概要

背景: ローヤル ゼリーはメラニン合成を減少させ、メラニン生成関連タンパク質と遺伝子の発現を阻害することが報告されています。 この研究では、Apis mellifera のローヤル ゼリーに含まれる10-ヒドロキシ-2-デカン酸 (10-HDA) の抗メラニン生成作用と脱色素作用を評価します。

いくつかの研究では次のことが示唆されていますカンクン皮膚の老化を防ぐのに役立つ可能性があります酸化ストレスの軽減と炎症、どちらも貢献できるシワ, ダークスポット、その他の老化の兆候。 ただし、かどうかは不明カンクンできる肌を明るくするまた色素沈着を軽減する。 つまり、カンカンケには皮膚に有益な効果がある可能性がありますが、信頼できる効果があるかどうかは不明です。美白エージェント。 安全で効果的な肌のお手入れ方法については、皮膚科医に相談してアドバイスを受けることが常に最善です。

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詳細については:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

方法:この研究では、{{0}} HDA の美白活性を、{{4 による治療後の B16F1 黒色腫細胞における細胞内チロシナーゼ活性、メラニン含有量、メラニン生成関連タンパク質レベルの変化と比較して評価します。 }}HDA。 さらに、0.5パーセント、1パーセント、2パーセントの10-HDAを含むクリーム製品をマウス（C57BL/6J）の皮膚に3週間塗布し、DLの効果を観察することで美白効果を評価しました。 *-値。

結果：結果は、10-HDA が B16F1 黒色腫細胞における MITF タンパク質発現 (IC50 0.86 mM) を阻害することを示しました。 ウェスタンブロット分析により、10-HDA がチロシナーゼの活性とチロシナーゼ関連タンパク質 1 (TRP-1)、TRP-2、および小眼球症関連転写因子 (MITF) の発現を阻害することが明らかになりました。 B16F1黒色腫細胞において。 さらに、マウスの皮膚に塗布された 10- HDA は、平均皮膚美白指数 (L 値) の大幅な増加を示しました。

結論:検証データは、10-HDA が皮膚の色素沈着の抑制に使用できる可能性を示しました。 10-HDA はメラニン生成を阻害する候補として提案されているため、化粧品スキンケア製品として開発される可能性があります。

キーワード:ローヤル ゼリー、10-ヒドロキシ-2-デカン酸、メラニン生成、美白、メラニン生成阻害剤

バックグラウンド

ローヤル ゼリー (RJ) は、若い働きバチ (Apis mellifera) が下咽頭腺と下顎腺によって生成する分泌物で、発育中の女王バチには生涯にわたってローヤル ゼリーのみが与えられました [1]。 RJ は、豊富な量のタンパク質、遊離アミノ酸、脂質、ビタミン、糖分により高い栄養価を提供します [2、3]。 RJ の生理活性タンパク質は、主要なローヤル ゼリー タンパク質 (MRJP)、アピシミン、およびローヤライジングであり、これらはいくつかの研究で免疫調節効果と抗菌効果が示されています [4-6]。 10-ヒドロキシ-2- デカン酸 (10-HDA) は、人間にとっていくつかの健康に有益な効果を持つ RJ の主要な脂肪酸であり、抗腫瘍、抗菌、免疫調節活性が実証されています [7 -9]。 10-HDA は RJ でのみ見つかるため、ローヤル ゼリー製品の品質マーカーとして使用されています [10、11]。 RJ のいくつかの薬理活性は動物実験によってすでに確認されており、抗酸化 [12、13]、抗炎症 [14]、抗腫瘍 [15、16]、抗老化 [17]、抗菌作用 [18-20]、血管拡張作用 [21、22]、高血圧作用 [21、22]、抗高コレステロール血症作用 [23]、腎保護作用 [24]、美白作用 [25]。 その栄養価と人間の健康への利点に基づいて、市場で入手可能な市販の RJ 製品がますます増えています。

