概要

バックグラウンド: Rosa Rugosa Thunb の植物化学成分と生物活性。 変数 プレナ リーガルの花細胞樹液 (RFCS) を調査しました。

関連する研究によると、カンクン「寿命を延ばす奇跡のハーブ」として知られる一般的なハーブです。 その主成分は、シスタノシドなど様々な効果があります。抗酸化物質, 抗炎症薬、 と免疫機能の促進。 カンカンと美白のメカニズムはカンカンの抗酸化作用にあります配糖体。 人間の皮膚のメラニンは、次の物質によって触媒されるチロシンの酸化によって生成されます。チロシナーゼ、酸化反応には酸素の関与が必要なため、体内の酸素フリーラジカルが重要な要素になりますメラニン生成に影響を与える。 シスタンケには抗酸化物質であるシスタノシドが含まれており、体内のフリーラジカルの生成を減らすことができます。メラニンの生成を抑制する.

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方法:リナロール、フェニルエチルアルコール、シトロネロール、ビサボロールなどの揮発性成分は、GCMS によって同定されました。 ヒペロシド、ケンフェロール-3-O-ルチノシド、ルチン、およびルテオリンの含有量、ならびにRFCS中の総フラボノイド含有量は、HPLCおよびHPLC-MSによって測定されました。 総ポリフェノール含有量は、Folin-Ciocalteu 比色法によって評価されました。 RFCS および標準物質の抗酸化活性は、DPPH および ABTS ラジカル消去アッセイによって評価されました。 バラサンプルおよび標準物質のチロシナーゼ阻害活性を分光光度法により測定した。 RFC の抗菌効果は、最小発育阻止濃度 (MIC) および最小殺菌濃度 (MBC) または最小殺菌濃度 (MFC) の観点から評価されました。

結果：バラ画分には、生物学的に活性な成分が多く含まれていました。 RFCS 中の揮発性化合物の総含有量は約 48.21 ± 2.76 ng/mL でした。 総フェノール酸含有量および総フラボノイド含有量は、それぞれ 0.31 ± 0.01 mg/mL および 0.43 ± 0.01 mg/mL でした。 DPPH アッセイにおける IC50 値は 1120 ± 42 ug/mL、ABTS ラジカル消去活性の IC50 値は 1430 ± 42 ug/mL でした。RFCS は、IC50 値 570 ± 21 ug/mL で L-チロシン酸化を強力に阻害しました。 。 RFCS で特定されたすべての化合物は、広域スペクトルの抗菌活性を示しました。 F. nucleatum は RFCS に対して最も感受性が高く、MIC は 64 ug/mL、MBC は 250 ug/mL でした。

結論:バラのような香りがあるため、フェニルエチル アルコールはリナロールと組み合わせて、製薬業界で天然の美白剤やスキンケア添加剤として使用されることがあります。

キーワード:RFCS、植物化学成分、抗酸化作用、抗菌作用、チロシナーゼ阻害作用

バックグラウンド

ハマナスの花。 変数 プレナ リーガルは香水の製造に使用されているだけでなく、アジア諸国で何千年もの間、健康食品や医薬品としても使用されてきました。 さらに、バラにはエッセンシャルオイル、ポリフェノール、フラボノイド、アントシアニンなどの抗菌、抗炎症、血糖降下、抗酸化作用で知られる活性物質が含まれています[1-4]。 バラは、ローズティー、ローズクッキー、ローズオイルなど、さまざまな形で摂取できます。 バラの花（Rosarugosa cv. Plena）を低温乾燥してバラ茶や乾燥花びらを製造すると、「バラ花細胞液」（RFCS）と呼ばれる凝縮物が得られます。 RFCS の廃棄は、ポリフェノールと非常に高い生物学的活性を持つローズ エッセンシャル オイルを多く含むため、多大な資源の無駄遣いとなります。 また、RFCSは分解しにくいため、不適切に廃棄すると環境汚染を引き起こす可能性があります。 さらに、エッセンシャル オイルとポリフェノールは、製薬、化粧品、食品業界の有効成分です。 生のバラの花びらまたは花芽材料 1 kg を乾燥すると、約 0.2 L の凝縮液が生成されます。 平陰だけでも工業用マイクロ波乾燥の 1 サイクルあたり、約 40,{8}} kg のバラの花のつぼみと 20,000 kg の花びらが使用されます。 現在まで、RFCS およびそれに含まれる生理活性化合物の適切な廃棄方法を報告した研究はありません。

ローズオイル蒸留廃水 (RODW) は、ローズオイルを生産するために乾燥させたバラの花を水蒸気蒸留する際のもう 1 つの副産物です。 以前の研究では、RODW を濃縮して、不揮発性フェノール化合物を含むポリフェノールが豊富な残留物を生成しました [5]。 さらに、RODW のポリフェノール画分はマッシュルームチロシナーゼを強力に阻害します (IC50 値 0.41 ug/mL) [6]。 したがって、RODW に含まれるポリフェノールは、色素沈着過剰を軽減するための生理活性物質として使用される可能性があります。

