エピガロカテキン‑3‑ガレートは、慢性高地低酸素環境への曝露によって誘発される海馬の鉄蓄積とアポトーシスを改善し、神経再生と記憶/認知機能を促進します

抽象的な

私たちは、自然の高地低酸素（HAH）環境における慢性曝露の動物モデルにおけるエピガロカテキンガレート（EGCG）の保護効果と潜在的な治療メカニズムを調査することを目的としていました。{0} 行動の変化はモリス水迷路テストで評価されました。 海馬における鉄の蓄積は、DAB 増強 Perl 染色、MRI、qPCR、および比色分析をそれぞれ使用して検出されました。 酸化ストレス (マロンジアルデヒド、MDA)、アポトーシス (カスパーゼ-3)、および神経再生 (脳由来神経栄養因子、BDNF) は、ELISA およびウェスタンブロッティングを使用して検出されました。 神経の超微細構造の変化は透過型電子顕微鏡 (TEM) によって評価されました。

アポトーシスと記憶の関係は、常に神経科学者の注目のトピックの 1 つです。 アポトーシスは、一連の内部制御機構による秩序ある細胞死のプロセスを指します。 通常の状況では、細胞のアポトーシスは人体に害を及ぼすことはありませんが、健康の維持に役立ちます。 しかし、特定の病理学的条件下では、制御されていないアポトーシスがさまざまな病気の発生につながる可能性があります。

同時に、記憶は細胞のアポトーシスと密接に関連していることも示されています。 いくつかの研究は、適切なアポトーシスが記憶の形成と固定化において重要な役割を果たすことを示唆しています。 この関係は単純なルールに従っています。つまり、一部の不要なニューロンまたは期限切れのニューロンはアポトーシスによって除去され、新しいニューロンの形成と記憶域のためにより多くのスペースとリソースが作成されます。 さらに、適切なアポトーシスは、ニューロン内の有毒タンパク質を除去することにより、ニューロンを損傷から保護することもできます。

ただし、アポトーシスが過剰または不十分な場合、記憶の正常な機能に影響を与えます。 過剰なアポトーシスはニューロンの過剰な損失を引き起こし、記憶喪失につながる可能性があります。 一方で、不要なニューロンや細胞を除去するのに十分なアポトーシスが存在しない場合、これらの細胞は限られたスペースとリソースを過剰に消費することになり、これも記憶力の低下につながる可能性があります。 したがって、正常なアポトーシスの程度を維持しながら、過剰または不十分なアポトーシスを回避する必要があります。

アポトーシスは、多くの影響因子を伴う複雑な生物学的プロセスです。 記憶との関係は完全には理解されていませんが、この現象により、神経系をより深く理解できるようになり、記憶力を向上させるための新たな道が開かれます。 要約すると、適切なアポトーシスを習得することは、記憶の健全性にとって非常に重要です。 記憶力を向上させる必要があることがわかります。 カンクイは記憶力を大幅に向上させることができます。カンクンは多くのユニークな効果を持つ伝統的な漢方薬の素材であり、そのうちの 1 つは記憶力の向上です。 ひき肉の効能は、酸、多糖類、フラボノイドなどを含む、ひき肉に含まれるさまざまな有効成分によってもたらされます。これらの成分は、さまざまな方法で脳の健康を促進します。

クリックして脳機能を改善する方法を知る

その結果、HAH環境にさらされるとラットの学習能力と記憶能力が低下することが示されました。 その後、鉄の蓄積、鉄代謝の機能不全、BDNF の減少、MDA とカスパーゼの上方制御が起こりました-3。 TEM により、ニューロンとミトコンドリアの超微細構造変化が確認されました。 EGCG は、HAH 誘発性認知障害、鉄沈着、酸化ストレス、アポトーシスを軽減し、慢性 HAH 媒介神経損傷に対する神経再生を促進しました。

