概要：

最近の研究では、プルンバジンには抗炎症作用、抗アレルギー作用、抗菌作用、抗がん作用があることが示されています。 しかし、プルンバジンがαメラノサイト刺激ホルモン（-MSH）誘発性のメラニン合成を抑制して色素沈着過剰を防ぐかどうかはまだ示されていません。 この研究では、プルンバジンが B16F10 マウス黒色腫細胞における -MSH 刺激メラニン合成を有意に抑制することを実証しました。 メラニン合成に対するプルンバギンの阻害機構を理解するために、細胞または無細胞チロシナーゼ活性アッセイを実施し、メラニン生成関連遺伝子発現を分析しました。 われわれは、プルンバギンが、小眼球症関連転写因子（MITF）、チロシナーゼ（TYR）、チロシナーゼ関連タンパク質1（TYRP1）などのメラニン生成に関連する転写機構とは独立してチロシナーゼ活性を直接抑制することを実証した。 また、スキンケア化粧品の使用によって損傷を受ける可能性のある正常ヒト角化細胞（HaCaT）および水晶体上皮細胞（B3）に対して、プルンバジンが毒性があるかどうかも調査しました。 驚くべきことに、より低いプルンバギン濃度 (0.5 ～ 1 μM) はメラニン合成とチロシナーゼ活性を効果的に阻害しましたが、ケラチノサイト、水晶体上皮細胞、および B16F10 マウス黒色腫細胞では毒性を引き起こさず、プルンバギンが皮膚適用に安全であることを示唆しています。 総合すると、これらの結果は、色素沈着に対するプルンバギンの抑制効果により、プルンバギンが美白用のスキンケア化粧品配合物に使用するのに許容され安全な成分となる可能性があることを示唆しています。

関連する研究によると、カンサスは「寿命を延ばす奇跡のハーブ」として知られる一般的なハーブです。 主成分はシスタノシドで、抗酸化作用、抗炎症作用、免疫機能促進作用などさまざまな作用があります。 シスタンケと美白のメカニズムは、シスタンケ配糖体の抗酸化作用にあります。 人間の皮膚のメラニンはチロシナーゼによるチロシンの酸化によって生成されますが、その酸化反応には酸素の関与が必要となるため、体内の酸素フリーラジカルはメラニン生成に影響を与える重要な因子となります。 シスタンケには抗酸化物質であるシスタノシドが含まれており、体内のフリーラジカルの生成を減らし、メラニンの生成を抑制します。

ホワイトニングにはCistanche bienfaitsをクリックしてください

詳細については:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

キーワード:プラムバジン。 メラニン生成; 色素沈着; チロシナーゼ

1. はじめに

メラニンは、表皮メラノサイトで合成される一群の色素で構成され、紫外線 (UV) 放射線による損傷から皮膚を守る上で重要な役割を果たします [1]。 異常なメラニン形成（メラニン生成の増加または減少）は、黒色腫や肝斑やそばかすなどの色素沈着疾患を含むいくつかの皮膚疾患と密接に関連しています[2、3]。 メラニンの生合成は、UV 照射、炎症性サイトカイン、ホルモンシグナル伝達などの複数の刺激によって開始されます。 具体的には、UVに曝露されたケラチノサイトから放出される-メラノサイト刺激ホルモン（-MSH）は、cAMP-PKA-CREB（環状アデノシン一リン酸プロテインキナーゼA-cAMP応答エレメント結合タンパク質）軸を活性化することにより、表皮メラノサイトにおけるメラニン生合成を刺激します[3]。 。 活性化された cAMP-PKA-CREB ​​軸は、小眼球症関連転写因子 (MITF) をコードする mRNA の増加をもたらします。 MITF は、メラノサイトにおける -MSH 刺激により、チロシナーゼ (TYR)、チロシナーゼ関連タンパク質 2 (TYRP1)、およびチロシナーゼ関連タンパク質 2 (TYRP2) の遺伝子発現を増加させます [3,4]。 さらに、マイトジェン活性化プロテインキナーゼ (MAPK)、細胞外応答キナーゼ (ERK)、AKT など、細胞増殖を制御する多くのシグナル伝達経路は、MITF の安定性と活性を制御することによってメラニン生成に不可欠です [5]。

多機能銅含有オキシダーゼである酵素チロシナーゼは、L-チロシンが水酸化されてL-ジヒドロキシフェニルアラニン（L-DOPA）になり、L-DOPAが酸化されてo-キノン（ドーパキノン）になる反応を触媒することにより、メラニン生合成において重要な役割を果たします。 ) [5,6]。 したがって、一部のチロシナーゼ阻害剤はメラニン生合成も阻害します。これらには、美白化粧品用途に使用されているレスベラトロール、アルブチン、ホノキオールが含まれます[7]。

プルンバギンは単純なヒドロキシル-ナフトキノンであり、プルンバゴ属の植物の根から最初に抽出され、顕著な薬効があることが示されています[8]。 プルンバギンの抗炎症作用、抗がん作用、抗アレルギー作用、抗菌作用が報告されています[8、9]。 実際、プルンバギンはトポイソメラーゼ II を抑制することで好中球の活性化、血管新生、コラゲナーゼの発現を抑制することが報告されており、関節リウマチの治療における潜在的な薬剤としてプルンバジンの使用が示唆されています [10]。 さらに、いくつかの報告では、プルンバジンが乳がん [11]、前立腺がん [12]、卵巣がん [13]、肺がん [14]、皮膚がん [15]、肝臓がんなどの複数の種類のがんに対して抗がん活性を示すことが示されています。 [16]。 プルンバジンがさまざまなヒト疾患の治療介入として有用である可能性があることが明らかになりつつあるが、色素沈着過剰に関連するメラニン形成に対するプルンバジンの阻害効果はこれまで報告されていない。