食品関連の病原菌は、米国だけでも毎年何百万人もの人々に食中毒を引き起こし、さらには数百人の死亡を引き起こしており、関連費用は総額約 24 億ドルに達します [7]。 したがって、健康的で無毒で効果的な抗菌剤に対する需要の高まりにより、多機能で天然に生成される食品添加物の研究が促進されています。 ローズオイルには主に抗菌活性で知られるエッセンシャルオイルが含まれていますが[8]、RFCの抗菌効果は調査されていません。

花に含まれるフェノール化合物や揮発性物質は、抗酸化作用やチロシナーゼ阻害作用などの強力な生物活性を持っています[9]。 チロシナーゼの美白効果と褐変を制御する能力により、チロシナーゼ活性を阻害するための追加方法の開発は、機能性化粧品および食品産業において活発な研究分野となっている[10、11]。 抗酸化物質は、活性酸素種 (ROS) のレベルを下げることにより、がん、老化、アテローム性動脈硬化などの健康上の懸念のリスクを低下させる可能性があります [12]。 アスコルビン酸などの一部の抗酸化物質も美白効果があると報告されています[11]。

我々の予備試験では、Rosa Rugosa Thunb からの RODW の抗菌、抗酸化、チロシナーゼ阻害活性を調べました。 変数 plena Regal が評価されました [13]。 しかし、Rosa Rugosa cv. からの RFC の植物化学組成と生物学的活性を調査した文献の報告はありません。 プレナ。 この研究では、(1) 総フェノール類、フラボノイド、全固体および揮発分の含有量が調査されました。 （２）各活性化合物およびＲＦＣＳの抗菌活性（６株）および抗真菌活性（１株）、抗酸化活性、チロシナーゼ阻害活性を調べた。 私たちの研究結果は、医薬品や化粧品の分野におけるバラの価値の向上に役立つでしょう [13-16]。

メソッド

化学薬品

フェニルエチル アルコール、-ビサボロール、-テルピネオール、シトロネロール、硝酸ミコナゾール、塩酸テトラサイクリン、メントール、およびカンファーは、J&K Scientific Ltd. (北京) から購入しました。 コウジ酸、ヒペリド、ケルセチン、没食子酸、ケンフェロール-3-O-アセチルグルコシルラムノシド、およびケンフェロール-3-O-グルコシドは、Sigma (上海、中国) から購入しました。 嫌気性血液寒天基本培地 (CDC)、放線菌ブロス培地 (GAM ブロス)、ブレイン ハート インフュージョン (BHI) ブロス、および栄養寒天は、Suolaibao Biotech Co., Ltd. (北京、中国) から入手しました。 残りの化学物質は分析グレードまたはクロマトグラフィーグレードでした。

サンプルの準備 

ロサ・ルゴサ・トゥーンブのRFCS。 変数 plena Regal は、平銀の Fragrant Rose Biological Technology Co., LTD から入手しました。 分析前に、サンプルを 0.42 μm 精密濾過膜で濾過しました。 ＲＦＣＳの全固形分は凍結乾燥により評価した。 ロサ・ルゴサ・トゥンブの同定。 変数 plena Regal は上級農学者 Guo によって特定され、平銀バラ科学研究所の植物標本館に寄託された引換券サンプル (シリアル番号 0712) で確認されました。

HPLC分析

抽出物中のポリフェノール成分の濃度は、HPLC および UV 分析によって測定されました。 HPLC 装置は LC{0}A HPLC システム (島津製作所、京都、日本) で、Ultrasphere 5 C18 カラム (4.6 mm × 250 mm、Ultrasphere Co., Ltd.、バークシャー、英国) を備えていました。 ）。 移動相は水 (A) とアセトニトリル (B) の勾配溶離で、次のようにプログラムされました: 10 分間は 10 パーセントの B、15 分から 20 分の間は 10 ～ 25 パーセントの B、20 分の間は 25 ～ 30 パーセントの B 25 分、25 分から 50 分の間で 30 ～ 60 パーセントの B、50 ～ 51 分の間で 60 ～ 10 パーセントの B、51 分から 55 分の間で 10 パーセントの B。 移動相の流量は 1 mL/min に維持し、検出器の波長は 350 nm に設定し、カラムオーブンは 25 度に設定し、サンプル注入量は 10 μL でした。

HPLC-ESI-MS 条件

エレクトロスプレー イオン化 (ESI) 質量分析 (MS) データは、Agilent-LC-1100 機器 (Agilent、米国) で記録されました。 ＨＰＬＣ－ＥＳＩ－ＭＳ分析のＨＰＬＣ条件は上記の通りであった。 ESI パラメータは次のとおりです。衝突ガス (N2) 流量は 10 mL/min に維持され、カラム オーブンは 25 度で、データは負イオン モード [MH]- で取得され、スキャンは m/z 50 で実行されました。 –2000、スプレー電圧は 4.5 kV、キャピラリー電圧は 10 V、キャピラリー温度は 250 度でした。 サンプル中の成分は、質量スペクトル データと保持時間に基づいて特定されました。

