水性酵素抽出によるカボチャ (Cucurbita Moschata) 種子油の脂肪酸組成、抗酸化作用、薬理活性の評価 パート 2

May 08, 2023

3.3. パンプキンシードオイルの抗酸化作用

関連する研究によると、カンクン「寿命を延ばす奇跡のハーブ」として知られる一般的なハーブです。 その主成分は、シスタノシドなど様々な効果があります。抗酸化物質, 抗炎症薬、 と免疫機能の促進。 カンクと美白のメカニズムはカンカンの抗酸化作用にあります配糖体。 人間の皮膚のメラニンは、次の物質によって触媒されるチロシンの酸化によって生成されます。チロシナーゼ、酸化反応には酸素の関与が必要なため、体内の酸素フリーラジカルはメラニン生成に影響を与える重要な要素になります。 シスタンケには抗酸化物質であるシスタノシドが含まれており、体内のフリーラジカルの生成を減らし、メラニンの生成を抑制します。

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すべてのカボチャ種子油サンプルは、用量依存的に DPPH・ラジカルを減少させました (図 1)。 PSO2 は、ほとんど効果的な DPPH• 阻害を示し、PSO1、COM1、および COM2 と比較した場合、5% w/v 濃度の PSO2 は DPPH• ラジカルの有意な阻害を示すことがわかりました (p < 0.05) 。 さらに、カボチャ種子油サンプル中の主な脂肪酸組成であるリノール酸 (LA) も、用量依存的に DPPH・ラジカルを減少させ、LA がカボチャ種子油中で生物学的効果を発揮する可能性があることを示しています。 リノール酸がラジカルと反応するメカニズムはまだ不明です。 Yu (2001) による以前の研究では、リノール酸は遊離 DPPH・ラジカルと直接反応するが、遅滞相があり、ラジカル消光活性を示さないことが報告されています。 しかし、共役リノール酸は親水性環境と親油性環境の両方で反応し、DPPH・ラジカルを消光しました[51]。

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一方、10% w/v の濃度の PSO1、PSO2、COM1、および COM2 は、ABTS・プラスラジカルを減少させました。 PSO2 は、PSO1、COM1、COM2、および LA と比較した場合、最も高い ABTS• プラス阻害を示しました (p<0.005). Interestingly, PSO2 exhibited comparable ABTS•+ inhibition with ascorbic acid, which was a positive control (Figure 2).

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第二鉄 (Fe3 プラス ) を第一鉄 (Fe2 プラス ) に還元する際の抗酸化能力に基づくカボチャ種子油サンプルの抗酸化活性を図 3 に示します。この研究は、PSO1、PSO2、COM1 の同等の第二鉄還元抗酸化力を示しました。 、COM2、およびLAを10パーセントw/vの濃度で含む。 一方、陽性対照であるアスコルビン酸は最も高い EC1 値を示しました (p< 0.05).

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PSO1、PSO2、COM1、COM2、および LA は、さまざまな濃度 (0.25 パーセント、0.5 パーセント、および 1 パーセント w/v) で用量依存的に脂質過酸化を阻害しました。図 4 に示します。LA、PSO1、COM1 による阻害は、1% w/v の濃度でほぼ完全でした。 グループ間で脂質過酸化の阻害に有意な差はありませんでした。 さらに、-トコフェロールは、カボチャ種子油サンプルよりも低い濃度で脂質過酸化に対する効果的な阻害を示しました。

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抗酸化活性は、酸化ストレスに対抗し、健康上の利益をもたらし、一部の病気を改善するために、天然化合物において重要な役割を果たしています。 かなりの数の研究が、さまざまな植物の種子油にフェノール類、トコフェロール、フィトステロールの形で抗酸化物質が含まれていることを実証しています [52,53]。 カボチャ種子油に含まれるポリフェノールとカロテノイドの出現は、抗酸化防御システムを刺激し、高血圧、アテローム性動脈硬化、2 型糖尿病、癌を予防しました [54]。 以前の分析では、カボチャ種子油は、Trolox 等価容量 0.664 ± 0.09 ~ 1.18 ± 0.04 μM Trolox/g [55] の抗酸化活性があることが判明しました。 ]。 同様に、Boujemaa I et al. (2020) は、C. maxima が C. moschata および C. pepo よりも高い抗酸化活性を示したと報告しました [56]。これは、多量の PUFA、トコフェロール、およびフェノール化合物によって部分的に説明できます [18,57]。 最近、カボチャ種子油の抗酸化活性が、DPPH・、ABTS・プラス、FRAP、およびFTCアッセイを含む4つの方法によって測定されました。 その結果、PSO2はPSO1、COM1、COM2よりも高い値の消去活性を示し、DPPH・およびABTS・プラス、およびFeSO4のラジカルを大幅に減少させることが実証されました。 PSO2 は他のものよりもリノール酸の収率が低いものの、同等の抗酸化活性を示し、優れた DPPH・ラジカル消去特性を備えていました。 PSO2 の消去活性の発揮は、カロテノイド、トコフェロール、フェノール化合物などの生理活性化合物に由来する可能性があり、これは先行研究によって裏付けられています [52-54]。 カボチャ種子油の水性酵素抽出は強力な抽出方法であり、より多くの生物活性成分の放出をサポートして抗酸化活性を強化すると結論付けることができます。 したがって、すべての種子油サンプル、特に PSO2 は抗酸化力を示しており、健康上の利点や医療に関する用途に役立つ可能性があります。

