CistancheSalsaからの新しいグリコシド
Mar 11, 2022
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李磊a、ヨンジャンaet al
6つの新しい配糖体、サルサの側面A – F（1–6、それぞれ）は、ホンオニクサルサ、7つの既知のグリコシド化合物と一緒に。 それらの構造は、エステル加水分解と化学的誘導体化、詳細なNMR分光法と質量分析法、および関連する化合物の文献データとの比較によって解明されました。 新しい配糖体アセチル（Ac）、ベンジル（Bn）、フェネチル、クマロイル（Cou）、およびカフェオイル（Caf）置換基を持つ、bD-グルコース（Glc）およびaL-ラムノース（Rha）に基づいています。
序章
– ホンオニクサルサ（CA MEY。）G. BECK、ハーブの種の1つCistancheは、中国北西部に自生する短い寄生ハマウツボ科の植物です。 漢方薬（TCM）の重要な強壮剤として、Herba Cistancheの茎は、腎臓の欠乏、女性の不妊、病的な白帯下、神経衰弱、結腸の慣性による老人性便秘などに対して、中国人と日本人によって長い間使用されてきました。 ]。 他のCistanche植物と同じように、フェネチルベース配糖体C.サルサの主な有効成分です。 これらの化合物は、C57マウスにおいて1-メチル-4-フェニル-1、2,3、6-テトラヒドロピリジン（MPTP）誘発性ドーパミン作動性毒性に対して神経保護活性を有することが報告されています[{{ 8}}]。 C.サルサに関する植物化学的研究はわずかしかありません。最初の研究は約1年前にさかのぼります。 20年[5-8]。 1995年に、Moriya等。 [9] [10]は、ホンオニクサルサ彼がハーブの源を調査したときに誤って識別されていたCistanche日本の医療市場から[9][10]。 したがって、C。サルサの化学成分を再調査する必要があります。
現在の作業ではホンオニクサルサ、6つの新しいの分離と構造の解明を報告します配糖体、サルサ側AF（1-6）、アセチル（Ac）、ベンジル（Bn）、カフェオイル（Caf）、クマロイル（Cou）残基などのさまざまな置換基。 また、同じ抽出物から次の7つの既知のものが分離されました配糖体：ツブロシドB[11]、アクテオシド[6]、イソアクテオシド[11]、2'-アセチルアクテオシド[7]、エキナコシド[6]、シスタノシドC [7]、およびシスタノシドD[7]。
結果と考察
–化合物1はアモルファス粉末として分離され、その分子式はHR-ESI-MS（m / z 596.2348）によってC28H34O13として推定されました。（[MプラスNH4]プラス;計算596.2343）。 1の1H-NMRデータ（表1）は、（E）構成のカフェオイル（Caf）基の特徴的なシグナルを示し、d（H）7。0 7（br。 s）、6.76（br。d、J=8。5Hz）、および7。0 3（d、J=8。5Hz）、dに2つのオレフィンH原子（H）7.51（d、J =16。0）および6.34（d、J=16。0Hz）、および5つの芳香族共鳴と2つの非等価H原子を持つBn部分d（H）4.59、4.77（2d、J=12。0Hz）で、これは1がBn置換化合物であることを示唆しています[12]。
1の全酸加水分解により、ラムノース（Rha）とグルコース（Glc）が得られました。 1のNMRデータは、3、4-ジヒドロキシフェニルエタノールユニットのシグナルがBn基のシグナルに置き換えられたことを除いて、ツブロシドBのデータと同様でした[11]。 1のHMBCspectrumでは、両方のd（H）のd（H）4.59、4.77（アグリコンのa-CH2）およびd（C）101.7（GlcのC（1'））での2つの非等価H原子間の相関）4.40（br。d、J=11。5Hz、1 HのCH2（6'））および4.23（m、1HのCH2（6'））、d（C）166.6（C（ a'）のエステル）、およびd（H）5.04（br。s、HC（1''））およびd（C）80.8（C（3'））は、アグリコン、エステル、および糖の間の結合を確立しました部分。
ホンオニクサルサ
