メタボロミクスに基づいた腎臓ヤン欠乏症のラットの生殖機能障害の治療におけるサイスタンチャーズハーバ抽出物の有効性とメカニズム

3.2腎臓ヤン欠乏症のラットの一般的な状態に対するサイスンチェ抽出物の効果

実験の前に、各グループのネズミは元気で、通常の髪と普通の飲食がありました。実験中、正常なグループラットで異常は見つかりませんでしたが、摂食時間の延長とともに体重が着実に増加しました。アデニンのモデリング時間が長くなると、モデルグループラットの髪が落ちて粗くなり、スピリットが低く、反応が遅く、背中が丸くなり、尿量が増加し、体重が大幅に低下し、直腸温度が大幅に低下しました（p <{0}}。001）。サイスンチェ抽出物とLC介入治療上記を軽減できますさまざまな程度の症状、その中に直腸温度が大幅に調整された（p <{0。001）、図1を参照してください。

図1腎臓ヤン欠乏症のラットの体重と直腸温度に対するCistanches Herba Extractの影響（n {=10}（

3.3腎臓ヤン欠乏症のラットの内臓脳比係数に対するサイスンチェ抽出物の効果

正常群と比較して、モデルグループの精巣と精巣上体の内臓脳比係数は大幅に減少しました（p <{0。0 0 1）;モデルグループと比較して、サイスンチェ抽出物の各用量群の内臓と精巣の内臓脳比係数は有意に増加しました（p <{0。0 5、p <0。 LCグループも有意に増加しました（P <0.01、P <0.001）。図2を参照してください。

表2腎臓ヤン欠乏症のラットの精子運動性パラメーターに対するサイスンチェスハーバ抽出物の効果（𝑥̅±S、n =10）

3.5腎臓ヤン欠乏症のラットの精子数、運動性、変形速度に対するサイスンチェ抽出物の影響

正常な精子には、鎌状の頭、細い体、自然に湾曲した尾、滑らかな全体的な形があります。他の変形した精子の形態を図3に示します。正常群と比較して、モデルグループのラットの精子密度と精子の運動性が大幅に減少しました（P<0.01, P<0.001), and the sperm deformity rate was significantly increased (P<0.001); compared with the model group, the sperm density and motility of the rats in each dose group of Cistanche extract and the LC group were significantly increased (P<0.05, P<0.01, P<0.001), and the sperm deformity rate was significantly reduced (P<0.001), as shown in Figure 4.

3.6腎臓ヤン欠乏症のラットにおける精巣および精巣上体組織の形態に対するサイスンチェ抽出物の効果
正常群のラットの精巣セミニン細管は無傷で、すべてのレベルと透明な層で精子形成細胞の定期的な配置がありました。豊富な精子細胞と細長い精子細胞がルーメンに見えました。正常群と比較して、モデル群のラットの病変性精細管の割合は大幅に増加しました（P<0.001), which was manifested as irregular structure of seminiferous tubules, thinning of tubular walls, enlargement of lumen, increased number of exfoliated cell blocks in the lumen, decreased number of linear sperm, and disordered arrangement of spermatogenic cells. Compared with the model group, the proportion of testicular seminiferous tubule lesions in rats in all dose groups of Cistanche extract and LC group was significantly reduced (P<0.05, P<0.01), among which the low dose group of Cistanche extract had better improvement effect, which was equivalent to the LC group, as shown in Figure 5.

性機能を改善するために、Cistancheの詳細をご覧ください

正常群のラットの精巣上体尿細管は無傷で、上皮細胞はきちんと配置され、均等に分布した精子が観察されました。モデル群のラットの精巣上体尿細管は腫れ、上皮細胞は無秩序に配置され、内腔の精子の数は大幅に減少しました。モデルグループと比較して、サイスンチェ抽出群のラットの精巣上体性ルーメン病変とLCグループは大幅に改善され、上皮細胞はしっかりときちんと配置され、図6に示すように、内腔の正常な精子の数が増加し、均等に分布しました。

4議論

腎臓ヤン欠乏症症候群は、伝統的な漢方薬の症候群タイプであり、腎臓ヤンの欠乏と体をウォームアップできないことを指します。現代医学は、腎臓ヤン欠乏症が視床下部 - 下垂体標的腺（主に副腎、生殖腺および甲状腺）の軸の機能障害に関連していると考えています[11]。アデニンはラットのHPG軸に作用し、その機能障害を引き起こし、それにより体のホルモンレベルの恒常性を妨害し、腎臓ヤン欠乏症に似た症状を示します。 Tレベルは、このモデルの検出指標の1つとして使用できます[12]。腎臓ヤン欠乏症の他の一般的な診断基準は、モデルラットに適用されます。つまり、体温の低下、体重減少、丸い髪、毛の体積の増加、ゆるい便などに適用されます[9,13]。 Cistanche Destericolaは、腎臓ヤンを調整するための伝統的な漢方薬の処方箋で最も一般的に使用される薬物の1つです。その主要な活性物質であるフェニルエタノイドグリコシドは、HPG軸の恒常性と抗疲労を調節する機能があることも報告されています[14]。この研究では、アデニン欠乏症のラットを腎臓ヤン欠乏症のモデルとして使用しました。腎臓ヤン欠乏症のラットに対するサイスチャ脱砂漠抽出物の改善効果は、ラットの一般的な症状とHPG軸に関連するホルモンの変化から評価されました。結果は、すべての用量のサイスンチェデザイトコラ抽出物が、アデニンによって引き起こされるラットの腎臓ヤン欠乏症の症状を改善し、アデニンのHPG軸阻害効果を減らすことができることを示しました。