動物や人間の肌の色は、皮膚のメラニン色素の含有量と関係しています。 メラニンの役割は、紫外線によるダメージから皮膚を保護することですが、メラニンの過剰な蓄積は、変色や色素沈着などの深刻な皮膚障害を引き起こし、皮膚の老化を促進します[26]。 メラニンは、メラニン生成機構を介して表皮の最内層に位置するメラノサイトで合成されました[27]。 メラニン生成は、チロシナーゼ、チロシナーゼ関連タンパク質 1 および 2 (TRP-1 および TRP-2)、および小眼球症関連転写因子 (MITF) によって制御される複雑な生合成経路です [28、29]。 チロシナーゼは、メラニンの合成を制御する律速酵素です。 メラニン生成の最初のステップは、L-チロシンのL-3、4-ジヒドロキシフェニルアラニン（L-DOPA）へのヒドロキシル化と、L-DOPAのドーパキノンへの変換です[30]。 TRP-2 は、ドーパクロムから変換された 5,6- ジヒドロキシ インドール カルボン酸の生成と、TRP-2, 5,6- ジヒドロキシ インドール カルボン酸の生成物を触媒します。 TRPの基質-1はインドール-5、6-キノンカルボン酸に変換され、最終的にメラニン合成をもたらします[31、32]。 メラニン形成を阻害することによってメラニン合成を阻害することは、肝斑やシミなどの色素沈着過剰疾患を予防または改善するための主要な方法となるでしょう。 したがって、メラニン生成におけるこれらの因子を下方制御する可能性があり、安全で効果的な化合物を探索することは、医療および化粧品業界で注目されるであろう[25、33、34]。

ローヤル ゼリーはメラニン合成を減少させる可能性があることが実証されています [22]が、主要な活性化合物や RJ のこれらの活性の根底にあるメカニズムは不明のままです。 私たちの以前の研究では、10-HDA がチロシナーゼ活性を阻害する可能性があることがわかりました (未発表データ)。 この研究では、10-HDA によるチロシナーゼ阻害効果がさらに評価されました。 B16F10 黒色腫細胞培養を使用した in vitro メラニン生合成モデルと皮膚に適用したマウスの動物モデルの両方を実行して、10- HDA のメラニン生成阻害効果を調査しました。

メソッド

ローヤルゼリーからの10-HDAの調製

ローヤルゼリーは台湾の花蓮市の富昌養蜂所で製造されました。 3-日齢の幼虫をフレーム上のクイーンセルカップに移し、各フレームには3つの0クイーンカップが含まれていました。 フレームを蜂の巣に移し、幼虫を移してから 72 時間後に RJ を収集しました。 各巣箱には約 25,000 匹のミツバチがいます [35]。 収集された RJ サンプルは、さらなる分析まで -20 度に保たれました。 ローヤルゼリー (40 g) をメタノールで還流し (400 mL × 4 × 30 分)、4500 xg で 30 分間遠心分離して上清を回収しました。 上清を減圧下で濃縮し、ＲＪＭと名付けた粗抽出物（１０．７６ｇ）を得た。 メタノールに懸濁したＲＪＭをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２ ＣＣ）で精製し、クロロホルムとメタノールの勾配（３００：１から１：１）で溶出し、ＴＬＣで分析した１０個の画分を得た。 フラクション 4 および 5 には顕著なスポットが表示されたため、さらなる精製と分析を行いました。 画分 4 と 5 を SiO2 CC で繰り返し精製し (クロロホルム/メタノール、300:1 から 1:1 で溶出)、さらにアセトンで結晶化して、10-ヒドロキシ-2-デカン酸 ({{32} }HDA)。 精製された生成物の化学構造は、NMR および GC 質量スペクトル分析によって確認されました。 10- HDA の定量分析は、Water 2489 検出器、RP-8 GP250 カラム (4.6 mm)、および Waters フィルターを備えた Waters 1525 ポンプ システムを使用した高速液体クロマトグラフィー (HPLC) によって決定されました。 717plus オートサンプラー。 移動相は、リン酸でpH 2.5に調整したメタノール溶液(超純水と脱イオン水で60:40 v/v)であり、膜(0.45μm)で濾過し、5分間脱気した。 移動相の流量は 1.0 mL/min に調整され、検出は 225 nm で実行されました。 最終精製サンプル中の 10HDA の含有量は 90% であり、これはさらなる分析に使用されます。

