Herba Cistanches Fuju ピースの最適仕様に関する研究

カンクサは神農のハーブクラシックに初めて記録されました。の効果があります。腎臓に栄養を与える陽、エッセンスと血液を補充し、腸と潤いを与えます。便秘を解消する。として臨床現場で使用されてきました。強壮剤漢方薬。 2020年版中華人民共和国薬局方（以下、「中国薬局方」という）では、Cistanche desserticolaは、オロバンシ科の植物であるCistanche desserticolaまたはCistanche tubulosaの鱗片状の葉を持つ乾燥した多肉質の茎に由来すると規定されています。カンクの薬用材料の仕様は、通常、直径 2 ～ 8 cm、長さ 3 ～ 15 cm です。

中国薬局方の「0213 加工一般規則」によれば、カンクは加工過程で厚さ 2 ～ 4 mm の不規則な厚切りに成形されます。カットされたニクのスライスのほとんどは、直径 2 ～ 8 cm、厚さ 2 ～ 4 mm の大きな厚切りスライスです [1]。

販売用の高品質カンザスエキス

この伝統的な煎じ薬は大きさが不均一で、品質に大きな差があります。臨床調整中にそれをコントロールすることは困難です。また、煎じる際に有効成分が均一に溶けにくく、煎じるたびに品質に大きな差が生じます。

さらに、関連研究では、カンクサのさまざまな部分の化学組成含有量がまったく異なり、さまざまな部分が体内の 1,1-ジフェニル-2-トリニトロフェニルヒドラジン (DPPH) フリーラジカルを除去する能力が異なることが報告されています。 vitro も異なります [2]。そのため、従来の Cistanche desserticola スライスの臨床効果を保証することが困難になります。臨床効果を向上させるための方法のうち、漢方薬スライスは、伝統的な中国医学の理論と伝統的な中国医学の加工方法に従い、高品質の薬用材料を源から選択し、特別な機能。利用率が高く、品質が均一で効果が安定しており、調整や調製が簡単です。従来のスライスの識別特性が保持されています。

漢方薬スライスのサイズは、主に薬材の薬効部位、食感の特徴、臨床用途に応じて分類されます[3]。例えば、従来のスライスの仕様は「大豆のよう」、「マー豆のよう」、「粗粉」などと記載されている[4]。

カンクサは、特別な多肉質の茎の薬用材料です。乾燥後の薬材は大きくて長い。最新の切断技術を使用して細切りまたはサイコロ状に切断するのに適しています。これにより、カンクサの利用率が向上し、その品質が均一になるだけでなく、伝統的な薬用部分の識別特性も保持されます。この研究では、伝統的なカンクサの薬用片を橋渡しとして使用し、カンクサをさまざまな仕様の細切りやブロックに噛み砕きます。薬片特性、安息角、煎じ速度、ベルバスコシドとエキナコシドの移行速度を評価指標として、咀嚼用カンク薬片の最適な仕様を最適化します。同時に、噛み砕いたカンクン薬用部分の仕様の選択、加工および生産の参考を提供するために、伝統的な薬用部分と噛み砕いた薬用部分の品質特性の均一性と一貫性が比較されます。

1 材料

1.1 楽器

Thermo U3000 HPLC; XBridge C18 (250.0 mm × 4.6 mm、5μm) クロマトグラフィーカラム; SQW シリーズ CNC 往復式薬剤カッター (Kanghua Pharmaceutical Machinery Co., Ltd.); AM300S型カッティングミル（アントソース科学機器株式会社）； DL-60J タイプ インテリジェント超音波洗浄器 (上海五月器械有限公司); QM-Q5-H30DW 型電気蒸し器 (長沙泉民電気有限公司); MS204S型1万分の1電子分析天秤（メトラー・トレド）; XPE26型100万台目電子天秤（メトラー・トレド）。

1.2 検査薬

エキナコシド基準物質（中国食品医薬品検査院、バッチ番号111670-201907、純度91.80%）、ベルバスコシド基準物質（中国食品医薬品検査院、バッチ番号111530-201914、純度95.2%）、メタノール（クロマトグラフィーグレード);ワハハ精製水。他の試薬は分析グレードです。

カンクンの薬用材料は、内モンゴル自治区アルシャー、内モンゴルのバヤンヌール、甘粛省の酒泉から研究チームによって収集され、安徽省繁体字大学の劉祥仁教授によって、カンクンの鱗片の葉が付いた乾燥した多肉質の茎であることが確認されました。薬。