オリゴスパーミアとアセン症は、伝統的な漢方薬における「子供のいない」、「不妊症」、「冷たい精子」、「精子の閉塞」のカテゴリに分類できます。主な病因には、腎臓ヤン欠乏症、湿った熱、陰の欠乏症、火の多動性、QIの停滞、血液停滞が含まれます。腎臓ヤン欠乏症は精子宮殿を温めることができず、寒い精子と気、したがって子供のいないことをもたらします[17]。腎臓ヤン欠乏症と不妊症に対する温暖化と調性の腎臓ヤン処方の有効性も広く報告されています[18]。この実験の結果は、すべての用量でのシスタンチェデザイトコラの抽出物、腎臓ヤンを爽快にするための伝統的な漢方薬は、アデニンによって引き起こされる脳に対する精巣および精巣上体臓器の比の減少を大幅に緩和できることを示しました。精子ダイナミクスパラメーター分析の結果は、すべての用量でのシスタンチェデザイトコラの抽出物がVCLやVAPを含む精子ダイナミクスパラメーターを大幅に改善し、精子の運動性と精子濃度を大幅に増加させることができることを示しました。精子蛍光の結果は、シスチャンチェデザイトコラの抽出物がアデニンによって引き起こされる精子運動の減少を大幅に改善できることを示しました。彼の染色の結果は、シスチャンチェ・デザイトコラの抽出物がアデニンによって引き起こされる精子の変形を大幅に緩和し、アデニンによって引き起こされる精巣と精巣上体の形態学的変化を緩和できることを示した。 ELISAの結果は、Cistanche Deserticolaの抽出物が精巣の精子形成に必要なTの血清レベルを大幅に調整し、Cistanche Destericolaの低用量抽出物がより良い結果を示したことを示しました。上記の結果は、Cistanche Destericicolaの抽出物が、腎臓ヤン欠乏によるラットの生殖損傷に改善された影響を及ぼしていることを示しています。

LCは、L-カルニチンとしても知られており、人体の必須エネルギー代謝物質です。通常、男性の生殖系には2つの形式で存在します：遊離とアセチル化。脂肪酸の酸化を促進することにより、精巣上体の精子の動きと成熟のエネルギーを提供し、男性の生殖系疾患の治療に広く使用されています[19]。研究により、LCはグルタミンによって引き起こされるHPG軸障害を緩和し、ホルモンと卵胞刺激ホルモンの黄体化のレベルを調節し、シトクロムP450ファミリー11サブファミリーAメンバー1（CYP11A1）、ステロジューテ酸アシュートの誘発性タンパスなどの遺伝子の発現レベルを調節することにより、Tレベルを増加させることができることが示されています。合成[20]。さらに、LCは、静脈瘤によって引き起こされる精巣で過剰な反応性酸素種を除去し、酸化ストレス損傷を減らし、したがって精巣の精子形成を回復することができます[21]。この実験では、LCは陽性対照として選択されました。結果は、LCが以前の研究結果と一致していたアデニンによって引き起こされるラットの生殖損傷を効果的に緩和できることを示しました。また、サイスンチェデザイトコラエキスは、LCに匹敵する治療効果を示しました。

メタボロミクスは、体全体の小分子代謝産物を定性的かつ定量的に分析し、多次元統計分析のための複数のデータベースの情報統合を組み合わせることができます。 LC-MSテクノロジーに基づいて、この実験は、正常なグループ、モデルグループ、および低用量のシスタンチェ砂漠産物グループのラットの血清サンプルに関するメタボロミクス分析を実施し、腎臓ヤンゲリ性のあるラットのアデニンによって引き起こされる生殖による介入に介入する介入において、シスタンチーデザイトコラの代謝メカニズムを探求することを目指しています。結果は、合計22の関連する微分代謝産物と3つの代謝経路がスクリーニングされたことを示しました。 Cistanche Deserticola Extractは、主に13- hpode、20- carboxy-arachidonic酸（20- cooh-aa）のレベルに影響します。脂質代謝、パントテン酸、コエンザイムA生合成などの代謝経路により、生殖保護効果が発生します。

