NOD/Shi-scid IL-2R null マウスにおける自然発生性顆粒球性白血病

抽象的な：ここでは、51-生後 1 週間の雄の NOD/Shi- における自然発生性顆粒球性白血病の症例を報告します。シドイル-2R ヌル (NOG) マウス。 マウスが示した進行性の貧血そして荒い呼吸運動。 肉眼的に、脾臓は変色し、肥大していた。 組織学的には、骨髄は、胸骨そして大腿骨は細胞性が高く、ほぼ独占的に満たされていました。腫瘍細胞。 腫瘍細胞の核は大きく、楕円形からわずかに不規則な形で、少数の細胞は腎臓- またはリング状の核。腫瘍細胞臓器に広範囲に浸潤しており、脾臓と肝臓が顕著に関与していました。 免疫組織化学的には、脾臓の赤髄および肝臓の類洞にある腫瘍細胞の大規模な集団が陽性でした。ミエロペルオキシダーゼ。 組織学的特徴に基づいて、この症例は次のように診断されました。顆粒球性白血病。 この小説情報は、自然発生腫瘍さらなる研究においてこのマウス系統を適切に使用するのに役立つ可能性があります。 (DOI: 10.1293/tox.2020-0092; J Toxicol Pathol 2021; 34: 241–244)

キーワード: 顆粒球性白血病、NOGマウス、自然発生腫瘍

腎機能のための25%のエキナコシドと9%のアクテオシドを含む天然有機シスタンケエキスを入手するにはここをクリックしてください

Wecistanche のサポートサービス - 中国最大の Cistanche 輸出業者:

メールアドレス:wallence.suen@wecistanche.com

WhatsApp/電話番号:+86 15292862950

仕様の詳細についてはこちらをご覧ください:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

自然発生性顆粒球性白血病一部のマウス系統では化学薬品や電離放射線によって発生率が増加する可能性がありますが、いくつかの系統のマウスではほとんど報告されません1、2。NOD/Shi-scid IL-2R null (NOG) マウスは重篤な症状を引き起こします。免疫不全動物、NOD-scid株へのIL-2受容体鎖（IL2R c）のノックアウトにより、T細胞、B細胞、ナチュラルキラー細胞、および機能不全のマクロファージと樹状細胞に欠陥が現れます3。 このマウス系統は、異種細胞の生着が著しく良好であるため、ヒト由来の細胞/組織を使用した再生医療用の生物由来製品の品質と安全性を評価するための腫瘍原性試験などの非臨床試験に使用されます4-6。 免疫不全状態とその異種移植片への影響はよく研究されていますが、このマウス系統で発生する胸腺リンパ腫などの自然発生腫瘍についてはほとんど情報がありません。乳房腺 腺腫/腺癌, 細気管支肺胞癌, 横紋筋肉腫、奇形腫7。 ここでは、51-週齢の雄の NOG マウスにおける顆粒球性白血病の症例を報告します。

この動物は、生後 6 週間で In-Vivo Science Inc. (神奈川県、日本) から入手し、無治療で保管しました。 動物は、個別換気ケージシステム (Maxi Miser Caging System; Oriental Giken Inc.、東京、日本) を備えたプラスチックケージに個別に収容され、環境制御されたバリアシステム室内で 22 ± 2 度の温度に維持されました。湿度 50 ± 20%、明暗サイクル 12- 時間。 マウスには、オートクレーブ処理した水道水を含むオートクレーブ処理ペレット食（CRF-1; Charles River Japan, Inc.、東京、日本）を与えた。 動物は、AAALAC International によって認定されているシミック ファーマ サイエンス株式会社の施設内動物管理使用委員会によって承認されたプロトコールに従って扱われました。

このマウスは、生後49週から51週の間に、貧血、荒い呼吸運動、体重減少などの衰弱の臨床的兆候を示しました。 この動物は51週齢で安楽死させられた。 剖検では、脾臓は変色し、肥大していた。 他の臓器には明らかな異常肉眼所見は観察されなかった。 胸腺とリンパ節は正常な NOG マウスと同様に萎縮していた。

すべての臓器および組織サンプルを定期的に収集し、10% 中性緩衝ホルマリンで固定し、パラフィンに包埋し、約 3 μm で切片化しました。 病理学的検査のために、切片はヘマトキシリン・エオシン (HE) で染色されました。 脾臓および肝臓の切片を、骨髄細胞マーカーとしてのウサギ抗ヒトミエロペルオキシダーゼ（MPO）ポリクローナル抗体（Dako Japan、東京、日本）、ウサギ抗ヒトCD3モノクローナル抗体（ニチレイバイオサイエンス株式会社、東京、日本）について免疫組織化学的に染色した。 ）を T 細胞マーカーとして、ウサギ抗ヒト Pax-5 モノクローナル抗体（Abcam Inc.、英国ケンブリッジ）を B 細胞マーカーとして使用します8。 切片を抗体とともに室温で 1 時間インキュベートし、Histofine® MOUSESTAIN KIT (Nichirei Biosciences Inc.) を使用し、色原体として 3,3'-ジアミノベンジジン/H2O2 を使用して免疫検出を実行しました。 次いで、免疫染色された切片を作製した。ヘマトキシリンで対比染色.