上記の分光学的証拠に基づいて、2D-NMRデータと組み合わせて、1の構造をベンジル6- O-[（E）-3-（3、4-ジヒドロキシ）として解明しました。フェニル）-プロップ-2-エノイル] -3- OaL-ラムノピラノシル-bD-グルコピラノシド1）、サルササイドAと名付けられました。
化合物2は無定形粉末として単離され、その分子式はHR-ESI-MS（m / z 596.2345（[M plus NH4] plus））によってC28H34O13として決定されました。 1と2の唯一の違いは、Caf部分が6'位置ではなく2の4'位置に結合していることです。 これは、2のHMBCspectrumで明らかであり、d（H）4.96（t、J=9。0Hz、HC（4'））の信号はd（C）167.3（ CafのC=O）、さらに2'-アセチルアクテオシドのNMRデータとの比較によって裏付けられています[4]。 したがって、化合物2は、ベンジル4- O-[（E）-3-（3、4-ジヒドロキシフェニル）プロップ-2-エノイル]-3-Oa-ラムノピラノシルとして同定されました。 -bD-グルコピラノシド、およびサルササイドBと名付けられました。
サルサシドC（3）は無定形粉末として単離され、その分子式はHR-ESI-MS（m / z 561.1958（[MH]; calc.561.1972））によってC28H34O12として解明されました。 3のNMRデータは、Cafグループのシグナルが（E / Z）-クマロイル（Cou）部分のシグナルに置き換えられたことを除いて、2のデータと同様でした（表1を参照）。 （E / Z）-スプリット（2.38：1）NMR共鳴、および一部のフェネチルで以前に報告された現象であるHPLCクロマトグラムのピークダブリングによって示される混合物の存在配糖体[13][14]。 3のHMBCspectrumでは、d（H）4.62、4.87（2d、各J {{1 0}}。5Hz）およびd（C）103.2（各5 Hz）での2つの非等価アグリコンa-CH2共鳴間の相関C（1'））、d（H）4.75 / 4.71（t、J=7。5Hz、HC（4'））とd（C）168.3 / 166.0（C=O of Cou）、およびd（H）5.02（br。s、HC（1''））とd（C）80.8（C（3'））の間で、アグリコン、エステル、および糖部分の間の結合が確立されました。 。 したがって、化合物3の構造は、ベンジル4- O-[（E / Z）-3-（4-ヒドロキシフェニル）プロップ-2-エノイル]-3-として解明されました。 OaL-ラムノピラノシル-b-Dグルコピラノシド、およびサルササイドCと名付けられました。
サルサシドD（4）は無定形粉末として得られ、その分子式はHR-ESI-MS（m / z 668.2563（[M plus NH4] plus; calc.668.2554）によってC31H38O15として決定されました。 4（表2）は、（E）-Caf基および（4-ヒドロキシフェニル）エトキシ基[d（H）2.65（m、2 H）、3.55（m、1 H）、 3.9 0（m、1 H）、6.64（d、J=8。0Hz、2 H）、6.97（d、J=8。{{58} } Hz、2 H）]。4の全酸加水分解により、RhaとGlcが得られました。m/ z43の負のFAB質量スペクトルで観察されたフラグメントイオンピーク、およびd（H）1.95（s、3 H）のNMR信号）、およびd（C）169.3および20.7で、Ac基の存在を示しました。1H-および13C-NMRデータは、追加のAc信号を除いて、シリンガリドA3'-aL-ラムノピラノシドのデータと非常に類似していました[ 15]。HMBCspectrum4では、d（H）4.68（t、J=9。0Hz、HC（2'））の信号はd（C）169.3（C {{62}）と相関していました。 } O of Ac）、これは、Ac部分がGlcのC（2）に結合していることを示しています。 化合物4のeは、2-（4-ヒドロキシフェニル）エチル2-O-アセチル-4-O-[（E）-3-（3、{{ 73}}ジヒドロキシフェニル）プロップ-2-エノイル] -3- Oa-ラムノピラノシル-bD-グルコピラノシド、サルササイドDと名付けられました。