GC/MS分析

RFCS 中の揮発性成分は、Rtx-5MS (30 m × 0.25 mm、膜厚0.25μm）キャピラリカラム。 オーブンのプログラムは次のとおりでした: 60 度で開始し、1.7 ℃/分の速度で 120 度まで加熱し、2.5 度/分で 200 度まで加熱し、8 度/分の速度で 260 度まで加熱し、最後に260度で2分間保持します。 キャリアガスとしてヘリウムを使用し、流量は1.0 mL/minでした。 インジェクターと検出器の温度はそれぞれ 250 度、280 度に保たれました。 スプリット噴射はスプリットレスモードで実行されました。 イオン源温度は２５０度、イオン化エネルギーは７０ｅＶであった。 質量範囲は 35 ～ 500 Da でした。 サンプル中の成分は、質量スペクトル データと保持時間に基づいて特定されました。

標準曲線の作成

フェニルエチルアルコール (2.23 mg)、-ビサボロール (2.1 mg)、-テルピネオール (5.23 mg)、シトロネロール (1.52 mg)、メントール (1.32 mg)、および樟脳の溶液を 1 mL のアセトニトリルで別々に調製しました。 次に、原液を酢酸エチルで 1 万～10 億倍に希釈し、各サンプル 1 μL を GS/MS で分析しました。 コウジ酸 (1.12 mg)、ヒペリド (1.07 mg)、ケルセチン (1.07 mg)、没食子酸 (1.29 mg)、およびケンフェロール-3-O-アセチルグルコシルラムノシド (1.15 mg) の溶液を 1 mL のメチル溶液で別々に調製しました。アルコール。 ストック溶液をメチルアルコールで２倍に希釈し、各溶液１０μＬをＨＰＬＣで分析した。 作業溶液の各濃度を 3 回分析しました。 検量線は、各標準の濃度に対するピーク面積としてプロットされました。 各サンプル中の標準物質の含有量は、検量線を使用して計算されました。

総フェノール類、フラボノイド、および総固形分の測定

RFCS の総フェノール含有量は、Folin-Ciocalteu 比色法によって評価されました [17]。 フェノール性物質の総含有量は、没食子酸の標準曲線と比較することによって決定した。 RFCS サンプルの総フラボノイド含有量は HPLC によって評価され、試験されたすべてのフラボノイド化合物の総量が得られました。 10- mL の RFCS サンプルを凍結乾燥して、総固形分を測定しました。 すべての測定は 3 回繰り返して実行されました。

抗酸化作用

DPPHラジカル消去活性

RFCS と標準の抗酸化活性は、以前に報告された方法をわずかに修正したバージョンを使用した DPPH ラジカル消去活性によって評価されました [18]。 簡単に説明すると、バラサンプルのアリコート 10 μL（1000 ug/mL ～ 62.5 ug/mL）を、0.4 mM DPPH を含む 50 パーセントエタノール 190 μL と混合し、暗所で 1 分間インキュベートしました。 30分。 上清のアリコート (100 μL) を 96- ウェルマイクロプレートに移し、Spectramax Plus384 UV-Vis 分光光度計 (Molecular Devices、米国カリフォルニア州サニーベール) を使用して、それぞれの吸光度を 517 nm で記録しました。 アスコルビン酸 (1000 ug/mL ～ 0.05 ug/mL) をポジティブコントロールとして使用し、サンプルを含まない DPPH 溶液をネガティブコントロールとして使用しました。 DPPH ラジカルの 50 パーセントが阻害されるバラのサンプルと標準物質の濃度を表す IC50 値を決定しました。 テストは 3 回実行され、次の式を使用して DPPH 除去のパーセンテージが計算されました。

ABTS ラジカル消去の測定

RFCS の ABTS アッセイは、以前に報告された方法 [19] の修正バージョンに従って実行されました。 簡単に説明すると、等量の 7.4 mM ABTS● plus 溶液と 2.6 mM 過硫酸カリウム溶液を混合することによってストック溶液を生成し、混合物を暗所で室温で 12 時間インキュベートしました。 次に、この溶液を、1 mLのABTS●と、陽性対照としての50パーセントエタノールを含む溶液で平衡化した。 734 nm での溶液の吸光度は 1.17 ± 0.02 単位でした。 バラサンプル（１０００μｇ／ｍＬ～６２．５μｇ／ｍＬ）のアリコート（１０μＬ）を、１．０ｍＬの希釈ＡＢＴＳ・プラス溶液と混合した。 混合物を激しく混合し、30度で30分間インキュベートした。 次いで、分光光度計を使用して、励起波長734nmで520nmで吸光度を測定した。 陽性標準は Trolox (2000 ug/mL ～ 0.05 ug/mL) でした。