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3.4. パンプキンシードオイルの老化防止作用

PSO1、PSO2、COM1、およびCOM2は、さまざまな濃度(0.25パーセント、0.5パーセント、および1パーセントw/v)で用量依存的にヒアルロニダーゼ活性を阻害した。 低濃度 ({{10}}.25% w/v) では、PSO1、PSO2、COM1 は非常に効果的な阻害を示しました (約 70-100%)図 5 に示すように、COM2 と比較するとヒアルロニダーゼ活性が有意に阻害されました (p < 0.05)。陽性対照であるオレアノール酸 (OA) もヒアルロニダーゼ活性を減少させました。 カボチャ種子油の主成分である LA は最も高い阻害 (120.6 ± 0.7 パーセント) を示し、他のカボチャ種子油サンプルや OA と比較してヒアルロニダーゼ活性を有意に阻害しました (p < 0.05)。

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カボチャ種子油サンプルの抗コラゲナーゼ活性を図 6 に示します。PSO1、PSO2、COM1 はコラゲナーゼ活性を阻害しましたが、COM2 は阻害しませんでした。 PSO1 および PSO2 (1% w/v) は、それぞれ COM1 および COM2 と比較した場合、有意なコラゲナーゼ阻害活性を示しました (p < 0.05)。 陽性対照としてのOAもコラゲナーゼ活性の阻害を示した。 それにもかかわらず、LA はこの実験ではコラゲナーゼに影響を与えませんでした。 これが、LAを最も多く含むCOM2がコラゲナーゼに影響を与えなかった理由であると考えられる。

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カボチャ種子油サンプルの抗エラスターゼ活性を図 7 に示します。1% w/v 濃度の PSO1 のみがエラスターゼ活性を阻害し、PSO2、COM1、COM2 と比較するとエラスターゼ活性が大幅に減少しました (p < {{7 }}.05)。 LA は PSO1 と OA で同様の効果を示しました。 さらに、陽性対照としてのOAは、PSO1、PSO2、COM1、COM2、およびLAと比較した場合、エラスターゼ活性の最も高い阻害を示し、エラスターゼ活性を有意に低下させた(p<0.05)。

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皮膚の健康と美しさは人間の「幸福」の最も重要な要素の 1 つとみなされているため、近年いくつかのアンチエイジング戦略が確立されています [58]。 UV 照射や光老化は酸化ストレスを誘発し、これは皮膚の色素沈着だけでなく人間の皮膚の老化プロセスの重要な原因でもあります [59]。 通常、人体はスーパーオキシドジスムターゼ(SOD)、カタラーゼ、グルタチオンペルオキシダーゼ(GSH)などの抗酸化酵素を生成して活性酸素種(ROS)を消去できます[50]が、より多くの抗酸化物質が必要です。 現在、植物油および種子油抽出物は、フェノール類、トコフェロール、フィトステロールなどの生理活性化合物をベースとした抗酸化特性により、薬理学的および化粧品に使用されており、皮膚の老化を改善します[23,60]。 以前の研究では、ツバキ種子油がヒトI型コラーゲンの合成を誘導し、高い保湿効果をもたらすことが判明しました。 それにもかかわらず、それはMMP1活性を阻害した[61]。 PUFA と抗酸化作用を強化したザクロ種子油とその製品。 ナノエマルジョンとクリームは皮膚のバリア機能を改善しました[62]。 しかし、カボチャ種子油の化粧品特性についてはほとんど研究が行われていないため、この研究では、アンチエイジング活性に関与するヒアルロニダーゼ、コラゲナーゼ、エラスターゼ酵素の阻害を調べることに焦点を当てました。 その結果、PSO1およびPSO2は、ヒアルロニダーゼ活性を阻害する同様の効果を示したCOM1およびCOM2と同様に、ヒアルロニダーゼ酵素を潜在的に阻害することが判明した。 さらに、PSO1 と PSO2 はコラゲナーゼ酵素活性を大幅に低下させ、COM1 は酵素活性をわずかに低下させました。 PSO1 のみがエラスターゼ酵素の阻害を行いました。 したがって、カボチャ種子油の水性酵素抽出(PSO1 および PSO2)は、カボチャ種子油のコールドプレスよりも、抗ヒアルロニダーゼ、抗コラゲナーゼ、および抗エラスターゼ活性を示す強力な老化防止活性を持っていたと判断できます( COM1 および COM2)、抗酸化活性と相関します。 以上をまとめると、PSO1とPSO2が有効なアンチエイジング効果を示し、皮膚化粧品への応用が可能であることが裏付けられた。