2つの方法

2.1 サンプル調製方法

カンクは約 500 g の 7 つの部分に分割されました。不純物を除去し、スライスを洗浄し、混合物を浸漬した。スライスを従来のスライスと 2- ～ 4- mm の厚さのスライスに切りました。 2-～4-mmの厚さのスライスを幅2mm×2mm、2mm×4mm、4mm×4mmの糸状に切り、一辺の長さ5mmの立方体に切りました。 、8 mm、10 mm です。

2.2 主成分の決定

中国薬局方によれば、代表的なフェニルエタノール配糖体のベルバスコシドとエキナコシドの 2 つの成分が判定の指標として使用されています [1]。

2.2.1 クロマトグラフィー条件とシステム適合性テスト

オクタデシルシラン結合シリカゲルを充填剤として使用しました。メタノールを移動相 A として使用し、0.1% ギ酸溶液を移動相 B として使用しました。グラジエント溶出は、表 1 の要件に従って実行されました。検出波長は330nmであった。エキナコシドのピークに基づいて計算される理論段数は 3000 未満であってはなりません。HPLC スペクトルを図 1 に示します。

2つの方法

2.1 サンプル調製方法

カンクサ薬用原料を約５００ｇずつ７分割し、不純物を除去した。材料を洗って湿らせた後、伝統的なスライスと薄切りに切りました。従来のスライスは主に2-4 mmの厚さのスライスであり、スライスされたスライスは、幅×厚さ2 mm × 2 mm、2 mm × 4 mm、4 mm × 4 mmのフィラメントと、辺の長さはそれぞれ 5 mm、8 mm、10 mm です。

2.2 主成分の決定

中国薬局方を参考に、フェニルエタノール配糖体の代表成分であるベルバスコシドとエキナコシドの２成分を判定指標とした[1]。

2.2.1 クロマトグラフィー条件とシステム適合性テスト

オクタデシルシラン結合シリカゲルを充填剤として使用しました。メタノールを移動相 A として使用し、0.1% ギ酸溶液を移動相 B として使用しました。グラジエント溶出は表 1 の規定に従って実行されました。検出波長は330nmであった。エキナコシドのピークに基づいて計算される理論段数は 3000 未満であってはなりません。HPLC スペクトルを図 1 に示します。

図 1 エキナコシドおよびベルバスコシドの参照サンプルと試験サンプルの HPLC クロマトグラム

2.2.2 参照溶液の調製

エキナコシド標準品及びベルバスコシド標準品を適量とり、正確に秤量し、50%メタノール溶液を加えてエキナコシド標準品及びベルバスコシド標準品 0.2 mg を含む混合溶液 1 mL を調製する。

2.2.3 試験溶液の調製

本品の粉末（４号ふるいを通過したもの）約１ｇを正確に量り、褐色メスフラスコ１００ｍＬに入れ、５０％メタノール溶液５０ｍＬを正確に加え、栓をし、よく振り混ぜ、重さを量り、30分間浸し、40分間超音波処理（出力：250W、周波数：35kHz）し、冷却し、再度重さを量り、減少した重量を補うために50％メタノール溶液を加え、振とうさて、それを放置し、上清を取り、それを濾過し、濾液を採取して取得します。

2.2.4 線形関係の調査

{{0}.1、0.2、0.5、1.0、2.0 mL のベルバスコシド参照溶液を正確に吸引します、{{10}} mL メスフラスコに入れ、メタノールを秤量します。 0.1、0.2、0.5、1.0、2.0 mL のエキナコシド参照溶液を正確に吸引し、5 10 mL メスフラスコに入れ、50% を加えます。メタノール溶液を秤量し、「2.2.1」の方法に従って測定し、対応するピーク面積を記録します。

2.2.5 精度試験

ベルバスコシドおよびエキナコシドの標準溶液を正確に吸引し、6 回連続注入し、ベルバスコシドおよびエキナコシドのピーク面積の RSD を測定します。

2.2.6 安定性試験

同一の試験液を正確に吸引し、「2.2.1」の方法により測定する。 4時間に1回測定し、24時間テストします。ベルバスコシドとエキナコシドのピーク面積の RSD を計算します。

2.2.7 再現性試験

試験液の調製方法に従い、それぞれ６つの試験液を調製し、「２．２．１」の方法により測定し、ベルバスコシド及びエキナコシドのピーク面積よりＲＳＤを算出する。

2.2.8 サンプル回収試験

ベルバスコシド及びエキナコシドの含有量が既知の試験液 6 液を正確に秤量し、ベルバスコシド標準液及びエキナコシド標準液 1mL を加え、「2.2.1」の方法により測定し、回収率を算出する。