阻害(パーセント)={(ブランクの吸光度 - サンプルの吸光度)/ブランクの吸光度} × 100

チロシナーゼ阻害活性の測定

バラサンプルと標準物質のチロシナーゼ阻害活性は、分光測光法により測定されました[17]。 まず、各サンプルのさまざまな濃度 (1000 ug/mL ～ 62.5 ug/mL) の 300 μL アリコートを 0.175 の 700 μL で希釈しました。 Ｍリン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ６．８）、次いで１．０ｍＬの１０ｍＭ ＤＯＰＡ溶液および１．０ｍＬのマッシュルームチロシナーゼ（２２０単位／ｍＬ）を加えた。 エタノール (300 μL、50 パーセント) およびコウジ酸 (2000 μg/mL ～ 0.1 μg/mL) をそれぞれブランク参照および陽性標準として使用しました。 反応混合物をボルテックスし、３７度で１５分間維持し、次いで、マイクロプレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ、米国カリフォルニア州サニーベール）を使用して、ドーパクロムの吸収極大（４７９ｎｍに設定）を測定した。 試験は３回行い、チロシナーゼ阻害活性の値を上記のように計算した。

抗菌特性

抗菌および抗真菌アッセイ

抗菌活性は、Xue によって記載された方法によって測定されました [20]。 すべての標準菌株は、広東微生物培養センター (中国、広州) から入手しました。 Listeria ivanovii (ATCC 19119) は BHI で培養し、Salmonella enteritidis (ATCC 14028)、Staphylococcus aureus (ATCC 25923)、および Escherichia coli (ATCC 25922) は栄養寒天 (NA) で 37 度で 24 時間培養しました。 Candida albicans (ATCC 10231) を PHB 中で 37 度で 24 時間培養しました。 プロピオニバクテリウム アクネス (ATCC 6919) とフソバクテリウム ニュークリア ウム (ATCC 10953) を、YQX-II 嫌気性インキュベーター (中国、上海) 内で CDC 寒天培地中で 37 度で 48 時間培養しました。 1 mL のブロス中の最終細胞数は、約 106 コロニー形成単位 (CFU/mL) でした。 硝酸ミコナゾールおよび塩酸テトラサイクリンの 10 mg/mL 水溶液を、それぞれ真菌および細菌に対する陽性対照として使用しました。

最小発育阻止濃度 (MIC) および最小殺菌濃度 (MBC) または最小殺菌濃度 (MFC) の決定

MIC および MBC または MFC の値は、Xue が以前に説明したように決定されました。 簡単に説明すると、栄養ブロス中の黄色ブドウ球菌、大腸菌、サルモネラ・エンテリティディス、フソバクテリウム・ヌクレアタム、およびカンジダ・アルビカンスの100μL希釈物（約100000 CFU/mL）と、GMAブロス中のリステリア・イバノヴィおよびプロピオニバクテリウム・アクネをマイクロタイターに接種しました。プレート。 次いで、試験化合物の溶液の１００μＬアリコートを、栄養ブロスで２倍連続希釈した後（２ｍｇ／ｍＬから３μｇ／ｍＬまで）加えた。 5 パーセント (v/v) DMSO を含むブロスを対照として使用しました。 ペトリ皿を 37 度で 24 時間インキュベートしました。ただし、プロピオニバクテリウム アクネスとフソバクテリウム ヌクレアタムは 37 度で 48 時間インキュベートしました。 MIC は、検出可能な増殖を示さないサンプルの最低濃度として記録されました。 細菌または真菌の増殖がない場合の MBC または MFC 値を決定するために、10 μL の阻害濃度以下の濃度の試験化合物を CDC または GMA 寒天プレート上で 24 または 48 時間インキュベートしました。 すべての測定は 3 回繰り返して実行されました。

データ分析

データは、3 回の反復の平均 ± 標準偏差として表示されます。 ダンカンの複数範囲検定による一元配置分散分析を使用して、コンピューター (Lenovo、Yangtian B) を使用して SPSS 13.0 と Sigma Plot 10.0 でそれぞれ結果を分析しました。 41) Win 7 オペレーティング システムを搭載。 p 値 < 0.05 は統計的に有意であると判断されました。

結果と考察

揮発性物質の含有量

RFCS サンプルには特有のバラの香りがあったため、その酢酸エチル抽出物の揮発性成分を分析して比較しました。 RFCS の酢酸エチル抽出物の揮発性成分の含有量は GC/MS によって測定され、4 つの標準曲線との比較によって分析され、結果は ng/mL として表されます。