キーワード
高地、低酸素、定量的感受性マッピング、鉄の蓄積、薬物介入。

導入
高地 (3000 m 以上) の地域での人間の活動は、最近大幅に増加しています [1]。 世界中の 1 億 4,000 万人が高地 [2、3] や観光や境界線の防衛を目的として定住している人々のうち、5 ～ 10% が過剰な赤血球増加症と重度の低酸素血症を特徴とする慢性高山病を発症するリスクにさらされています [4、5]。 。 脳は、最も酸素を消費する臓器の 1 つであるため、低酸素状態に敏感です [6]。 さらに、高地低酸素症 (HAH) は、海馬の主要なニューロンの構造的完全性とミトコンドリアの形態を著しく乱します [7]。 HAH 環境への慢性的な曝露によって誘発される症状には、頭痛、めまい、睡眠障害、疲労、精神集中力の欠如などがあります [5、8、9]。 さらに、HAH は空間学習、記憶、気分などの神経認知機能障害を引き起こす可能性もあります [10]。 したがって、HAH によって引き起こされる神経損傷の治療は、高地医療の分野で注目を集めています [11、12]。

HAH 誘発性脳損傷の予防に適した製剤を見つけることは非常に重要です。 緑茶葉には、(−)-エピガロカテキン-3-ガレート(EGCG) (50〜60%)、(−)-エピガロカテキン(EGC) (15〜20%)、(−)-エピカテキン-3-が含まれています没食子酸塩 (ECG) (10 ～ 15%) および (-)-エピカテキン (EC) (5 ～ 10%) [13、14]。 EGCG は、ウーロン茶 (100 g あたり 3.4 g) や紅茶葉 (100 g あたり 1.1 g) よりも緑茶葉 (100 g あたり 7.1 g) に豊富に含まれていると報告されています [15]。その基本構造には 8 つのヒドロキシル基と 2 つのトリフェノール基が含まれています [16、17]。 さらに、動物実験では血液脳関門を通過して脳実質に到達できることが実証されています[18、19]。 金属キレート化特性、酸化ストレスの抑制、炎症、アポトーシス、神経再生の促進など、EGCG の神経保護メカニズムに関するいくつかの報告がある [20-22]。 張ら。 は、多くの疾患に対する EGCG の効果を検討し、EGCG がオートファジーを誘導することによって神経細胞を保護することを指摘しました。 彼らはまた、EGCG の抗炎症特性と抗酸化特性が中枢神経系疾患における保護的役割に不可欠であると要約しました [23]。

しかし、慢性 HAH 媒介神経損傷に対する EGCG の神経保護効果を報告した研究はほとんどありません。 このギャップを埋めるために、この研究では、EGCGの潜在的な治療メカニズムを検証するために、自然のHAH環境への慢性曝露のラットモデルを確立しました。 さらに、我々は、脳の鉄含有量を定量化するために、磁場の非局所的影響を克服し、生体内組織のコントラスト機構を提供できる、7 TのグラディエントエコーMRIによる定量的磁化率マッピング(QSM)を利用した[24]。
材料と方法

動物

成都大朔実験動物有限公司から体重 130 ～ 150 g の雄の Sprague-Dawley ラットを合計 120 匹入手しました。これらのラットは、18 ～ 22 度の動物舎内で、12 時間の明暗サイクルで餌と水を与えて飼育されました。自由に提供されました。 動物に対して行われたすべての手順は、西中国病院の動物管理使用委員会によって承認されました。

研究デザイン

ラットはランダム化され、4 つのグループに分けられました。 低酸素群とh-EGCG群のラットには餌を与え、中国玉樹の標高4500メートルで飼育した。 通常高度群（n 群）および n-EGCG 群のラットは、中国成都の標高 500 m で飼育されました。 これらのラットには通常の餌を1か月間与え、その後さまざまな治療を行った。 （１）低酸素群：ラットに生理食塩水（０．９％）を１ヶ月間毎日腹腔内注射した。 （２）ｈ−ＥＧＣＧグループ：５０ｍｇ／ｋｇのＥＧＣＧ（純度、９８％；Ｃａｓ、｛｛１１｝｝；Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ；４℃で保存）を１か月間、ラットに毎日腹腔内注射した。 （３）ｎ群：ラットに生理食塩水（０．９％）を１ヶ月間毎日腹腔内注射した。 （４）ｎ−ＥＧＣＧ群：ラットに５０ｍｇ／ｋｇのＥＧＣＧを１ヶ月間毎日腹腔内注射した。

