ホンオニクの化学有効成分を特定する方法
Mar 14, 2022
コンタクト：joanna.jia@wecistanche.com
X500RQTOFシステムを使用したCistancheDeserticolaの化学成分の同定
Li Yuejie、Cheng Haiyan、Liu Ting、Li Lijun、Jin Wenhai SCIEX、アジア太平洋アプリケーションサポートセンター（上海）、中国
序章
ニクジュヨウ「神農マテリアメディカ」で最初に記録されました。 「だゆん」「田麩栄」「田麩」とも呼ばれます。 伝統的な漢方薬として、腎臓の陽に栄養を与え、血流を改善し、下剤、免疫刺激、およびその他の効果として作用するという特性があります[1]。 1983年、日本の学者である小林秀樹らがニクジュヨウ[2]そしてそれ以来、それは過去30年間、国内外で大きな関心を呼んでいる漢方薬研究で人気のあるトピックになりました。ニクジュヨウフェノールを含む植物のクラスに属しています配糖体、イリドイド、およびそれら配糖体、およびリグナンとその配糖体.
四重極飛行時間型（QTOF）質量分析は、研究に徐々に不可欠になっている漢方薬の成分を特定するための高感度で特殊なツールです。 このテクノロジーは、重要なデータの抽出とサンプル情報の最も包括的な取得を可能にする単一注入の遡及的分析により、従来の技術的課題を克服しました。 正確な質量と高分解能のTOF-MSおよびTOF-MS/MSデータを使用することで、ターゲットを絞った、およびターゲットを絞っていない定性分析を同時に行うことができます。 ただし、機器の操作とソフトウェアの使用が複雑なため、このテクノロジーの普及と開発は大幅に制限されています。 ここでは、革新的な新しいNタイプのジオメトリベースのTOFパス、直感的なソフトウェア、および漢方薬の成分識別で使用しやすい正確な分子量技術を使用する新しいQTOFシステムを紹介します。
この方法の利点は次のとおりです。
1. X500Rは、強力な汚染防止機能を備えた、耐久性のある業界承認のTurboVTMイオン源およびエアカーテンガスインターフェース設計を使用しています。
2. SCIEX OSソフトウェアは、単一のプラットフォームに取得、処理、およびレポート機能を統合しています。 インターフェースは直感的で習得が容易で、ワンタッチの自動調整補正機能を備えているため、あらゆる専門知識を持つアナリストが高品質で信頼性の高いデータを取得できます。
3. SCIEX OSソフトウェアを使用してデータを処理し、漢方薬の成分を特定するのは簡単で、有用な情報を迅速に抽出できます。
4. MS/MSスペクトルを含む漢方薬ライブラリからより正確で信頼性の高い同定結果を導き出します。
5.高解像度MS/MS漢方薬データベースは、「中国薬局方」パート1TCM有効成分に基づいています。 薬局方の成分参照とハーブの有効成分を含めて、900近くの化合物があります
実験プロセス
1. TOF-MS-IDA MS / MSモードを使用して、サンプルを注入し、同時に一次プリカーサーイオンと対応する二次スペクトルを取得します。
2. SCIEX OSソフトウェアのターゲットスクリーニング、ターゲット化合物の確認、および二次スペクトルを、漢方薬の標準とマッチング方法のスクリーニングとともに使用すると、精度と作業の生産性を向上させることができます。
3. SCIEX OSソフトウェアの非ターゲット識別ワークフローは、ChemSpiderでライブラリ検索と完全な不明な検索を使用して結果を検証し、より単純なワークフローでより多くのコンポーネントが識別されるようにします。
サンプルと前処理方法
サンプルソース：
上海の薬局からスライスした形で購入
前処理方法：
1.スライスを粉砕して粉末を形成しました。
2. 0 .9mgを秤量し、3mLのメタノールに40分間浸しました。
3.ステップ2）のサンプルを1時間超音波処理しました。
4.遠心分離とサンプルとして使用する上澄みの除去を行った。
液体クロマトグラフィー（LC）条件
クロマトグラフィーカラム：XSelect HSS T3、2.1 * 150mm、3.5µm;
移動相：グラジエント溶出を使用しました
移動相：Aは0.1パーセントのギ酸水-2mM NH4FA
Bは95パーセントのアセトニトリル-5パーセントの水-2mMNH4FA
流量：0 .5mL / min
カラム温度：40ºC
挿入量：5µL
質量分析法：
スキャン方法：TOF MS-IDA -15 MS/MS定性スクリーニング