6 つの主成分が、標準保持時間と MS イオンフラグメントに従って同時に同定されました。 RFC の標準物質の GC クロマトグラムを図 1 に示します。各サンプルの各元素の含有量を表 1 に示します。図 1 に示すように、6 つの化合物が温度勾配プログラムで正常に分離されました。 RFCS 中の揮発性化合物の総含有量は約 48.21 ± 2.76 ng/mL で、フェニルエチル アルコール (40.48 ± 2.24 ng/mL)、シトロネロール (7.83 ± {{ 16}}.77 ng/mL)、-ビサボロール (0.08 ± 0.01 ng/mL)、および酢酸フェニルエチル (11.20 ± 0.89 ng/mL) が同定されました (2 つのピークは未確認)特定されており、リナロールの含有量はまれです）。 RODW 中の揮発性化合物に関するこれまでの研究では、GC-MS、より具体的には HS-SPME/GC/MS 技術が広く利用されてきました [13、21-24]。 これらの以前の研究とは対照的に、私たちの研究は成分の絶対含有量を報告しています。 広範囲の揮発性化合物が存在しましたが、主要な成分には違いはありませんでした。 RFCS の主な揮発性化合物は、モノテルペン アルコール (小さなバラに特有のシトロネロール、リナロール、フェニルエチル アルコール) でした。 RFC の主要なコンポーネントのタイプは RODW のコンポーネントと似ていますが、コンポーネントの内容には大きな違いがあります [13]。 これらの違いの考えられる理由の 1 つは、揮発性成分のほとんどがローズティーの乾燥プロセスで失われたことです。

総フェノール類、フラボノイド、固形分含有量

HPLC を使用して測定した、フラボノイド、その保持時間、RFCS での標準化合物の検量線を図 2 に示します。図 2 に示すように、4 つの化合物が温度勾配プログラムで正常に分離されました。フラボノイドの検量線と回帰係数を表 2 に示します。参照化合物は良好な直線性を示すことがわかりました (R2 0.997 以上)。 RFCS には 3 つの主要成分、すなわちヒペロシド (0.18 ± 0.01 mg/mL)、ケンフェロール{{10}}O が含まれていることが判明しました。 -ルチノーテッド (0.12 ± 0.{{20}}1 mg/mL)、およびルチン (0.23 ± 0)。 01 mg/mL)。 総フェノール含量および総フラボノイド含量は、それぞれ 0.31 ± 0.01 mg/mL および 0.43 ± 0.01 mg/mL でした。 RFCS 中の総固形分は 1.45 ± 0.04 mg/mL でした。

以前の研究では、ハマナス茶に含まれる主なフェノール化合物とフラボノイド化合物は没食子酸、カテキン、エピカテキン、ケルセチンであり、ハマナス茶ポリフェノール抽出物の総ポリフェノール含有量とフラボノイド含有量は 875.2 mg/g と 610.3 mg/g であることが報告されています。 、それぞれ[1]。 さらに、ルチン、マルフロリン B、ヒペロシド、ケンフェロール、エラグ酸も RODW の樹脂画分中に見つかりました [6]。 さらに、以前の研究とは異なり、我々の研究では RODW 中のフェノールとフラボノイド化合物を測定するために HPLC-MS を使用しましたが、この研究と以前の研究では主要な化合物の 1 つであるケンフェロール-3-O-ルチノシドのみが検出されました[6 、13]。 どちらのフェノール化合物も、RFCS では HPLC では検出されませんでした。主な理由は、RFCS 中のフェノールとフラボノイドの濃度が非常に低く、HPLC では検出できないためです。 RFCS 内の固体は小分子の混合物でした。

抗酸化力 

表 3 は、RFCS および標準化合物の DPPH IC50 値を示しています。 IC50 値 < 1 ug/mL のフラボノイド (ヒペロシドを含む) (IC50 値 0.695 ± 0。021 ug/mL) ）、ケンフェロール-3-O-ルチノシド（IC50値0.808 ± 0.024 ug/mL） 、ルチン (IC50 値 0.715 ± {{60}}.017 ug/mL)、およびルテオリン (IC50 値 0.507 ± 0.015) μg/mL)、RFCS よりも強い DPPH ラジカル消去活性を示しました (IC50 値 1120 ± 42 μg/mL)。 リナロール、フェニルエチルアルコール、シトロネロール、ビサボロールなどの単一の揮発性化合物は、IC50 値が 10,{32}} μg/mL を超える弱いラジカル消去活性を示しました。 以前の報告では、バラ由来のものを含むさまざまな天然産物の抗酸化活性は、フェノール化合物の含有量によるものであるとされてきました[25、26]。 ABTS ラジカルアッセイは、多くの天然物に含まれる水素供与性および鎖切断性抗酸化物質のラジカル消去活性を評価するためにも使用されます [27、28]。 表に示すとおり。 図３において、単一化合物およびＲＦＣＳのＡＢＴＳラジカル消去活性はμｇ／ｍＬとして表される。 以前の研究と一致して、フラボノイドは揮発性化合物よりも著しく高い抗ラジカル活性と抗酸化能力を示しました[8、13]。 本研究では、ABTS スカベンジングの結果は DPPH の結果と同様でした。 IC50 値 < 1 ug/mL のフラボノイド化合物。ヒペロシド (IC50 値 0.526 ± 0.014 ug/mL)、ケンフェロール-3-O-ルチノシド (IC50 値 0.719 ± 0.016 ug/mL)、ルチン (IC50 値) を含みます。 0.621 ± 0.024 ug/mL)、およびルテオリン (IC50 値 0.436 ± 0.026 ug/mL) は、RFCS (IC50 値 1430 ± 49 ug/mL) よりも強い ABTS ラジカル消去活性を示しました。 リナロール、フェニルエチルアルコール、シトロネロール、ビサボロールなどの単一の揮発性化合物は、弱い抗ラジカル活性を示しました（IC50 値 > 10,000 ug/mL）。