EGCG (5 mg/mL) を 1:1 の比率で水に溶解しました。 ラットに注射される体積はラットの体重によって決定され、最終注射量は50 mg/kgに達した。 その処理後、数匹のラットをモリス水迷路アッセイ (各グループ n=10) および脳 MRI 解析 (各グループ n=10) にそれぞれ使用しました。 他のラット数匹を屠殺し、DAB増強Perls染色（各グループn=3）、ウェスタンブロッティング、生化学的評価、およびqPCRアッセイ（各グループn=6）のために脳組織を収集しました。 、および透過型電子顕微鏡アッセイ (各グループの n=1)。

行動実験

モリス水迷路 (MWM) は、ラットの学習と記憶を分析するために前述のように実行されました [25]。ラットが飼育されていたのと同じ場所で実行されました。 MWM は、プラットフォーム (直径 10 cm、深さ 30 cm) の上部から 1 cm 上のレベルまで水を満たした円形のスチール製プール (直径 160 cm、高さ 60 cm、深さ 31 cm) で構成されていました。 ）。 水温を２２±２度に維持し、鮮やかな黒色のインクで不透明にした。 プラットフォームは、連続4日間のトレーニング中に設定された4つの象限のうちの1つに固定されました。 実験はラットがプラットフォームに到達した時点で終了した。 逃走潜時を記録した。 ラットが 60 秒以内にプラットフォームに到達できなかった場合は、ラットを手動でプラットフォームまで誘導し、15 秒間その上に留まらせました。 ５日目に、台を取り外した後、ラットは元の台の反対側の四分円に入った。 次に、60 秒以内にホームを通過した回数と移動経路が記録されました。

MRIプロトコル

QSM は、以前の研究 [26] で報告されている MRI によって評価されました。MRI は 7 テスラ スキャナー (BioSpec 70/30、Bruker、ドイツ) で実行されました。 QSM には 3 次元 (3D) マルチエコー グラディエント リコール エコー (GRE) シーケンスが利用されました。 実験パラメータは次のように設定されました:繰り返し時間(TR)=60 ms、fip角度=15度、スライス厚さ=23 mm、取得マトリックスサイズ=256×256、フィールド視野（FOV）=32 mm×32 mm、最初のエコー時間（TE1）=5 ms、エコー間隔（ΔTE）=5.77 ms、エコー数{{19 }}、帯域幅=50 kHz。 振幅画像と位相画像の両方が QSM 再構成のために保存されました。 MATLAB R2014a (The Math Works、マサチューセッツ州ナティック) で実行された QSM マッピング アルゴリズムには、ラップされた位相のアンラップ、バックグラウンド フィールドの削除、組織フィールドからの感受性マップの生成という 3 つのステップがありました。

組織の準備

各グループのラットに、深い麻酔のために 10% 抱水クロラール (1.5 mg/kg) を腹腔内投与し、次に蠕動ポンプ (BT100-2 J、LongerPump、中国、上海）。 DAB で強化した Perls 染色では、脳を解剖し、2.5% パラホルムアルデヒド中で 4 度で一晩後固定しました。 翌日、染色のために海馬から冠状切片を採取した。 免疫組織化学以外の他の測定のために、海馬を氷上で迅速に剥離し、80度で保存した。

DAB 強化 Perls 染色

DAB で強化された Perls 染色は、細胞の鉄蓄積を検出するために使用されました [27]。 脳組織の切片を蒸留水に 3 分間浸漬し、次に新たに調製した Perls 溶液 (2% フェロシアン化カリウム/2% 塩酸) で 30 分間インキュベートし、続いてリン酸緩衝生理食塩水 (PBS) でインキュベートしました。洗います。 内因性ペルオキシダーゼ活性を、メタノール中の0.3%過酸化水素溶液で15分間ブロックし、その後PBSで3回洗浄した。 シグナルは、3,{13}}ジアミノベンジジン (DAB) 中で 3 分間インキュベートすることによって発生させ、ヘマトキシリン (Sigma-Aldrich) を対比染色に使用しました。