細胞培養と 10-HDA 処理

B16F10 黒色腫細胞 (BCRC 番号: 60,031) を、10 パーセント (v/v) ウシ胎児血清を添加したダルベッコ改変イーグル培地 (DMEM) 中で、加湿された CO2- 制御 (5 パーセント) インキュベーター内で 37 度で培養しました。 。 細胞は、24- ウェルまたは 6- ウェル プレートに適切な細胞密度で播種されました。 1 日間のインキュベーション後、細胞をさまざまな濃度の 10-HDA で処理しました。 対照群では、10-HDA の代わりに培地を使用しました。 その後、細胞を回収し、さまざまなアッセイに使用しました。

細胞生存率の測定

細胞生存率は、{{0}}(4,5-ジメチルチアゾール-2- イル)-2、5 - 臭化ジフェニルテトラゾリウム (MTT) アッセイによって測定されました。 Carmichaelらによって報告された方法。 [36]。 B16F10 黒色腫細胞は、10 パーセントの FBS と 1 パーセントの L-グルタミン (4 mM) を含む DMEM 中で、5 パーセントの CO2 インキュベーター内で 37 度で培養されました。 培養細胞（1×104細胞/ウェル）を96-ウェルプレートに播種し、10-HDA（ジメチルスルホキシド（DMSO）に溶解）を培地で1、0.5、0.1の濃度で希釈しました。 ｍＭおよびコウジ酸１ｍＭをウェルに添加した。 媒体をブランクとして使用した。 ５パーセントＣＯ２下、３７度で｛２６｝時間インキュベートした後、培地を各ウェルから除去し、次いでウェルをＰＢＳ（１Ｍリン酸緩衝生理食塩水）で２回洗浄した。 ２００μｌのＭＴＴ溶液（２ｍｇ／ｍｌ）を各ウェルに添加した。 4-時間のインキュベーション後、100μLのDMSOを添加することによって反応を停止させた。 各ウェルの吸光度は、イムノアッセイリーダー (BIO-TEK、バーモント州ウィヌースキー) を使用して 540 nm で測定されました [20-23]。 細胞生存率は次の方程式によって決定されました: 細胞生存率 (パーセント)=[(AB)/C] × 100 パーセント、A: サンプル吸光量、B: ブランク吸光量、C: コントロール吸光量。

細胞のメラニン含有量の測定

B16F10 黒色腫細胞の細胞内メラニン含有量は、Bilodeau et al. [37] によって記載された修正方法を使用して測定されました。 B16F10 黒色腫細胞の培養の終了時に、細胞を回収し、PBS で洗浄しました。 収集した細胞を冷溶解バッファー (20 mM リン酸ナトリウム (pH 6.8)、1 パーセント Triton X-100、1 mM フェニルメチルスルホニルフルオリド (PMSF)、1 mM エチレンジアミン四酢酸 (EDTA)) で溶解しました。 15,000×gで30分間遠心分離した後、ペレットを20パーセントDMSOを含む1N NaOHに60度で1時間溶解した。 上清中のタンパク質含量は、ブラッドフォードアッセイを使用して測定されました。 405 nm での吸光度を測定し、既知の合成メラニン標準に対してメラニン含有量を計算しました。 メラニンレベル (パーセント)=[(AB)/C] × 100 パーセント; A: サンプルの吸光度。 B: ブランク吸光度ボリューム。 C: 吸光度のボリュームを制御します。

細胞チロシナーゼ活性の測定

チロシナーゼ活性アッセイは、Martinez-Esparza et al. [38] によって以前に記載された方法に若干の変更を加えた方法に従って実行されました。 B16F10 黒色腫細胞を 20 mM リン酸ナトリウム (pH 6.8)、1 パーセントの Triton X-100、および 1 mM フッ化フェニルメタンスルホニルまたは PMSF で溶解し、14000 rpm で 15 分間遠心分離しました。 各上清のタンパク質含量は、タンパク質標準としてウシ血清アルブミン (BSA) を用いたブラッドフォード アッセイを使用して決定されました。 チロシナーゼ活性は、50 mM リン酸緩衝液 (pH 6.8)、2 mM L DOPA、および 300 μg 上清タンパク質を含む反応混合物 (1 mL) 中で測定しました。 37℃で15分間インキュベートした後、マイクロプレートリーダーを使用して475nmでの吸光度を測定した。 チロシナーゼ活性 (パーセント)=[(AB)/C] × 100 パーセント; A: サンプルの吸光度。 B: ブランク吸光度ボリューム。 C: 吸光度のボリュームを制御します。