チロシナーゼ阻害活性

チロシナーゼは、菌類、哺乳類、植物に見られる多機能の銅含有酵素です[29]。 チロシナーゼには、モノフェノラーゼ活性とジフェノラーゼ活性という 2 つの異なる酵素活性があります [30]。 私たちは、キノコチロシナーゼのチロシナーゼ阻害活性の初期研究を実施しました。 このアッセイによると、RFCS は 570 ± 21 ug/mL の IC50 値で強力なチロシナーゼ阻害活性を示しました (表 3)。 リナロール、フェニルエチルアルコール、シトロネロール、ビサボロールなどの揮発性化合物も、用量依存的なチロシナーゼ阻害効果を示し、IC50 値は 730 ± 44 ug/mL、315 ± 13 ug/mL、825 ± 31 ug/mL、およびそれぞれ635±22μg/mL。 すべてのフラボノイド化合物、すなわちヒペロシド、ケンフェロール-3-O-ルチノシド、さらにはルチンもコウジ酸よりも強力であり（80 ± 17 ug/mL）、それらはすべて 1 ug/mL 未満の IC50 値を持っていました。 Solimine による報告と同様、フラボノイド化合物を含む RODW のポリフェノールに富む画分は、IC50 値 0.41 ± 0.01 ug/mL の明らかなチロシナーゼ阻害活性を示します [6]。 一方、RFCS のチロシナーゼ阻害効果は、Pingyin 由来の RODW よりも強力です [13]。 フラボノイド含有量は、RODW の全体的なチロシナーゼ阻害効果に寄与します。

抗菌作用

さまざまなバラ画分、RFCS、および標準抗生物質 (テトラサイクリンおよび塩酸塩) の抗菌活性研究の結果を表 4 に示します。 F. nucleatum は RFCS に対して最も感受性が高く、MIC 64 ug/mL および MBC 250μg/mL。 アクネ菌および黄色ブドウ球菌の両方に対する RFCS の MIC 値は 125 ug/mL でした。 他の細菌に対する MIC 値は 250 ug/mL でした。 RFCS の抗菌効果の原因となる成分を特定するために、RFCS の 9 つの成分の MIC および MBC または MFC 値が測定されました。 L. ivanovii および F. nucleatum は -bisabolol に対して最も感受性が高いことが判明し、これらの種に対して 8 ug/mL の MIC 値および 32 ug/mL の MBC 値を示しました (表 4)。 -ビサボロールの後、フェニルエチルアルコールは、RFCSのすべての構成成分の中で最も低いMICおよびMBCまたはMFC値を示しました。 全体として、揮発性成分は、RFCS の抗菌活性においてフラボノイド化合物よりも重要な役割を果たしました。

バラのさまざまな画分の抗菌効果に関する以前の研究でも、同様の結果が報告されています [8、28、31]。 エッセンシャル オイルと、水抽出物、エタノール抽出物、クロロホルム抽出物、酢酸エチル画分、ブタノール画分などのバラのさまざまな抽出物は、広範囲の抗菌活性を示します。 酢酸エチル画分を除いて、バラ精油は試験した細菌に対して比較的活性が高い[28]。 ローズのアブソリュート オイルとエッセンシャル オイルには、高レベルのポリフェノールとフェニルエチル アルコールが含まれており、優れた抗菌特性をもたらします [8]。 RODW の揮発性油の含有量は RFCS よりも高いため、RODW の抗菌効果は RFCS より優れています [13]。 ルゴサ茶からのポリフェノールが豊富な画分は、大腸菌および緑膿菌の菌数感知およびバイオフィルム形成を阻害する可能性がある[1]。 リナロール、シトロネロール、ゲラニオールなどのローズオイルの有効成分のいくつかの抗菌効果が確認されています[32、33]。 現在まで、R. Fenghua の RFCS の抗菌活性は評価されていません。 この結果は、フェニルエチルアルコールやその他の揮発性成分の含有量が高いことが、RFCS の抗菌活性に寄与しているという事実を明確に裏付けています [34]。

