常染色体優性多発性嚢胞腎にとって、サウナは有益ですか、それとも有害ですか? モデルマウスⅡによる検査
Jan 08, 2024
Ⅲ 結果
1. 繰り返しのサウナによる一般パラメータの変化
表 1 は、実験の終了時に得られた生理学的データをまとめたものです。 SW グループの体重は TS グループの体重よりも有意に高いことが判明しました (p < 0.05)。 すべてのグループの食物摂取量と水道水摂取量は同様でした(NS)。 4％スクロース含有水の摂取は、TS群とSW群の血糖値に影響を与えませんでした（NS対対照）。 TS 群と SW 群の尿浸透圧は、対照群の尿浸透圧よりも低いようでした。
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2. 繰り返しのサウナが腎機能と嚢胞拡大に及ぼす影響
表 2 は腎機能パラメータをまとめたものです。 TS 群の血漿クレアチニンまたは血中尿素窒素 (BUN) レベルは、対照群よりわずかに高かった。 対照的に、TS 群では対照群に比べて嚢胞の拡大がわずかに抑制されました。 実験の終了時には、すべてのグループで同様の尿細管の嚢胞性拡大が見られました。 尿細管の代表的な嚢胞性拡張を図 2 に示します。
3. 繰り返しのサウナによる腎臓におけるHspの発現とリン酸化
腎臓への熱負荷を決定するために、Hsp のウェスタンブロット分析を実行しました (図 3A)。 以前に報告したように13)、TS群は対照群と比較して、Hsp27発現が約3.08-倍増加し、リン酸化Hsp27発現が約1.95-倍増加した。 対照群と比較して、SW 群ではそのような増加は観察されませんでした (図 3A、D、E)。 しかし、TS群とSW群におけるHsp9{{10}}発現は、対照群と比較して、それぞれ約0.61-倍と0.51-倍減少した（図） .3A、C）。 リン酸化された Hsp90 はすべてのグループで同様に発現されました (図 3A、B)。
図 2 A: HE 染色した腎臓切片の代表的な顕微鏡写真 (×2.5)。 スケールバー: 300 μm。 B: 尿細管の嚢胞性拡張の定量化がすべてのグループで観察されました。 データは平均値±SEMとして示されています。 各グループの n=3。
4. 腎臓における細胞増殖およびサイズ関連タンパク質の発現
ADPKD の嚢胞形成と増殖に関与する Hsp90 が、ヒトおよびマウスの PKD 関連腎嚢胞で過剰発現していることが以前に報告されました。 TS 群および WS 群の腎臓における Hsp90 発現の低下を確認した後、細胞増殖およびサイズ関連タンパク質の発現を確認しました 16)。 PI3K/Akt/mTOR ネットワークの過剰活性化は、過剰増殖を引き起こすよく知られた病原性イベントです。 多発性嚢胞腎では、mTOR カスケードが尿細管上皮細胞の増殖、サイズ、代謝を増加させることにより嚢胞の成長を促進します 15), 17)。 嚢胞上皮細胞増殖のシグナル伝達経路に関与する Erk1/2 18) の発現は、対照群と比較して TS 群および SW 群で減少した（P < 0.05、TS vs. 対照；図 4A、D） 、E）。 しかしながら、AktおよびmTORの発現には変化はなかった(図4A、B、C、F、G)。
5. アポトーシス経路に対するサウナまたは 4% ショ糖水の影響
カスパーゼは細胞内で不活性前駆体として発現され、さまざまな細胞死刺激に応答して活性化されます。 活性化には、プロカスパーゼの二量体化、および多くの場合オリゴマー化が含まれ、その後、小サブユニットと大サブユニットへの切断が続きます19)。 活性化されたカスパーゼは特定の標的基質を切断し、細胞死を引き起こします。 カスパーゼの活性化を検出する方法には、抗体を用いる方法とカスパーゼの基質を用いる方法とがある。 抗体を用いる方法では、未切断の前駆体および／または切断されたカスパーゼの量により検出することができる。 エフェクターカスパーゼの 1 つであるカスパーゼ 3 は、アポトーシスの重要な制御因子です。 活性化されたカスパーゼ-3は、細胞の生存と維持に重要な複数の構造タンパク質と調節タンパク質を切断できます。 アポトーシスがサウナの影響を受けるかどうかを評価するために、標準的なウェスタンブロッティングによってプロカスパーゼ3および切断型カスパーゼ3の発現量を測定しました。 図 5 は、対照グループと比較して、TS グループと SW グループでカスパーゼ 3 活性がわずかに増加したことを示しています。
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