2.2.9 安息角の決定

傾斜法を使用します。長方形の箱に薬材を適度なゆるみまで詰め、粉末が流れ出すまで箱を徐々に傾けます。傾斜角は安息角です。傾斜角の高さをH、底面をLとします。安息角θの計算式は次のようになります。

Tanθ=H/L

2.2.10 煎じ速度の決定

カンクサのスライス 50 g を 1000 mL の丸底フラスコに入れ、10 倍量の水を加え、30 分間浸し、45 分間煎じ、熱いうちに 200 メッシュの濾布で濾過し、8 倍量を加える残留物に水を加え、３０分間煎じ、熱いうちに２００メッシュの濾布で濾過し、濾液を合わせる。減圧下（60度）で濃縮して抽出し、凍結乾燥してカンクサ凍結乾燥粉末を得、次の式[5]に従って煎出率を計算する。

ここで、Y は煎じ速度です。 Wa は凍結乾燥粉末の重量です。 Wb はスライスの重量です。

2.2.11 転送速度の決定

「2.1.1」のクロマトグラフィー条件に従って、カンクサのスライスおよび凍結乾燥粉末中のベルバスコシドおよびエキナコシドの質量分率を測定し、次の式に従って移動速度を計算しました。

ここで、Z は転送速度です。 Wc は、凍結乾燥粉末中のベルバスコシドとエキナコシドの質量分率です。 Wd は、スライス中のベルバスコシドとエキナコシドの質量分率です。

2.2.12 観測指標

㕮抽出スライスと伝統的スライスの異なる仕様の抽出物収量,ベルバスコシドとエキナコシドの総転移率を記録し,煎じ薬率,ベルバスコシドとエキナコシドの総転移率を加重スコア法により評価した。煎じ速度決定の重み係数は {{0}}.5 であり、ベルバスコシドとエキナコシドの総移動速度の重み係数は 0.5 でした。

3 結果と分析

3.1 主成分決定の方法論的検討結果

「2.2.1」のクロマトグラフィー条件を使用すると、ベルバスコシドとエキナコシドのクロマトグラフィー分離は 1.5 を超えました。方法論的検討の結果を表 2 に示します。この方法は、精度、安定性、再現性、回収率、分離効果が良好であり、Cistanche deserticola のスライスおよび凍結乾燥粉末中のエキナコシドおよびベルバスコシドの含有量を測定するために使用できます。

表 3 Cistanche desserticola (Cistanche desserticola) スライスのさまざまな仕様の特性の試験結果

3.3 伝統煎じ薬とゆずい煎じ薬の仕様別結果の分析とゆずい仕様の選定

表 4 から、さまざまなサイズの咀嚼片の安息角が従来の片の安息角よりも低いことがわかります。噛んだ破片のサイズが小さいほど、安息角は小さくなります。 5 mm 立方体の安息角は 30 度で最も小さく、次に 8 mm 立方体の 31.2 度、その他の仕様は 35 度より大きくなります。

従来のピースと比較して、ピースのサイズが小さいほど煎じ率が高くなります。煎じ率は2mm×2mmの場合が63.61％と最も高く、2mm×4mmの場合は60.33％、次いで5mm角の場合が多い。駒の場合は60.18%、その他のスペックは60%を下回ります。チューのサイズが8mm角の場合、基本的に従来のピースと同じです。煎じ薬片中のベルバスコサイドとエキナセアの合計含有量、凍結乾燥粉末中のベルバスコサイドとエキナセアの合計含有量、および移行率には有意なパターンはありませんでした。

煮沸および粉末煎じ片におけるより高い乾燥ペースト率および有効成分の煎出量の追求[6]とは異なり、Erzui 煎じ片の煎じ速度と移行率を維持する原則は、伝統的な煎じ片の原理と一致しています。加重スコアリング法を使用して、異なる規格間でのベルバスコシドとエキナセアの煎じ速度と総移行速度を比較しました。結果は、8 mm 立方体サイズの作品の合計スコアが従来の作品のスコアと一致していることを示しました。したがって、この仕様はCistanche desserticola nuzuiのピースに最適な仕様として使用できます。