結論

私たちの研究は、RFCS の強力な抗酸化作用、抗菌作用、およびチロシナーゼ阻害作用を実証しました。 フェニルエチル アルコールのバラのような香りと、腸炎菌亜種腸炎菌、C. アルビカンス、およびアクネ菌に対するチロシナーゼ阻害活性および抗菌効果の組み合わせにより、RFCS は天然の美白およびスキンケア添加剤として使用される可能性があります。化粧品業界で。 さらに、RFCS は、L. ivanovii、S. 亜種、大腸菌、黄色ブドウ球菌に対する抗酸化活性と抗菌効果があるため、食品業界や製薬業界で天然の防腐剤および抗菌剤として使用できます。

謝辞

RFCS を提供してくださった平銀の Fragrant Rose Biological Technology Co., LTD に感謝します。

資金調達

この研究は、高麗人参植林資源収集とイノベーション (番号 20151FDA31290) の支援を受けました。

データと資料の入手可能性

現在の研究中に使用および/または分析されたデータセットは、合理的な要求に応じて責任著者から入手できます。

著者の寄稿

GR、GZ、PX がこの研究を考案しました。 GR と GZ はデータ収集とデータ入力を担当しました。 PX と XS はデータを分析し、原稿を執筆しました。 著者全員が最終原稿を読んで承認しました。

倫理の承認と参加への同意

この章には、著者らによって行われた人間の参加者または動物を対象とした研究は含まれておらず、インフォームドコンセントも必要ありません。

掲載の同意

適用できない。

競合する利益

著者らは、競合する利益を持たないことを宣言します。

発行者注記

シュプリンガー・ネイチャーは、発行された地図における管轄権の主張や所属機関については中立を保っています。

参考文献

1. Zhang JM、Rui X、Wang L、Guan Y、Sun XM、Dong MS。 ハマナス茶からのポリフェノール抽出物は、細菌のクオラムセンシングとバイオフィルムの形成を阻害します。 食品管理。 2014;42:125–31。

2. トゥルスン X、チャオ YX、タラート Z、シン XL、トゥルスン A、アブドゥラ R、アクバー AH。 リポ多糖類刺激された RAW264.7 マクロファージにおけるハマナスの花抽出物の抗炎症効果。 バイオモル サー。 2016;24:184–90。

3. タオNP、ルエンBTT、タイBH、ヤンSY、ジョーSH、クオンNX、ナムNH、クォンYI、ミンCV、キムYH。 ロサ・ルゴサ・トゥンブの根由来の成分のラット腸スクラーゼ阻害。 Bioorg Med Chem Lett. 2014;24:1192–6。

4. Lee HJ、Ahn JW、Lee BJ、Moon SG、Seo Y. ハマナスの抗酸化活性。 Ksbb J. 2004;19:67–71。

5. Kovacheva N、Rusanov K、Atanassov I. 21 世紀のブルガリアにおける含油バラの工業的栽培とバラ油生産、方向性と課題。 バイオテクノロジー バイオテック Eq. 2010;24:1793–8。

6. Solimine J、Garo E、Wedler J、Rusanov K、Fertig O、Hamburger M、Atanassov I、Butterweck V. ローズ油蒸留廃水のポリフェノール富化画分からのチロシナーゼ阻害成分。 フィトテラピア。 2016;108:13–9。

7. キャロウェイ TR、エドリントン TS、アンダーソン RC、バード JA、ニスベット DJ。 サルモネラ菌に関連した胃腸微生物の生態と食品供給の安全性。 J Anim Sci. 2008;86:163–72。

8. Shohayeb M、Abdel-Hameed ESS、Bazaid SA、Magrabi I. ダマスクバラの抗菌および抗真菌活性 MILL。エッセンシャル オイル、バラの花びらのさまざまな抽出物。 グローバルJファーマック 2014;8:01–7。

9. Kim S、Lee S、Gwak K、Lee J、Choi I. スギ精油の美白効果と抗酸化作用。 プランタメッド。 2011;77:1301。

10. ペク SH、ナム IJ、クァク HS、キム KC、イ SH。 リソソーム分解機構を介したエウリュアレ・フェロックス種子抽出物の酢酸エチル画分の細胞の抗メラニン形成効果。 Int J Mol Sci. 2015;16:9217–35。

11. ノ JS、ハン JY、キム JH、ファン JK。 ベニバナ (Carthamus tinctorius L.) 種子から単離された活性化合物のメラニン生成阻害効果。 バイオルファームブル。 2004;27:1976–8。

12. 高木 A、山本 K. 肝細胞癌における酸化ストレスの制御: 有用か有害か? ワールドJヘパトール。 2015;7:968–79。

13. Xue P、Sun XY、Zhang WY、Wang QC、Ren GX。 RODW の植物化学成分、抗酸化作用、抗菌作用、チロシナーゼ阻害作用。 現代の食品科学技術。 2017;33:105–10。

14. ブリールMM. 生から死に至るまでの人間の健康における酸素 - 大学院生や医学生に酸化還元生物学とシグナル伝達を教えるためのアプローチ。 レドックスバイオ。 2015;5:124–39。