ESIイオン源パラメータ：
エアカーテンガスCUR：35psi; IS電圧：5500V / -4500 V
ソース温度：600ºC
噴霧ガスGAS1：55psi; 補助ガスGAS2：60psi
計装モード検索：
ワンタッチ（右下の[MSチェック]を選択）、完全に自動化されたTOF-MSおよびTOF-MS / MS補正モードにより、あらゆる専門レベルのアナリストが正確で信頼性の高い再現性のあるデータを取得できます。
正および負のイオンモードBPC：
化合物の同定手順
1.対象となるコンポーネントの識別ワークフロー
1.1：分子式検索
化合物名と分子式のみが必要です。 これらは直接入力することも、Excelのコピーアンドペースト機能を使用してインポートして処理方法を作成することもできます
結果テーブルが作成されると、定量的および定性的な結果を同じウィンドウに表示できます。 赤/緑のインジケーターシステムは、質量精度、保持時間、同位体タイプ、およびデータベースマッチングによる識別の信頼性を示すために使用されます。
SCIEX OSソフトウェアを使用すると、ユーザーは結果をフィルタリングし、許容基準を満たし、ユーザーが定義した信頼区間内にある化合物のみを表示できます。 大規模なデータベースでターゲットを絞った結果をすばやく見つけることができます。
MS / MSスペクトルのTCMデータベースは、二次マッチングを可能にし、より信頼性の高い結果をもたらします（データベースの灰色はMS / MSデータを示します）
文献には、フェノールの名前と分子式が含まれています配糖体有効成分。 上記のプロセスを使用してターゲット成分を特定したところ、サンプルには39種類のフェノール配糖体が含まれていることがわかりました。
フェノールに加えて配糖体有効成分であるCistancheには、イリドイド、グリコシド、リグナンなどの化合物も多数含まれています。 識別結果は以下のとおりです。
イリドイド、配糖体、およびリグナンの識別リスト：
1.2：データベース検索：
TCMデータベースのマッチング同定から53の化合物が得られました：以下にリストされている43の陽イオン、22のマイナスイオン、および12の繰り返し。 活性フェノールに加えて配糖体、イリドイド、配糖体、リグナン、Cistancheには
2.非ターゲットコンポーネント分析
組み込みのChemSpider検索機能を使用して、対象外のコンポーネントの識別を実行し、未知の分類とタイプを判別できます。 非標的成分の同定には、「非標的」モードを選択するだけで、分子式検索により処理方法が開発されます。 ワークフローは次のとおりです。
完全な未知数の場合、分子式の検索結果は、TOFMSマススペクトルの下部にあるピークブラウザウィンドウに表示されます。 ChemSpiderデータベース検索では、結果が優先度別に一覧表示され、ChemSpiderで取得された構造情報が取得されたMS / MSスペクトルと自動的に比較され、迅速な識別のための二次フィードバックが提供されます。
概要
1.迅速な高解像度データ取得。 1回の注入で、39の識別可能なフェノール配糖体活性成分と16のイリドイド、リグナン、および配糖体を含む高分解能TOFMSおよびMS/MSデータが得られました。
2.二次スペクトルのTCMデータベースは追加の一致情報を提供し、ソフトウェアはデータベース一致スコアを自動的に提供します。 スコアを使用すると、漢方薬の成分を簡単、迅速、正確に特定できます。
3.デバイスはシンプルで、ワンタッチの自動調整補正機能を備えているため、あらゆる専門知識を持つアナリストが高品質で信頼性の高いデータを取得できます。
4.新しいSCIEXOSソフトウェアバージョンは、データの取得、処理（定量的および定性的）、表示、レポート、およびデータベース管理を統合します。 直感的で使いやすいインターフェイスで、多くのユーザーが直面する問題を解決します。
5.ターゲットと非ターゲットの両方のスクリーニングワークフローは単純であり、組み込みのメソッドガイドは、ユーザーがメソッドを正確かつ迅速に作成するのに役立ちます。
参考文献
1. ISBN 978-7-5067-7337-9、PRC薬局方[S]。 北京：全国薬局方委員会、2015年
2. Lei、Song Zhihong、Tu Pengfei; Cistanche属の植物の化学組成に関する研究の進歩、「Chinese Herbal Medicine」、第34巻、第5号、2003年5月473-476。