3.4 従来スライスと㕮嘴スライスの品質均一性の比較分析

伝統的スライスと㕮嘴スライスの同じバッチを、治療コースとして7セットの臨床調整に従ってランダムに7回サンプリングし、7つのスライスの水分、煎じ薬率、ベルバスコシドとエキナコシドの総含有量、および移行率を比較しました。 。表 5 に示すように、7 つの従来のスライスの水分、抽出率、ベルバスコシドとエキナコシドの合計含有量、および移行率の RSD 値は、㕮嘴 スライスの RSD 値よりも大きく、㕮嘴 スライスの RSD 値はいずれも2%未満です。 8 mm 立方体切片の Citanche desserticola 㕮嘴 スライスの均一性は、従来のスライスよりも優れていることがわかります。

3.5 従来スライスと㕮嘴スライスの品質安定性評価の比較

㕮嘴スライスが安全性や有効性などの漢方薬スライスの品質特性を継承できるようにするために、伝統的なスライスで調製された標準煎じ薬をブリッジとして使用して、㕮嘴スライスと伝統的なスライスの品質一貫性評価を実施しました。ハーブテキスト調査、文献調査、生産地および市場調査を通じて、カンクサの真正な生産地と主な生産地を特定し、サンプルを収集しました。各生産地で少なくとも 3 バッチのサンプルが収集され、合計 15 バッチが収集されました。カンクサの異なるバッチを伝統的なスライスと㕮汁スライスに加工し,スライス収量,煎じ薬率およびベルバスコシドとエキナコシドの移行率を測定した。

表 6 に示すように、従来のスライスの 15 バッチの収率は 95.1% ～ 98.00% で、平均は 96.54%、デコクション率は 48.34% ～ 61.88%、平均は55.93%、転送率は43.5%から84.30%の間で、平均は65.88%でした。煎じたスライスの 15 バッチの収率は 81.80% ～ 97.70% の範囲で (平均は 91.40%)、煎じ薬率は 52.20% ～ 59.39% の範囲で (平均 58.46%)、移行率は 60.5% ～ 60.5% の範囲でした。 72.80%、平均は8.15%。キスタンケ デスティコーラの煎じスライスの 8 mm 立方片の品質特性は、従来のスライスの品質特性と比較的一致していることがわかります。

3.4 従来スライスと㕮嘴スライスの品質均一性の比較分析

伝統的スライスと㕮嘴スライスの同じバッチを、治療コースとして7セットの臨床調整に従ってランダムに7回サンプリングし、7つのスライスの水分、煎じ薬率、ベルバスコシドとエキナコシドの総含有量、および移行率を比較しました。 。表 5 に示すように、7 つの従来のスライスの水分、抽出率、ベルバスコシドとエキナコシドの合計含有量、および移行率の RSD 値は、㕮嘴 スライスの RSD 値よりも大きく、㕮嘴 スライスの RSD 値はいずれも2%未満です。 8 mm 立方体切片の Citanche desserticola 㕮嘴 スライスの均一性は、従来のスライスよりも優れていることがわかります。

3.5 従来スライスと㕮嘴スライスの品質安定性評価の比較

㕮嘴スライスが安全性や有効性などの漢方薬スライスの品質特性を継承できるようにするために、伝統的なスライスで調製された標準煎じ薬をブリッジとして使用して、㕮嘴スライスと伝統的なスライスの品質一貫性評価を実施しました。ハーブテキスト調査、文献調査、生産地および市場調査を通じて、カンクサの真正な生産地と主な生産地を特定し、サンプルを収集しました。各生産地で少なくとも 3 バッチのサンプルが収集され、合計 15 バッチが収集されました。カンクサの異なるバッチを伝統的なスライスと㕮汁スライスに加工し,スライス収量,煎じ薬率およびベルバスコシドとエキナコシドの移行率を測定した。

表 6 に示すように、従来のスライスの 15 バッチの収率は 95.1% ～ 98.00% で、平均は 96.54%、デコクション率は 48.34% ～ 61.88%、平均は55.93%、転送率は43.5%から84.30%の間で、平均は65.88%でした。煎じたスライスの 15 バッチの収率は 81.80% ～ 97.70% の範囲で (平均は 91.40%)、煎じ薬率は 52.20% ～ 59.39% の範囲で (平均 58.46%)、移行率は 60.5% ～ 60.5% の範囲でした。 72.80%、平均は8.15%。キスタンケ デスティコーラの煎じスライスの 8 mm 立方片の品質特性は、従来のスライスの品質特性と比較的一致していることがわかります。