病理組織学的に、胸骨と大腿骨の骨髄は細胞性が高く、ほぼ腫瘍細胞のみで満たされていました (図 1A)。 脂肪組織は完全に移動しました。 骨髄には赤血球系要素と巨核球系要素からなる細胞病巣が時折見られ、これらは骨髄の残存物であると考えられました。正常な造血。 ほとんどの新生物細胞は、大きな楕円形からわずかに不規則な形の核と、1 つ以上の顕著な核小体を含む網状クロマチンを特徴とする芽球状の外観を示しました。 腎臓形またはリング形の核をもつ細胞は少数あり、分葉状の核をもつ細胞もいくつか存在しました (図 1B)。 腫瘍細胞の細胞質内の顆粒は、HE で染色された切片では明らかではありませんでした。 骨髄には多数の有糸分裂像が見られ、時折アポトーシス小体も観察されました。 腫瘍細胞は骨膜および周囲の骨格筋に顕著に浸潤していました。 他の臓器や組織への腫瘍細胞の広範な浸潤があり、脾臓と肝臓が顕著に関与していました。 脾臓では、赤髄全体に腫瘍細胞が観察されました (図 2)。 腫瘍細胞の被膜浸潤が明らかでした。 いくつかの発育中の赤血球系列と巨核球が観察されました。 細胞質内に 1 つまたはいくつかの骨髄細胞を含む巨核球が観察され、エンペリポール症が示唆されました。 肝臓では、腫瘍細胞がグリッソン嚢および肝臓類洞にびまん性に浸潤していました（図 3）。 腎臓またはリング状の核を持つ新生物細胞も一部の血管で明らかでした。 顕著な腫瘍細胞浸潤を伴う門脈周囲領域のいくつかの肝細胞は変性または壊死を示しましたが、肝小葉の正常な構造は無傷のままでした。 腫瘍性細胞の浸潤は、肺の肺胞壁および血管周囲領域、腎臓の競技場間、副腎の類洞、および胃管（胃および腸）の粘膜および粘膜下組織を含む他の臓器でも認められた。 免疫組織化学的には、脾臓の赤髄 (図 4) および肝臓の類洞にある大規模な腫瘍細胞集団が MPO 陽性でした。 CD3 および Pax-5 陽性細胞は検出されませんでした。 CD3 および Pax-5 免疫染色の結果は、組織学的に形成不全であり、CD3 または Pax-5 陽性細胞を示さなかった正常な NOG マウスの脾臓の結果と同様でした。

免疫組織化学的調査により、腫瘍細胞が骨髄細胞系統に由来することが明らかになりました。 関与領域の一部、特に脾臓と肝臓では、少数の細胞が腎臓、環、または葉状の形状をしており、これは骨髄系の分化を示しています。 これらの発見は、腫瘍細胞が未熟な顆粒球に由来することを示唆しています。 重度の骨髄造血の場合は、白血病における未熟細胞の優勢とは対照的に、あらゆる種類の発生中の骨髄系シリーズの存在によって明らかになる可能性があります。 さらに、進行性の貧血は顆粒球性白血病の一般的な臨床症状であり、赤血球細胞および巨核球細胞の増加は乏しい1。 明らかな炎症を伴わない患部の分葉核を有する顆粒球の少数の集団は、本症例の所見が腫瘍性であり、反応性骨髄造血ではないことを示している。

顆粒球性白血病では、骨髄が未熟な骨髄細胞と成熟した骨髄細胞に置き換わることがあります。 他の系統のマウスに関する以前の報告では、これらの腫瘍細胞は肝臓、脾臓、リンパ節などに完全に浸潤しており 2、脾臓と肝臓のこれらの細胞は主に赤髄とグリッソン嚢の周囲に位置していました 1。 したがって、今回の場合の白血病細胞の分布は前の場合と同一でした。 マウスの顆粒球性白血病は細胞の形態から、ヒトの急性骨髄性白血病に相当する若年型とヒトの慢性骨髄性白血病に相当する成熟型の2種類に分類されます1。 若年例では、骨髄、脾臓、肝臓の腫瘍細胞は低分化細胞が大半を占めていましたが、さまざまな成熟度を表す骨髄要素が見られ、一部の成熟例では骨髄芽球の割合が低かった2、9。今回の場合、白血病細胞は、大きな楕円形からわずかに不規則な形の核を持つ未熟な細胞が大半を占めていました。 さらに、進行性の貧血や呼吸困難などの一般的な健康状態の悪化が急激に進行したという臨床所見を考慮すると、 したがって、本件は少年型であると考えられます。

図 1. 大腿骨の骨髄の組織像。 A: 腫瘍細胞がびまん性に増殖し、それによって骨髄が置き換わります。 B: 核は大きく、楕円形からわずかに不規則な形をしています。 少数の細胞には、腎臓形 (黄色の矢頭)、リング形 (緑の矢頭)、または葉形 (白い矢頭) の形の核があります。 有糸分裂の図は白い矢印で示されています。 彼は汚れます。 黒バー=50 μm (A)、10 μm (B)。

NOG マウスに関する以前の出版物では、腫瘍性病変は一般にまれでした。 ただし、胸腺リンパ腫は 16 週から 40 週の年齢群で 0.82% で報告されています 7,10。私たちの知る限り、自然発生性顆粒球性白血病は NOG マウスではこれまでに報告されていません。 B6C3F1 や BALB/c を含むいくつかの系統のマウスでは、顆粒球性白血病がほとんど発生しません 2,11 が、生後 12 か月以下のこれらのマウスでは報告されていません。 本症例は51週齢と比較的若い年齢で顆粒球性白血病を発症した。 自然発生腫瘍に関するこの新しい情報は、さらなる研究におけるこのマウス系統の適切な使用に役立つ可能性があります。