の内容ホンオニクサルサ
化合物5は無定形粉末として単離され、その分子式はHR-ESI-MS（m / z 679.2228（[MH]; calc。679.2238）によってC32H4 0O16として決定されました。1H-および13C- 5のNMRデータ（表2）は、フェネチル部分のシグナルを除いて、4のデータと非常に似ていました。5の1H-NMRスペクトルには、AMXシステムがありました[d（H）6.63（d、J { {22}}。0Hz、1 H）、6.69（d、J=8。0Hz、1 H）、6.77（br。s、1 H）]およびa d（H）3.85（s、3 H）でのMeO信号HMBCspectrumでは、MeO信号はd（C）148.7（C（3））と相関し、d（H）6.69（C（3））と相関しました。 d、J=8。0Hz、HC（5））および6.77（br。s、HC（2））。したがって、比較によって裏付けられるように、MeO置換基はフェネチル部分のC（3）にありました。したがって、化合物5の構造は2-（4-ヒドロキシ-3-メトキシフェニル）エチル2-O-アセチル-4-として解明されました。 O-[（E）-3-（3、4-ジヒドロキシフェニル）プロップ-2-エノイル] -3- OaL-ラムノピラノシル-bD-グルコピラノシド、名前はサルササイドE。
化合物6はアモルファス粉末として単離され、その分子式はHR-ESI-MS（m / z 668.2543（[M plus NH4] plus; calc。668.2554））によってC31H38O15として決定されました。6の1H-NMRスペクトルは（E）-Couグループに特徴的な信号[d（H）6.35および7.46（2d、J {{20}}。0Hz、各1 H）、6.69（d、 J=7。5Hz、2 H）、7.45（d、J {{3 0}}。5Hz、2 H）]、（3、4-ジヒドロキシフェニル）エトキシ部分[d（H）6.31（br。d、J=8。0Hz、1 H）、6.46（br。s、1 H）、6.49（br。d、J=8。 0 Hz、1 H）、2.49（m、CH2）、3.41および3.72（2m、各1H）]、および2つのアノメリック共鳴[d（H）4.45（d、J=8。5Hz、HC （1'））、4.55（be。s、HC（1''））]。 4と5のように、6にもAcOグループが存在しました[d（H）1.88（s、3 H）; d（C）169.2、20.6]、これはHMBC実験によって決定されたGlc部分のC（2'）にありました。 HMBCスペクトルでは、CH2（6'）とd（C）166.6（CouのC=O）の信号間、d（H）3.41、3.72（2m、アグリコンのa-CH2）間で相関が観察されました。 ）、およびd（C）99.5（C（1'））、およびd（H）4.55（br。s、HC（1''））とd（C）68.8（C（3'））の間、すべてのリンケージが確立されました。 したがって、化合物6の構造は2-（3、4-ジヒドロキシフェニル）エチル2-O-アセチル-6-O-[（E）{{105}として決定されました。 }（4-ヒドロキシフェニル）プロップ-2-エノイル] -3- OaL-ラムノピラノシル-bD-グルコピラノシド、サルササイドFと名付けられました。
化合物1〜6では、Glc残基のアノマー中心の配置は7.5〜8.5HzのJ値からbであると推定されました。 Rha残基の場合、アノマー配置は、関連する13C-NMRデータを文献に記載されているデータと比較することによって導き出されました[6]。 糖の絶対配置DGlcおよびL-Rhaは、標準的な単糖と比較したキラル誘導体のGC分析（実験パートを参照）によって決定されました[16]。
この研究は、中国の国立自然科学基金（No. 30070887）によって財政的に支援されました。 原稿作成の際に助けてくれたHaimingShi博士に感謝します。
ホンオニクサルサ製品
実験部