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3.5. カボチャ種子油の抗チロシナーゼ活性

色素沈着過剰は、紫外線にさらされた後に発生する可能性のあるもう一つの皮膚の問題です。 メラニン生成は皮膚の色素沈着において重要な役割を果たしており、メラニン色素を生成するチロシナーゼ酵素の作用によって制御されます。 最初に、L-チロシンはチロシナーゼによってヒドロキシル化され、L-3,4-ジヒドロキシフェニルアラニン (L-DOPA) に変換され、次に酸化されてドーパキノンになり、最後にメラニン色素になります[63]。 L-DOPA とチロシンをカボチャ種子油サンプルの基質として使用した場合の抗チロシナーゼ活性を図 8 に示します。PSO1、PSO2、COM1、COM2 は、L-DOPA を基質として使用したチロシナーゼ活性を用量依存的に阻害しました。 COM2を除く。 PSO1 は、PSO2、COM1、COM2 と比較した場合、0.5 パーセントおよび 1 パーセント w/v の濃度で最も高いチロシナーゼ阻害活性を示しました (p<0.05). Likewise, all pumpkin seed oil samples inhibited tyrosinase activity when tyrosine was used as a substrate. The inhibitions were in a dose-dependent manner, except COM2. PSO2 showed the highest tyrosinase inhibitory activity at a concentration of 0.5% and 1% w/v when compared with PSO1, COM1, and COM2 (p<0.05). Similarly, LA performed tyrosinase inhibition in a dose-dependent manner, and kojic acid (positive control) also decreased tyrosinase activity in both substrates. It was indicated that PSO1 and PSO2 had potent anti-tyrosinase activities, supporting their use in applications for whitening skin.

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現在、数人の研究者が美白製品の成分として使用される多くの天然化合物を研究しています[64]。 オレイン酸と抗酸化力が豊富なティーシードオイルは、チロシナーゼとTPR-2の活性を阻害し、メラニン生成プロセスの抑制につながりました[65]。 さらに、Hong Xin Cuiらの報告は次のとおりです。 (2018) トレヤ グランディスの種子油が、チロシナーゼ反応における酸素供給の減少を介してチロシナーゼ活性を阻害する強力な抗酸化活性を明らかにしたことを発見しました [66]。 私たちの発見は、カボチャ種子油がチロシナーゼ酵素活性を示すことを実証しました。 PSO1 は、L-DOPA を基質として使用することにより、チロシナーゼの顕著な阻害を示しました。 PSO2 は、チロシンを基質として使用することによるチロシナーゼの有意な阻害を報告しました。 私たちの結果は、カボチャ種子油の水性酵素抽出 (PSO1 および PSO2) にも、抗酸化活性による美白効果に対する強力な抗チロシナーゼ活性があることが示されました。

4. 結論

C. モスカタ種子からの油は、水性酵素抽出によって首尾よく抽出されました。 リノール酸はすべての C. モスカタ種子油サンプルの主成分でしたが、市販の油と比較して PSO1 と PSO2 ではより少ない量が検出されました。 水性酵素抽出によって抽出された C. モスカタ種子油 (PSO1 と PSO2 の両方) は、市販のカボチャ種子油と比較して、同等の抗酸化活性を有しますが、コラゲナーゼ、ヒアルロニダーゼ、およびチロシナーゼに対する優れた阻害効果を有していました。 したがって、カボチャ種子油の水性酵素抽出は、油と生理活性化合物を同時に含有するのに有用であることが証明され、溶媒抽出に代わるより環境に優しい代替手段であることが示されています。 さらに、PSO1 と PSO2 は、機能性食品や化粧品産業で代替的に使用できる栄養素と生理活性化合物の優れた供給源であることが示唆されました。

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著者の寄稿:概念化、トイレ。 方法論、RK、NS。 形式分析、AP。 調査、RK、NS。 リソース、WC、RK、NS。 執筆 - 原案の準備、AP、および WC。 執筆 - レビューと編集、AP と WC。 資金調達、AP、著者全員が原稿の出版版を読み、同意しました。
資金提供:AP は、博士研究員研究に対する CMU Presidential Scholarship 2021 に感謝しています。 APC は、タイのチェンマイにあるチェンマイ大学の製薬ナノテクノロジー研究センターと、タイのチェンマイ大学薬学部のホリスティックヘルス、栄養補助食品、および化粧品のイノベーションセンターから資金提供を受けました。
治験審査委員会の声明: 該当なし。
インフォームド・コンセントの声明:適用できない。
データの可用性に関する声明:この原稿のすべてのデータ、表、図はオリジナルです。
利益相反:著者は利益相反がないことを宣言します。

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