生化学的評価

海馬を分離し、均一に撹拌して10%のホモジネートを得た後、30、000〜40、000 RPMで10分間遠心分離して上清を取得し、比色キットで海馬の鉄を推定しました。 (E-BCK139S、Elabscience、中国武漢)、およびマロンジアルデヒド (MDA) は、ELISA キット (Elabscience、中国武漢) を使用して上清から検出されました。

ウェスタンブロッティング

タンパク質濃度は、ビシンコニン酸アッセイ (BCA、Biosharp、北京、中国) キットを使用して測定しました。 タンパク質を 12% SDS-PAGE で分離し、ポリフッ化ビニリデン (PVDF) 膜に転写しました。 後者は、緩衝液で希釈した5%脱脂粉乳中で室温で2時間ブロックし、ウサギ抗切断カスパーゼ-3(1:1000)を含む一次抗体とともに4℃で一晩インキュベートしました。 、Affinity Biosciences、江蘇省、中国）、ウサギ抗脳由来神経栄養因子（BDNF）（1:1000、Affinity Biosciences、江蘇省、中国）およびウサギ抗アクチン（1:5000、Affinity Biosciences、江蘇省、中国）。 翌日、メンブレンを TBST で各回 5 分間 3 回洗浄し、HRP 標識ヤギ抗ウサギ二次抗体溶液 (1:10,000、Servicebio、武漢、中国) と 1 時間インキュベートし、洗浄しました。 5分間を3回。

定量的リアルタイム PCR

Animal Total RNA Isolation Kit (Foregene)、5×All-In-One MasterMix (AccuRT Genomic DNA Removal kit 付き) (abm)、および EvaGreen Express2×qPCR MasterMix-No Dye (abm) を製造業者の指示に従って使用しました。 プライマーの特定のペアは次のとおりです: Fpn、フォワード プライマー、5'-CACCACAGGATATGCTTACAC TCAGG-3'。 リバースプライマー、5’-GAGAACAGACCAGTC CGAACAAGG-3’; b-アクチン、フォワードプライマー、5’-TGTCAC CAACTGGGACGATA-3’; リバースプライマー: 5’-GGGGTG TTGAAGGTCTCAAA-3’。 各サンプルの Fpn mRNA レベルは、β-アクチン mRNA のレベルに対して正規化されました。

透過型電子顕微鏡 (TEM)

海馬を 2.5% グルタルアルデヒド電子顕微鏡固定液で後固定し、濃度を増加させたアセトン溶液で脱水し、Epox 812 で包埋しました。その後、切片を酢酸ウラニルとクエン酸鉛で染色しました。 次に、海馬の CA3 領域の超微細構造画像を、JEM-1400- FLASH (JEOL、東京、日本) を備えた透過型電子顕微鏡 (TEM) で撮影しました。

統計的手法

データは平均標準偏差 (SD) として表示されます。 パラメトリック検定条件を満たす変数は、ウェルチの t 検定、一元配置または二元配置の反復測定分散分析 (ANOVA)、その後にテューキーの多重比較検定を使用して評価されました。 パラメトリック検定条件を満たさない変数は、マン・ホイットニー U 検定、クラスカル・ウォリス検定、またはウェルチおよびブラウン・フォーサイス分散分析を使用して評価されました。 Pの値<0.05 was considered statistically significant. Statistical analysis and figures were obtained by GraphPad Prism Version 9.0 (GraphPad Software, CA, USA).

結果

慢性HAHに曝露されたラットの学習と記憶に対するEGCGの影響

EGCG が慢性 HAH に曝露されたラットの空間学習および記憶能力に影響を与えるかどうかを検証するために、MWM テストが実行されました。 図 1A に示すように、低酸素グループによるプラットホーム横断回数は大幅に減少しました (P< 0.001, vs. the n group). The treatment of EGCG did not affect the number of crossings of rats in either the normal altitude group (n group vs. n-EGCG group, P>{{0}}.05) または HAH グループ (低酸素グループ vs. h-EGCG グループ、P > 0.05)。 次に、ラットが隠れたプラットフォームに到達するまでにかかる時間として逃走潜時を計算しました (図 1B)。 結果は、訓練の 2 日目から 4 日目に、低酸素グループのラットの逃避潜時が大幅に増加したことを示しました (すべての P 値)<0.01, vs. the n group). Moreover, the h-EGCG group showed reduced escape latency than that in the hypoxia group (all P values<0.05). Also, the swimming speed and distance in MWM were measured. No significant difference was found among these four groups at different time points (All P values>0.05、図 1C)。 すると、低酸素群のラットは、2日目と3日目にn群に比べて遊泳速度が低下したことがわかりました（いずれもP値）<0.01, Fig. 1D). Also, the swimming speed of rats in h-EGCG group was higher than that in hypoxia group (all P values<0.05, Fig. 1D).