全般的。 シリカゲル（2 0 0–300メッシュ; Qing Dao Hai Yang Chemical Group、Co。）、Sephadex LH -20（Pharmacia）、D101樹脂（Tianjin Chemical、Co。）、およびODS（100 –200メッシュ;Fuji Sylisia Chemical、Ltd.）をカラムクロマトグラフィー（CC）に使用しました。 準備 HPLCは、ウォーターズ-600機器で、RP-C18カラム（10 M 250 mm id; Alltech）を使用し、流速2.5 ml / min（330 nmでのUV検出）で実施しました。 GC分析は、Agilent -6890 Nガスクロマトグラフで、HP -5キャピラリカラム（28 m M 0.32 mm id）、260度のFID検出器、およびカラム温度を使用して実行しました。 180度、N2キャリアガス、40 ml/minの流量。 島津分光計でUVスペクトルを記録した。 nm単位のλmax（log e）。 旋光度は、Perkin-Elmer243Bデジタル旋光計で測定しました。 IRスペクトルは、Nicolet Avatar-360FT-IR分光計で記録されました。 cm-1で。 NMRスペクトルは、Bruker AM -500分光計のCD3ODまたは（D6）DMSOで記録されました。 d（ppm rel） Me4Si、J（Hz）。 FAB-およびHR-ESI質量スペクトルは、KYKY-ZHP-5およびBrukerAPEX質量分析計で記録されました。
植物材料。 の茎ホンオニクサルサ4月に中国寧夏回族自治区の塩池から収集されました。 この植物は、北京大学薬学部のPeng-FeiTu教授によって特定されました。 バウチャーの標本は、北京大学の漢方薬現代研究センターの植物標本館に寄託されました。
抽出と分離。 の乾燥した茎ホンオニクサルサ（8. 0 kg）は75％水溶液で抽出されました。 パーコレーションによる室温でのEtOH（8 0 l）。 溶媒を除去し、残留物をH2O（4 l）に懸濁し、石油エーテル（PE; 12 l）、AcOEt（12 l）、およびBuOH（12 l）で抽出して、溶媒除去後、1 {{ 27}} 0 gのPE-、99 gのAcOEt-、および1 {{6 0}} 0 gのBuOH可溶性抽出物、それぞれ。 AcOEt可溶性抽出物の一部（90 g）をCC（SiO2; CHCl3 / MeOH 0：1→1：2）にかけ、75の画分（Fr.）を得た。 神父 51〜53（6.0 g）を組み合わせ（= Fr。A）、再クロマトグラフィー（Sephadex LH -20; MeOH / H2O 1：1）して、11のサブフラクション（Fr. A1〜A11）を得ました。 神父 A6とFr. A7を合わせ（2.5 g; Fr. B）、CC（ODS; MeOH / H2O 1：9 – 5：5）に再度かけ、さらに35の画分（Fr. B1 – B35）を提供しました。 神父 B16 – B25を組み合わせ（0.5 g; Fr. C）、再クロマトグラフィー（Sephadex LH -20;次にHPLC、MeCN / MeOH / H2O 10：18：75を準備）して、ツブロシドB [11]（55 mg ）。 神父 B26 – B32（0.35 g）を組み合わせ（0.35 g、Fr。D）、再クロマトグラフィー（Sephadex LH -20; 20％aq。MeOH）して、7つの画分（Fr. D1 – D7）を生成しました。 神父 D1（70 mg）はprepによって精製されました。 HPLC（MeCN / MeOH / H2O 10：26：72）により、2（23 mg）、3（8 mg）、およびシスタノシドC [7]（12 mg）が得られます。 神父 D3（45 mg）はprepによって精製されました。 HPLC（MeCN / MeOH / H2O 10：20：70）で6（22mg）を得る。 神父 D4（36 mg）は分取により精製した。 ＨＰＬＣ（ＭｅＣＮ ／ ＭｅＯＨ ／ Ｈ２Ｏ ９：１８：７３）で５（２０ｍｇ）を提供する。 Fr.D5（55 mg）はprepによって精製されました。 ＨＰＬＣ（ＭｅＣＮ ／ ＭｅＯＨ ／ Ｈ２Ｏ １０：２４：６６）で１（２８ｍｇ）が得られる。 神父 D7（40mg）は分取により精製した。 HPLC（MeCN / MeOH / H2O 10：16：74）で4（18 mg）を得る。 