CistancheDeserticolaからのフェニルエタノイド配糖体の抗酸化活性に関する研究

連絡先：Audrey Hu Whatsapp / hp：0086 13880143964メール：audrey.hu@wecistanche.com

LI Li et al（長春師範大学中央研究所、長春、吉林省130032）

概要【目的】フェニルエタノイド配糖体の抗酸化作用を系統的に研究することを目的とした研究Cistancheニクジュヨウ。 [方法]フリーラジカル2、2-ジフェニル-1-ピクリルヒドラジル（DPPH'）アッセイと光化学発光（PCL）アッセイの2つのモデルシステムを使用して、C.deserticola抽出物の抗酸化活性を測定しました。アクトシド、イソアクテオシド、およびエキナコシド。 [結果]結果は、C.deserticolaのエキナコシド、アクテオシド、イソアクテオシド、および80％エタノール抽出物の総フェノール含有量（TPC）が、753.95、659.94、356.14、および14.73mg没食子酸/gサンプルであることを示しました。 C.deserticola抽出物はPCL実験で強い抗酸化活性を示し、続いてエキナコシド、アクテオシド、イソアクテオシドが続きました。 ただし、エキナコシドはDPPH実験で強力な抗酸化活性を示し、続いてアクテオシド、イソアクテオシド、C.deserticola抽出物が続きました。

[ 結論 ]この研究は、C.deserticolaからのフェニルエタノイド配糖体の薬理学および生物活性研究のための参照を提供する可能性があります。

キーワードCistanchedeserticola; アクテオシド; イソアクテオシド; エキナコシド; 抗酸化活性; DPPH; PCL

Cistanche (ニクジュヨウYC Ma。）はCistancheの属（Oro-banehaeeeae）Cistanche属（Cistanche）。 鱗状の葉を持つCistancheの乾燥した肉質の茎。 多くの研究により、Cistanche植物の主な有効成分はフェネチルアルコール配糖体化合物であることがわかっています。 。 フェニルエタノール配糖体化合物は、多くの種類の植物に広く分布している一種のポリフェノール化合物に属しています。 薬理学的試験研究は、これらの化合物が、抗ヘパトキシン、抗炎症、鎮痛、および抗酸化活性などの広範囲の薬理学的および生物学的活性を有することを示した。 その中で最も印象的なのは、フェノキシエタノール配糖体化合物が非常に優れた抗酸化作用を持っていることです。 著者は主にフェネチルアルコール配糖体化合物の抗酸化活性の体系的な分析を行ったCistanche、2つの抗酸化in vitro評価方法、すなわちPhotoehemilumineseence（PCL）と2、2-ジフェニル-1-ピエリル-ヒドロキシル（DPPH'）を使用して、2つの異なるシステムを使用して80の抗酸化活性を測定しました。のエタノール抽出物の割合Cistanche, エルゴステロサイド, イソエルゴシド、 とエキナコシド.

1材料と方法

1.1サンプルと試薬

Cistanche（Cistanchedeserticola）医薬品は北京同仁堂薬局から購入しました。エルゴステロサイド、イソエルゴシド、エキナコシド、フォリン。 チオカルト試薬、没食子酸、2、2-ジフェニル-1-ピクリルヒドラジル（DPPH。）などはSigmaChemicalCoから購入しました。 会社（ミズーリ州セントルイス）。 PCL分析に使用した溶媒は、Analytik Jena AG（ベルリン、ドイツ）から提供されました。 その他の試薬はすべて分析試薬（北京化学プラント製）です。 水は超純水（18.2nPa）です。

1.2サンプル抽出

正確に重量を量る2.005gのCistancheサンプル粉末、5 0 rnlの80％エタノールを使用して、室温で0.5時間超音波抽出し、2回抽出し、サンプル溶液をろ過し、回転蒸発乾固します（<40oc), use="" 100ml="" of="" distilled="" water="" dissolve,="" degrease="" twice="" with="" 100ml="" n-hexane,="" discard="" the="" n-hexane="" solution,="" extract="" the="" water="" part="" with="" 100="" ml="" of="" water-saturated="" n-butanol="" 3="" times,="" combine="" the="" n-butanol="" extracts,="" rotary="" evaporate="" to=""><40oc), and="" use="" 4ml="" for="" the="" residue="" the="" volume="" of="" absolute="" ethanol="" is="" fixed="" to="" obtain="" a="" sample="" of="">ニクジュヨウ.

1.3サンプルの総ポリフェノール含有量の決定

サンプルの総フェノール含有量は、F {{0}} lin-Ciocaheu法を使用して決定され、結果は抽出物1グラムあたりの没食子酸のミリグラムとして表されます。 0。2rnIの特定の濃度のサンプル溶液を取り（吸光度を標準曲線に落とすため）、0。5mol/Lの濃度のFolin-Ciocaheu試薬1mlを追加します。次に、7.5％の濃度の炭酸ナトリウム溶液0。8mlを加えてよく混合し、室温で0。5時間置いてから、765 nmでの吸光度を測定しました（紫外線可視分光光度計： DU800、Beckman Couher、Inc. USA）。 没食子酸溶液（質量濃度範囲は0。02-0。20me、/ m1）を使用して検量線を作成し、すべてのテストを2回繰り返します。