DAB 強化 Perls 染色

8週間の慢性HAH曝露後、n群と比較して、脳の海馬のCA1およびCA3領域で鉄分が有意に増加した（すべてのP値）<0.01). After EGCG intervention, iron accumulation in CA3 and CA1 of the hippocampus was reduced compared to that of the hypoxia group (P<0.0001, P<0.001, respectively; Fig. 2).

海馬領域における磁化率の変化

海馬の感受性値は、n グループの感受性値と比較して、HAH 曝露後に有意に増加しました (P<0.0001, Fig. 3A). After EGCG intervention, the values decreased compared to those of the hypoxia group (P<0. 0001, Fig. 3A).

海馬の酸化ストレス、鉄、およびFpnに対するEGCGの影響
n グループと比較して、低酸素グループの MDA と鉄含量は上昇していました (P<0.05, Fig. 3B, C). EGCG treatment reduced the levels of MDA and iron, indicating that alleviation of oxidative stress may facilitate EGCG to play a protective role in chronic HAH-induced brain injury in rats. To understand the mechanisms by which brain iron contents were changed by HAH, we further examined the mRNA expression of hippocampal Fpn and found that the Fpn decreased in the hypoxia group and increased in the h-EGCG group (P < 0.01, P < 0.05, respectively, Fig. 3D).

ウェスタンブロッティングの結果

私たちは、カスパーゼ{{0}}およびBDNFレベルに対するEGCGの影響を評価しました。 ウエスタンブロッティング（WB）分析により、低酸素群の海馬ではn群よりもカスパーゼ-3の発現が高く、BDNFの発現が低いことが示されました（すべてのP値<0.0001、図4）。 さらに、EGCG 処理はカスパーゼ-3 のレベルを低下させ、BDNF のレベルを増加させました（すべての P 値<0.0001, Fig. 4).

神経超微細構造の変化

2 か月の慢性 HAH 曝露後、低酸素群の海馬 CA3 のミトコンドリアは、隆起の減少または破損により腫れました。 さらに、低酸素群のラットでは、核クロマチンの凝縮、核の縮小、高度の小胞体の膨張、リソソームの増加、電子密度の増加が見られました。 EGCGによる治療後、ミトコンドリアの膨張、ミトコンドリア結晶の溶解、および電子密度は、低酸素グループのものと比較して顕著に減少しました（図5）。

議論

本研究では、EGCGによる治療が低酸素群ラットの学習能力、記憶能力、空間探索能力を大幅に改善し、HAH環境への慢性曝露によって誘発される海馬神経損傷を軽減することを発見した。 さらに、EGCG治療後にすべての指標が大幅に改善したにもかかわらず、これらの指標が通常の低酸素レベルに戻ることはほとんどないこともわかりました。

以前の研究では、EGCG がさまざまな種類の学習および記憶障害モデルに何らかの影響を与えることがわかっています [28、29]。 サファールら。 は、EGCGがモルヒネ治療したラットの記憶を改善できることを発見した[30]。 彼らの結果と一致して、我々の研究では、HAHに慢性的に曝露されたラットに50 mg/kgのEGCGを毎日投与した後、被験者の学習能力、記憶能力、空間探索能力が改善され、EGCGが学習障害と記憶障害を改善する可能性があることが示唆された。高地。

脳内の鉄の過剰産生は酸化損傷の一因となるため、神経毒性効果があることが多くの研究で示されています[31]。 この研究では、鉄の蓄積は、MRI、免疫組織化学染色、および生化学的評価によって検出されました。 さらに、哺乳類細胞における唯一既知の複数膜貫通鉄輸送タンパク質である FPN を PCR で評価しました。 感受性値、DAB 陽性細胞は Perls 染色を増強し、海馬の鉄含量は低酸素群で増加し、h-EGCG 群で減少したが、FPN 発現は逆の傾向を示した。 したがって、HAH 誘発性の鉄蓄積は、FPN 発現の低下による鉄流出の阻害によって起こる可能性があると結論付けました。