オリジナルのFr.54とFr. 55を組み合わせ、CC（Sephadex LH -20）を繰り返して精製し、アクテオシド[6]（0.1g）および2'-アセチルアクテオシド（8.9 mg）[10]を得た。 神父 56〜58を組み合わせ、CC（Sephadex LH -20およびODS）を繰り返して精製し、イソアクテオシド（25 mg）[11]およびシスタノシドD（32 mg）[7]を提供しました。 神父 59〜64を組み合わせ、CC（Sephadex LH -20）と準備を繰り返すことで精製しました。 HPLC（MeCN / MeOH / H2O 10：15：84）により、エキナコシド（33 mg）が得られます[6]。
SalsasideA（=ベンジル6- O-[（E）-3-（3、4-ジヒドロキシフェニル）prop-2-エノイル]-3-OaL-ラムノピラノシルb -D-グルコピラノシド;1）。 アモルファス粉末。 UV（MeOH）：328（3.50）。 [a] 20D=35。6（c =0。1、MeOH）.IR（KBr）：3421、1690、1628、1605、1520。1H-および13C-NMR：表1を参照してください。 FAB-MS：577（[MH]-）。 HRESI-MS：596.2348（[M + NH4]プラス、C28H38NOプラス13;計算値596.2343）。
SalsasideB（=ベンジル4- O-[（E）-3-（3、4-ジヒドロキシフェニル）prop-2-エノイル]-3-OaL-ラムノピラノシルb -D-グルコピラノシド;2）。 アモルファス粉末。 UV（MeOH）：332（3.20） [a] 20D=35。6（c =0。1、MeOH）.IR（KBr）：3411、1692、1630、1600、1514。1H-および13C-NMR：表1を参照してください。 HR-ESI-MS：596.2345（[M plus NH4] plus、C28H38NO plus 13; calc.596.2343）。
SalsasideC（=4- O-[（E / Z）-3-（4-ヒドロキシフェニル）prop-2-エノイル]-3-OaL-ラムノピラノシル-bD-グルコピラノシド;3 ）。 アモルファス粉末。 UV（MeOH）：315（3.23）、225（1.80）。 IR（KBr）：3432、1689、1628、1609、1519。1H-および13C-NMR：表1を参照。HR-ESI-MS：561.1958（（[MH]-）、C28H33O-12;calc。 561.1972）。
SalsasideD（=2-（4-ヒドロキシフェニル）エチル2-O-アセチル-4-O-[（E）-3-（3、4-ジヒドロキシフェニル） prop-2-エノイル]-3-OaL-ラムノピラノシル-bD-グルコピラノシド;4）。 アモルファス粉末。 UV（MeOH）：328（3.40）。 [a] 20D=58。3（c =0。1、MeOH）。 IR（KBr）：3397、1720、1692、1630、1596、1512。1 H-および13C-NMR：表2を参照。FAB-MS：649（[MH]-）、443（[MH-Ac-Caf] -）。 HR-ESI-MS：668.2563（[M plus NH4] plus、C31H42NOþ15; calc。668.2554）。
SalsasideE（=2-（4-ヒドロキシ-3-メトキシフェニル）エチル2-O-アセチル-4-O-[（E）-3-（3、{ {9}}ジヒドロキシフェニル）-プロップ-2-エノイル] -3-OaL-ラムノピラノシル-bD-グルコピラノシド;5）。アモルファス粉末。 UV（MeOH）：330（3.21） [a] 20D=33。3（c =0。1、MeOH）。 IR（KBr）：3370、1721、1690、1630、1600、1514。1H-および13CNMR：表2を参照。FAB-MS：679（[MH]-）、533 [MH-Rha]-）。 HR-ESI-MS：679.2228（[MH]-、C32H39O -16;計算値679.2238）。