1.4抗酸化活性invitro分析

1.4.1PCLメソッドの決定。

テストでは、Photochem @（ベルリン、ドイツ-多く）の超高速酸化防止剤とフリーラジカル自動分析装置を使用しました。 原理は、光化学的方法でフリーラジカルを生成し、化学発光法を使用してフリーラジカルを検出することです。 実験では、光化学励起効果のある光増感剤を使用して反応分子を励起したため、紫外線ランプの作用下で酸化反応が1 000回発生しました。通常の状態よりも速く、フリーラジカルが迅速に生成されました。」PCL-ACW-Kitメソッドを選択してください。psylliumサブサンプルの水溶性成分の抗酸化活性を測定します。ピペット1。0ml反応バッファー（0。1moL / L炭酸ナトリウムの濃度、10。5のpH値および0。1mmol/ LNAの濃度、1つのEDTA、1.5ml ACW-希釈剤（水を含む） ）、濃度1mmol / LLumino1）は、反応分子を励起する光増感剤として機能するため、フリーラジカルが迅速に生成され、同時に光化学発光物質として機能します。サンプルと標準の両方が10"lです。 Lのさまざまな濃度（0.5、1.0、2.0、および3.0 nmol / L）を測定することにより、アスコルビン酸の標準曲線式はY= 24。640Ox+ 2.9311、R²= 0。9969です。 ラグタイム間隔が検量線の直線範囲内に収まるように、試験のサンプルまたは標準液を希釈する必要があります。 Photochemは検量線を作成し、サンプルの抗酸化活性を自動的にテストします。サンプルの抗酸化活性はLに相当します。 アスコルビン酸のナノモル数で計算されます。

1.4.2DPPHメソッドの決定。

ジフェニルピクリルヒドラジノラジカル[DPPH・]は、波長515nmで最大吸収を示す安定した窒素中心ラジカルです。 [DPPH・]メタノール溶液は紫色で、その濃度は吸光度と直線的な関係があります。」[DPPH・]メタノール溶液に抗酸化剤を加えた後、抗酸化剤は[DPPH・]フリーラジカルと結合するか、それらを置き換えて[DPPH・]を作ることができます。 ]フリーラジカルの数が減少し、溶液の色が薄くなります。これは、安定性に達するまで515nmの波長での吸光度が継続的に減少することで明らかになります。」 テストでは、メタノールの代わりにエタノールを使用しました。 [DPPH・]を正確に計量し、濃度を0に設定します。 [DPPH・]0。040 76mg / mlのエタノール溶液、[DPPH・]の標準曲線が得られます：Y：18。0 32x-0。0016 、R= 0。9993。 フリーラジカルの残留率を測定する方法は、文献[16]を参照してください。 溶媒としてエタノールを使用し、異なる濃度のサンプルと標準溶液を準備し、それぞれ0.1mlのサンプルまたは標準溶液を取り、質量濃度2.5mg / Lの3.9ml[DPPH・]標準溶液を追加します（現在使用されています））、サンプル溶液をブランクとしてエタノールと交換します。 混合溶液を振とうし、キュベットを使用して515nmの波長で異なる時間の吸光度を測定し、検量線に従って[DPPH・]の質量濃度に変換して[DPPH・]の残留率を計算します。 [DPPH・]の残留率とそれに対応するサンプルの添加量に応じて、サンプルから[DPPH-]フリーラジカルを除去するための曲線を描くことができます。 [DPPH・]の質量濃度と吸光度の関係曲線から、フリーラジカルスカベンジャー添加後に測定した吸光度を[DPPH・]の質量濃度に変換し、[DPPH・]後の[DPPH・]を算出することができます。フリーラジカルスカベンジャーの追加。 残差率の計算式は次のとおりです。[DPPH・] REM=[DPPH・] / [DPPH・] r =0×100％ここで、[DPPH・]はDPPHの質量濃度です。・フリーラジカル捕捉プロセスのある瞬間、[DPPH・]:。 DPPH・の元の質量濃度です。 添加した酸化防止剤の数と[DPPH・]の残余率に応じて、両者の関係曲線を作成し、線形回帰分析により回帰式を求めることができます。 回帰式によれば、[DPPH・]の残留率が50％のときの抗酸化剤の線量を計算することができます。 半分の抑制。 さまざまな濃度のサンプルまたは標準の[DPPH・]フリーラジカル捕捉曲線に従って、[DPPH・]の元の質量濃度が50％（定常状態）に減少したときのサンプルのEC量を計算します。 ECが小さければ小さいほど、フリーラジカル消去能力は強くなります」。3回並行してテストします。

cistanche

2結果と分析

2.1サンプルの総ポリフェノール含有量の測定総ポリフェノール含有量の測定では、エキナコシド最高で、753.95mg没食子酸/gです。 続いて、エルゴステロイド配糖体、イソエルゴステロイド配糖体、およびCistanche、それぞれ468.3、356.14、および14.73mg没食子酸/gでした。

2.2サンプルの抗酸化活性の測定

2.2.1PCL-ACWメソッドの決定結果。 PCL-ACW抗酸化テストでは、1txgの抗酸化能力Cistanche医薬品は15.68nmolのL-アスコルビン酸の抗酸化能力に相当します。 1gエキナコシド14.03nmolアスコルビン酸の抗酸化能力に相当します。活性：1txgエルゴステロサイドアスコルビン酸の抗酸化能力11.44nmolLに相当します。 1Ixg異性体ゴステロシドは8.24nmolアスコルビン酸の抗酸化活性に相当します。

2.2.2DPPHメソッドの測定結果。 表1から、クリアされていることがわかります。 フリーラジカルの能力の順序はエルゴステロサイド, エキナコシド、イソエルゴシドおよびの粗抽出物Cistanche、その中でエルゴ側とエキナコシドDPPHテストで基本的に同じ抗酸化能力を持っています。 これからわか​​ります。 サンプルの測定にはさまざまなinvitro抗酸化試験システムが使用されているため、抗酸化効果のメカニズムが異なり、結果に一貫性がない可能性があります。 これは、テストでも確認されています。 したがって、さらなる検証のために他の抗酸化分析システムを選択する必要があります。

echinacosie

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