MDA は脂質過酸化の最終生成物であり [32、33]、過酸化の指標として使用できます。 以前の研究では、高度が上昇すると酸化ストレスが増加する可能性があることが示されています[34]。 私たちの研究では、高地では MDA 濃度が大幅に増加することも明らかになりました。 さらに、カスパーゼ-3とBDNFの発現を分析しました。 カスパーゼ-3は、末端切断酵素とアポトーシスの最も重要なイニシエーターおよび実行者である[35]一方、BDNFはニューロンの生存と分化を制御し、シナプス伝達を強化できるニューロトロフィンとして[36]、再生を促進する。 リンら。 は、低酸素がカスパーゼ-3のレベルを増加させ、海馬ニューロンのアポトーシスを誘導する可能性があることを報告しました[37]。 リーら。 は、アレチネズミにおける3分間の全体的な虚血の後、EGCGが虚血誘発性の海馬細胞死を防止したことを報告した[38]。 私たちの研究では、EGCG がアポトーシス促進タンパク質であるカスパーゼ-3のレベルを低下させ、BDNF の発現を増加させることも発見しました。

ミトコンドリアの構造的損傷と機能不全は、低酸素下の脳における重要な病理学的特徴である[39]。 私たちの研究では、超微細構造観察により、HAH下の海馬ニューロンにおける深い染色、ミトコンドリアの膨張、およびクリスタの消失の存在が検出されましたが、EGCG治療後の海馬ニューロンは核濃縮症などのこれらの損傷から大幅に保護されました。 Iwona Zwolak は、EGCG がミトコンドリア膜電位を維持し、ミトコンドリアの抗酸化機能と呼吸機能を強化することによって重金属毒性から保護する可能性があると要約しました [40]。 我々は、これらのメカニズムが、HAH 環境への脳曝露に対する EGCG の保護的役割にも存在するのではないかと考えています。 結論として、EGCG は鉄の蓄積を減少させ、酸化ストレスレベルとアポトーシスを低下させ、ニューロンの再生を促進することで、高地低酸素への慢性曝露によって引き起こされるラットの脳障害を改善することができます。 したがって、慢性高山病の治療および予防のための新しい薬として機能する可能性があります。

謝辞

この研究で使用したオープンフィールド試験やモリス水迷路試験などの設備や支援を提供していただいた中国成都市の四川大学西中国病院の中核施設に心から感謝の意を表します。

著者の寄稿

CC と HC はこの研究を考案、設計し、実行しました。 CC はデータを処理し、原稿を作成しました。 JC は原稿を修正しました。 実験はBL、BH、YW、DZ、YQが協力し、FGが全工程を担当しました。

資金調達

この研究は、中国国家自然科学財団 (番号 81930046、81771800、および 81829003) の支援を受けました。

データの可用性

現在の研究中に生成されたデータセット、および/または現在の研究中に分析されたデータセットは、合理的な要求に応じて責任著者から入手できます。

宣言

利益相反

著者には、開示すべき関連する金銭的または非金銭的利益はありません。

倫理的承認

この研究はヘルシンキ宣言の原則に従って実施されました。 承認は、中国成都市の四川大学西中国病院の実験動物倫理委員会によって与えられました。

オープンアクセス

この記事は、クリエイティブ コモンズ表示 4.0 国際ライセンスに基づいてライセンスされており、元の著者に適切なクレジットを表示する限り、あらゆる媒体または形式での使用、共有、翻案、配布、複製が許可されます。 ) とソース、クリエイティブ コモンズ ライセンスへのリンクを提供し、変更が加えられたかどうかを示します。 この記事内の画像またはその他のサードパーティ素材は、素材のクレジットラインに別段の記載がない限り、記事のクリエイティブ コモンズ ライセンスに含まれています。 素材が記事のクリエイティブ コモンズ ライセンスに含まれておらず、意図した使用が法的規制で許可されていない場合、または許可されている使用を超えている場合は、著作権所有者から直接許可を得る必要があります。

