョッカー J、ボイシ LH、トンプソン CB、コースマイヤー SJ。 Bcl-XL および Bcl-2 のヘテロ二量体パートナーである Bad は、Bax を置換し、細胞死を促進します。 細胞。 (1995) 80:285–91. ドイ: 10.1016/0092-8674(95)90411-5
42.梁K、曹BZ。 ミトコンドリア制御の細胞アポトーシスの進行。 Biomed Eng Clin Med. (2014) 18:501–5. ドイ: 10.13339/j.cnki. sc.2014.05.049
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