SalsasideF（=2-（3、4-ジヒドロキシフェニル）エチル2-O-アセチル-6-O-[（E）-3-（4-ヒドロキシフェニル） prop-2-エノイル]-3-OaL-ラムノピラノシル-bD-グルコピラノシド;6）。 アモルファス粉末。 UV（MeOH）：315（3.28）。 [a] 20D=38。5（c =0。1、MeOH）。 IR（KBr）：3416、1725、1690、1630、1600、1510。1H-および13C-NMR：表2を参照。FAB-MS：649（[MH]-）。 HR-ESI-MS：668.2543（[M + NH4]プラス、C31H42NOプラス15;計算値668.2554）。
酸加水分解と絶対糖配置の決定。 化合物（３ｍｇ）を密封管に入れ、２Ｎ水溶液で加水分解した。 水浴上で3時間加熱することによるCF3COOH（5ml）[16]。 冷却後、混合物をＨ ２ Ｏ（１５ｍｌ）で希釈し、ＣＨＣｌ ２（３Ｍ ５ｍｌ）で抽出した。 aq。 中性になるまで、層をＭｅＯＨで繰り返し蒸発乾固させた。 糖は、BuOH / AcOH / H2O 4：2：1で溶出し、アニスアルデヒド/ H2SO4を噴霧した後、加熱することにより、本物のサンプルとのco-TLCによって同定されました。 グルコース（Glc）とラムノース（Rha）のRf値は、それぞれ0。54と0。69でした。
腹筋。 糖の構成は次のように決定されました。 ソルンに。 加水分解から得られたピリジン（60ml）中の糖残留物のL-システインメチルエステル塩酸塩およびヘキサメチルジシラザン/ Me3SiCl3：1を加えた。混合物を608℃で30分間撹拌した。 得られた沈殿物を遠心分離により除去し、上澄みを濃縮し、ヘキサンとH2Oに分配した。 組織。 次に、層をGCで分析しました。 標準的な単糖と比較すると、D-Glc（tR 12.45分）とL-Rha（5.32分）が1〜6で同定されました。
ホンオニクサルサエキス
差出人：'新規配糖体からホンオニクサルサ'李磊a、ヨンジャンaet al ---2007 Verlag Helvetica Chimica Acta AG、チューリッヒ
--- Helvetica Chimica Acta –Vol。 90（2007）
参考文献
[1]薬局方編集委員会、「中国薬局方」、化学工業出版社、北京、2000年、Vol。 1、p。 103。
[2]XC。 ゲン、LW。 歌、XP。 Pu、PF。 火、Biol。 薬。 ブル。 2004、27、797。
[3]XP。 Pu、ZH。 歌、YY。 李、PF。 火、HN。 Li、PlantaMed。 2003、69、65。
[4]GQ。 シェン、XP。 Pu、L。Lei、PF。 火、CL。 Li、PlantaMed。 2002、68、966。
[5]小林、唐沢、宮瀬、福島、Chem。 薬。 ブル。 1984、32、1729。
[6]小林、唐沢、宮瀬、福島、Chem。 薬。 ブル。 1984、32、3009。
[7]小林、唐沢、宮瀬、福島、Chem。 薬。 ブル。 1984、32、3880。
[8]唐沢、小林、滝沢、宮瀬、福島、薬局雑誌1986、106、721。
[9] A. Moriya、PF。 火、D。唐沢、H。有馬、T。出山、K。ケガサワ、Nat。 Med。 1995、49、383。
[10] A. Moriya、PF。 Tu、D。Karasawa、H。Arima、T。Deyama、K。Hayashi、Nat。 Med。 1995、49、394。
[11]小林、小口、滝沢、宮瀬、上野、ウスマンガニ、アフマド、Chem。
薬。 ブル。 1987、35、3309。
[12] N.-D. Tommasi、L。Rastrelli、J。Cumanda、G。Speranza、C。Pizza、Phytochemistry 1996、42、163。
[13]宮瀬、山本、上野、植物化学1996、43、475。
[14]ZJ。 ジア、JJ。 Gao、ZM。 Liu、Indian J. Chem。、Sect。 B 1994、33、460。
[15] F.吉沢、T。Deyama、N。Takizawa、Chem。 薬。 ブル。 1990、38、1927。
[16] M. Haddad、T。Miyamoto、V。Laurens、M.-A。 Lacaille-Dubois、J。Nat。 製品 2003、66、372。