参考文献

1. Jain V (2016) 高地での脳の栄養。 Adv Neurobiol 12:307–321. https://doi.org/10.1007/978-3-319-28383-8_16

2. Singh LC (2017) 高地皮膚科学。 インディアン J ダーマトール 62:59–65。 https://doi.org/10.4103/0019-5154.198050

3. Shi J、Wang J、Zhang J、Li X、Tian X、Wang W、Wang P、Li M (2020) Potentilla anserina L から抽出された多糖は、ラットの急性低気圧性低酸素誘発脳障害を改善します。 フィトテル・レス 34:2397–2407。 https://doi.org/10.1002/ptr.6691

4. レオン＝ベラルデ F、マッジョリーニ M、リーブス JT、アルダシェフ A、アスムス I、ベルナルディ L、ゲ RL、ハケット P、小林 T、ムーア LG、ペナロザ D、リシャレット JP、ローチ R、ウー T、バルガス E、ズビエタ-Castillo G、Zubieta-Calleja G (2005) 慢性および亜急性の高地疾患に関するコンセンサスステートメント。 High Alt Med Biol 6:147–157.https://doi.org/10.1089/ham.2005.6.147

5. ヴィラフェルテ FC、コランテ N (2016) 慢性高山病: 臨床的側面、病因、管理、および治療。 High Alt Med Biol 17:61–69。 https://doi.org/10.1089/ham.2016.0031

6. Germuska M、Chandler HL、Stickland RC、Foster C、Fasano F、Okell TW、Steventon J、Tomasini V、Murphy K、Wise RG (2019) 酸素消費量と有効酸素消費量の絶対脳代謝率の二重校正 fMRI 測定酸素の拡散率。 ニューロイメージ 184:717–728。 https://doi.org/10.1016/j.neuroimage.2018。 09.035

7. Maiti P、Singh SB、Mallick B、Muthuraju S、Ilavazhagan G (2008) 高地記憶障害は、海馬、皮質、線条体の神経細胞のアポトーシスが原因です。 J Chem Neuroanat 36:227–238. https://doi.org/10.1016/j.jchemneu.2008.07.003

8. Turner CE、Barker-Collo SL、Connell CJ、Gant N (2015) 急性の低酸素ガス呼吸は、人間の認知力と課題学習を著しく障害します。 生理的行動 142:104–110。 https://doi.org/10。 1016/j.physbeh.2015.02.006

9. McMorris T、Hale BJ、Barwood M、Costello J、Corbett J (2017) 認知に対する急性低酸素症の影響: 体系的レビューとメタ回帰分析。 Neurosci Biobehav Rev 74:225–232.https://doi.org/10.1016/j.neubiorev.2017.01.019

10. Wilson MH、Newman S、Imray CH (2009) 高地への上昇による脳への影響。 ランセット ニューロル 8:175–191。 https://doi. org/10.1016/S1474-4422(09)70014-6

11. Hu S、Shi J、Xiong W、Li W、Fang L、Feng H (2017) オキシラセタムまたは疲労核刺激は、高地での認知障害を軽減します。 脳の行動 7:e00762。 https://doi.org/10.1002/brb3.762

12. Zhang XY、Zhang XJ、Xv J、Jia W、Pu XY、Wang HY、Liang H、Zhuoma L、Lu DX (2018) クロシンは、ラットの急性低気圧性低酸素症誘発性認知障害を軽減します。 Eur J Pharmacol 818:300–305。 https://doi.org/10.1016/j.ejphar.2017.10.042

13. Graham HN (1992) 緑茶の組成、消費量、およびポリフェノールの化学。 前 メド 21:334–350。 https://doi.org/10。 1016/0091-7435(92)90041-f 14. Musial C、Kuban-Jankowska A、Gorska-Ponikowska M (2020) 緑茶カテキンの有益な特性。 Int J Mol Sci. https://doi.org/10.3390/ijms21051744

15. Eng QY、Thanikachalam PV、Ramamurthy S (2018) 心血管疾患および代謝性疾患におけるエピガロカテキンガレート (EGCG) の分子的理解。 J Ethnopharmacol 210:296–310。

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