脂質は、シグナル伝達、エネルギー生産、細胞恒常性の維持において重要な役割を果たします[24]。脂質分子は、脂肪酸、グリセリ脂質、リン脂質、スフィンゴ脂質、ステロール、前アルコール、グリコリピド、ポリケチドの構造に基づいて、構造に基づいて8つのカテゴリに分けることができます。脂肪酸代謝の障害は、異常な精子容量[25]および慢性腎臓損傷[26]と密接に関連しています。 13- hpodeおよび20- COOH-AAは、それぞれリノール酸とアラキドン酸の代謝物であり、脂質過酸化反応に関与しています。レベルが上昇すると、体が酸化ストレスに対してより敏感であることを示します。これは、活性酸素種の過剰な産生につながる可能性があり、それが雄の生殖機能の低下につながる可能性があります[27]。 LPCは、ヒトの血液中で最も豊富なタイプのリソグリセロリン脂質であり、精巣細胞に酸化ストレスを誘発し、生殖障害を引き起こす可能性があります[28]。一部の研究者は、LPC（o {-18：{{1 {11}}}}/0：0）が、ペルオキシソームの増殖因子の発現を活性化することにより、腎組織細胞のストレスとアポトーシスを誘導することを発見しました。腎機能劣化[29]。これは、脂質過酸化レベルをダウンレギュレートし、酸化ストレスを阻害することにより、腎臓ヤン欠乏症のラットにおいて、Cistanche Deserticola抽出物が生殖保護的役割を果たす可能性があることを示唆しています。パントテン酸は、テストステロン分泌と精子の運動性に重要な影響を及ぼします。その代謝産物パンテチンは、コエンザイムAの合成のための原料であり、エネルギー代謝と脂肪酸代謝の調節にさらに関与しています[30]。 Cistanche Deserticola Extractは、パンテチンのレベルを調整することにより、腎臓ヤン欠乏症のラットの生殖系への酸化ストレスの損傷を促進し、酸化ストレスの損傷を減らす可能性があります。これは、サイスンチェデザイトコラエキスが脂質代謝、パントテン酸およびコエンザイムAの生合成を調節することにより抗酸化的役割を果たし、したがって腎臓ヤン欠乏症のラットの生殖機能を保護することを示しています。
さらに、Leydig細胞はT産生の主要部位であり、T前駆体妊娠性の形成は、ライディグ細胞のミトコンドリア機能に依存します。研究では、ライディッヒ細胞における活性酸素種の過度の蓄積がT合成障害に関連していることが示されています。過剰な反応性酸素種はミトコンドリアの損傷を誘発し、アデノシン三リン酸（ATP）とアデノシンシクロリン酸（CAMP）合成の阻害をもたらし、それによりT合成関連酵素の発現を阻害し、TレベルのAの減少を引き起こす[31]。この実験の結果は、シスチャンチェ砂漠層抽出物が血清Tレベルのアデニン誘発性の減少を大幅に逆転させることを示しました。メタボロミクス分析の結果は、文献で報告されているものと類似していました。つまり、シスタンチのデザイトコラ抽出物は、ライディグ細胞の酸化的損傷を緩和することによりT合成を促進する可能性があります。

Cistanche Destericicola Extractの含有量決定の結果は、エキナコシド、ベルバスコシド、サリドロシド、ベタイン、およびシスチャンサイドAが潜在的な有効成分である可能性があることを示しました。以前の研究では、エキナコシドが抗酸化酵素とマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（MAPK）シグナル伝達関連因子を活性化することにより、精巣を酸化ストレス損傷から保護できることが示されています[32]。サリドロシドは、体の抗酸化因子を上方制御して、酸化ストレスによって引き起こされる血液テスティスの障壁の損傷に対抗し、それによって精子形成を促進する可能性があります[33]。ベルバスコシドは、過酸化水素処理されたTM3細胞の増殖活性を大幅に促進し、酸化ストレス損傷から部分的に保護することができます[34]。ベタインは、スーパーオキシドジスムターゼ1、グルタチオンペルオキシダーゼ1、およびカタラーゼを含む鉛曝露マウスの精巣における抗酸化関連遺伝子の発現レベルを上方制御し、精巣ジョンソンスコアを大幅に改善することができます[35]。 Cistancheside Aは、低酸素によって誘導され、細胞アポトーシスを減少させる精子形成症における反応性酸素種の異常な増加を減らすことも報告されています[36]。これらはすべて、エキナコシド、ベルバスコシド、サリドロシド、ベタイン、およびシスチャンサイドAが、アデニンによって誘発されたラットの腎臓ヤン欠乏症の症状を緩和するための重要な物質的基盤である可能性があることを示唆しています。要約すると、サイスンチェ抽出物は、アデニンによって誘発されたラットの腎臓ヤン欠乏症の症状を緩和し、精巣と精巣上体の病理学的損傷を緩和し、損傷したHPG軸機能を回復し、精子の品質の低下を改善し、したがって、腎臓ヤン欠乏症のラットの生殖機能を改善します。その作用のメカニズムは、脂質代謝の調節、パントテン酸およびコーエンザイムAなどの生合成に関連している可能性があります。