2. 結果

2.1. B16F10 マウス黒色腫細胞におけるプルンバジンの化学構造と細胞毒性効果

プルンバギンの抗メラニン形成効果を研究する前に、我々はまずメラニンを産生する B16F10 マウス黒色腫細胞におけるその毒性を評価しました。 プルムバジンの化学構造を図 1A に示します。 5 μM 未満のプルンバジン濃度が B16F10 細胞の細胞生存率に影響を及ぼさなかった細胞毒性アッセイの結果を図 1B に示します。

2.2. プルンバギンはB16F10マウス黒色腫細胞におけるMSH誘発性メラニン合成を抑制する

次に、B16F10細胞における-メラノサイト刺激ホルモン（-MSH）誘発メラニン合成に対するプルンバジンの阻害効果を調べました。 我々は、プルンバジンが B16F10 細胞の培養培地における -MSH 誘発メラニン蓄積を強力に抑制することを実証しました (図 2A)。 -MSH誘導メラニン合成に対するプルンバジンの阻害効果を確認するために、-MSH刺激したB16F10細胞におけるプルンバジンの非存在下または存在下での細胞外または細胞内のメラニン含有量を測定しました。 図 2B および C は、プルンバギンが細胞外および細胞内のメラニン含有量を大幅に減少させることを示しています。

2.3. プランバジンはMSH誘導性メラニン生成遺伝子発現とシグナル伝達カスケードを調節しない

小眼球症関連転写因子（MITF）は、-MSH-PKA-CREB ​​軸を介してメラニン形成関連遺伝子発現を調節する必須の転写因子であるため、プルンバギンがメラニン形成に関連する MITF 媒介遺伝子発現を調節できるかどうかを調査しました。 まず、-MSH 刺激下での MITF、チロシナーゼ (TYR)、およびチロシナーゼ関連タンパク質 1 (TYRP1) のメラニン生成遺伝子発現が最大になる時点を決定しました。 MITF は、2 時間の -MSH 処理後に強く上方制御されます (図 3A)。 TYR および TYRP1 は、-MSH 処理の 48 時間後に劇的に上方制御されました (図 3A)。 MITF およびチロシナーゼタンパク質レベルは、-MSH 処理に応答して増加しましたが、プルンバジン処理によっては抑制されませんでした (図 3B)。 一貫して、プルンバジンは、-MSH 刺激後に MITF、TYR、および TYRP1 mRNA レベルを阻害しなかった。これは、プルンバギンが B16F10 細胞におけるメラニン生成遺伝子発現に関連する転写機構を調節しないことを示唆している (図 3C)。 メラニン生成には、AKT、ERK1/2、および CREB ​​(メラニン生成を調節する主要なシグナル伝達カスケード) のリン酸化と活性化が必要であるため [3]、我々は、プルンバギンがこれらのメラニン生成に関連するシグナル伝達経路を調節するかどうかをさらに調査しました。 図3Dに示す我々の結果は、プルムバギンが-MSH処理後にAKT、ERK1/2、またはCREBシグナル伝達を変化させないことを示しています。

2.4. プランバジンはチロシナーゼ活性を阻害します

直接的または間接的にチロシナーゼを阻害する天然物が美白化粧品の開発に有用である可能性があることは明らかであるため、次に我々は、チロシナーゼ酵素活性に対するプルンバギンの阻害効果を調査した。 この研究では、プルンバギンが B16F10 細胞における -MSH 誘導性の細胞チロシナーゼ酵素活性を有意に抑制することを実証しました (図 4A)。 プルンバジンがチロシナーゼ活性を直接的または間接的に阻害するかどうかを理解するために、無細胞チロシナーゼ活性を測定しました。 プルンバジンはキノコ由来チロシナーゼの L-DOPA 酸化活性も強力に阻害するため、プルンバジンがチロシナーゼ活性を直接阻害することでメラニン生成を抑制することが示唆されます (図 4B)。 さらに、1,1-ジフェニル-2-ピクリルヒドラジル (DPPH) アッセイを使用したラジカル消去活性の大幅な上昇が、0 の範囲の濃度のビタミン C およびプルンバギンで処理したサンプルで観察されました。1 5mg/mLまで。 その結果、5 mg/mL のプルムバジンは、ラジカル消去活性に対して 0.1 mg/mL のビタミン C と同様の効果を示しました (図 4C)。

2.5. プルンバギンは正常な角化細胞および水晶体上皮細胞には毒性がありません

スキンクリームなどの化粧品は外用であり、細胞毒性により皮膚障害を引き起こす可能性があるため、プルンバギンが正常角化細胞（HaCaT）や水晶体上皮細胞（B3）に対して毒性があるかどうか、また美白効果の発現に有用であるかどうかをさらに検討しました。化粧品。 その結果、プルンバジン濃度が低い (1 ～ 5 μM) と HaCaT 細胞および B3 細胞に毒性は引き起こされないが、メラニン合成の阻害には効果があることがわかりました (図 5A)。 さらに、プルンバジンは、HaCaT 細胞および B3 細胞において、DNA 損傷に関連する H2AX を誘導せず、細胞アポトーシス関連のポリ (ADP リボース) ポリメラーゼ (PARP) およびカスパーゼ-3 タンパク質を減少させませんでした (図 5B)。皮膚毒性を示さずに美白製品への使用が許容される

詳細については: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501