15. エリンズワースDC。 ヒ素、活性酸素、内皮機能不全。 J Pharmacol Exp Ther. 2015;353:458–64。

16. Balaguer A、Chisvert A、Salvador A. 美白化粧品に含まれるアスコルビン酸とその誘導体の同時測定用の環境に優しい LC。 J Sep Sci. 2008;31:229–36。

17. ファウォルOA、マクンガNP、オパラUL。 ザクロ果実皮メタノール抽出物の抗菌、抗酸化、チロシナーゼ阻害活性。 BMC 補体代替医療。 2012;12:1–11。

18. パク・KM、クォン・KM、リー・SH。 菌糸体培養抽出物からの抗酸化活性とチロシナーゼ阻害特性の評価。 Evid に基づく Compl Alt Med。 2015;2015:616298–304。

19. Thaipong K、Boonprakob U、Crosby K. グアバ果実抽出物からの抗酸化活性を推定するための ABTS、DPPH、FRAP、および ORAC アッセイの比較。 Jフードコンポのアナル。 2006;19:669–75。

20. Xue P、Yao Y、Yang XS、Feng J、Ren GX。 高麗人参エキスの熱変形による抗菌効果の向上。 J ギンズ Res. 2016;41:180–7。

21. ルサノフ KE、コバチェワ NM、アタナソフ II。 バラの花と含油バラの蒸留油揮発分の比較 gc/ms 分析。 バイオテクノロジー バイオテック Eq. 2014;25:2210–6。

22. Koksal N、Saribas R、Kafkas E、Aslancan H、Sadighazadi S. hs-spme/GC/ms 技術による最初のローズ油と最初のローズ水の揮発性化合物の定量。 Afr J 伝統的補完代替医療。 2015;1212:145–50。

23. Mahboubifar M、Shahabipour S、Javidnia K. イランのローズウォーターに含まれる貴重な酸素含有成分の評価。 インターン Int J Chemtech Res. 2014;6:4782–8。

24. Lei G、Wang L、Liu X、Zhang A. ローズ水中のフェニルエチルアルコールの高速定量、および中国南東部および中国南東部のローズ水と油の化学プロファイル。 J Liq Chromatogr Rela Tech. 2015;38:823–32。

25. ウォン・PY、キッツDD。 パセリ (ペトロセリナム クリスプム) とコリアンダー (Coriandrum sativum) 抽出物の二重の抗酸化特性と抗菌特性に関する研究。 食品化学。 2006;97:505–15。

26. Li L、Ham H、Sung J、Kim Y、Lee H. 4 つの異なるバラ品種からのメタノール抽出物の抗酸化活性。 J 食品栄養研究所 2014;2:69–73。

27. Netzel M、Strass G、Bitsch I、Konitz R、Christmann M、Bitsch R. 赤ワイン中の選択された抗酸化フェノール類に対するブドウ加工の影響。 J 食品工学 2003年; 56:223–8。

28. ジュ SS、キム YB、リー DI。 白いバラの花からの二次代謝産物の抗菌性と抗酸化性。 Plant Pathol J. 2010;26:57–62。

29. Saanchez-Ferrer A、Rodríguez-López JN、García-Cánova F、García-Carmona F. チロシナーゼ：そのメカニズムの包括的なレビュー。 Bioch Et Biophy Acta。 1995;1247:1–11。

30. Kim YJ、Uyama H. 天然および合成源からのチロシナーゼ阻害剤: 構造、阻害メカニズム、および将来への展望。 セルモルライフサイエンス。 2005;62:1707–23。

31. Said BOS、Haddadi-Guemghar H、Boulekbache-Makhlouf L、Rigou P、Remini H、Adjaoud A. ユーカリ グロブルス果実の水素蒸留抽出物の精油組成、抗菌作用および抗酸化作用。 インダストリアル・クロップ・プロダクション 2016;89:167–75。

32. アリドガン BC、バイダー H、カヤ S、デミルシ M、マムカム E。いくつかのエッセンシャル オイルの抗菌活性と化学組成。 アーチ製薬研究所 2002;25:860–4。

33. Gochev V、Wlcek K、Buchbauer G、Stoyanova A、Dobreva A、Schmidt E、Jirovetz L. さまざまな地理的起源のローズ油、特にブルガリア産ローズ油の抗菌活性と組成の比較評価。 ナットプロッドコミューン。 2008;3:1063–8。

34. Etschmann MMW、Bluemke W、Sell D、Schrader J. 2-フェニルエタノールのバイオテクノロジーによる生産。 Appl Microbiol Biot. 2002;59:1–8。