ウェスタンブロット分析

細胞を氷冷したPBSで3回洗浄し、RIPA緩衝液（pH 7.4、50 mM tris、0.1パーセントSDS、50 mM NaCl、1パーセントNP-40、1 mM PMSF、 10 ug/mL アプロチニンおよび 10 ug/mL ロイペプチン）。 溶解物のアリコートを使用して、標準としてウシ血清アルブミンを使用するブラッドフォードアッセイ法によりタンパク質含量を決定した。 タンパク質（４０μｇ）を１０パーセントＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳動で分離し、Ｈｙｂｏｎｄ－Ｃ Ｅｘｔｒａニトロセルロース膜（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、ＵＫ）上にブロットした。 膜を、10 mM Tris-HCl、pH 7.5、および150 mM NaClを含むトリス緩衝生理食塩水（TBS）中の5パーセントの無脂肪乳で30分間ブロックした。 MITF、チロシナーゼ、ドーパクロム トートメラーゼ 2 (TRP-2)、TRP-1、および -actin (内部対照として) をそれぞれウサギ ポリクローナル抗体を使用して検出しました。 膜をウサギ IgG-H&L に対するヤギ ポリクローナル二次抗体 (HRP) とさらにインキュベートしました。 次いで、結合したすべての抗体を、Super Signal® West Pico 化学発光基質 (ECL) (Thermo Scientific) を使用して検出しました。 各バンドのシグナル強度は、積分器を備えた濃度計システム Gel Doc TM / Chemi Doc TM Universal Hood II (Bio-Rad) で定量化し、内部コントロールのシグナル強度で正規化しました。

マウスにおける脱色素活性の測定

色素脱失活性は、Tai et al.の修正プロトコールによりマウスモデルシステムを介してアッセイされました。 [39]。 この研究は国立フォルモサ大学の倫理委員会によって承認されました（承認番号: 10,401）。 体重 20 ～ 25 g の生後 5 週間のメスのブラックマウス (C57BL/6 J) を台北の国立動物実験センターから購入しました。 すべての実験を通して、動物は一定温度（25度±2度）の空調された部屋に収容され、12時間の明暗サイクルに保たれました。 動物は実験前に 7 日間順応させた。 毛を剃った後、動物には1-日間の休息が与えられました。 10-HDA を含むゲルサンプルは、薬物をワセリンに分散させることによって調製されました。 合計 40 匹のマウスを 5 つのグループに均等に分け、各グループに 0.1 g のワセリン (対照)、ワセリン中の 1 パーセントのコウジ酸、ワセリン中の 0.5 パーセント、1 パーセント、または 2 パーセントの 10-HDA を 1 日 2 回塗抹しました。 。 塗布を 3 週間継続し、高輝度白色光を使用した比色装置である DermaLab® Combo (Cotex Technology、デンマーク) を使用して、毎日同じ皮膚領域の美白指数 (L 値) を測定しました。光源としてLEDを採用。 比色計はコンピュータに接続されています [40]。 L パラメータのみを考慮し、L 値は完全な黒 (L=0) から完全な白 (L=100) までの相対的な明るさでした。 試験物質を塗布する前に、各マウスの皮膚から初期の皮膚美白指数 L 値を測定しました。

統計分析

この研究のすべての結果は、Statistical Analysis System ソフトウェア パッケージ バージョン 9.1 (Statistical Analysis System Institute、2002) から入手可能な一般線形モデル手順を使用して分析されました。 ダンカンの多重範囲テスト [41] を使用して、治療の平均値間の差異を検出しました。 各実験は３回繰り返して実施した。

結果

B16F1 黒色腫細胞の生存率に対する 10-HDA の効果

B16F1 黒色腫細胞における MTT による細胞生存率アッセイからの最適用量を図 1 に示します。これは、10-HDA が 0.1、{ {8}}.5、および 1 mM、コウジ酸は 1 mM の濃度では黒色腫細胞に対して細胞毒性を示さなかった。 1.5 mM 10- HDA (P < 0.05) (データ示さず) および 5 mMコウジ酸。 したがって、0.1、0.5、1 mMの濃度の10-HDAおよび1 mMのコウジ酸をその後の実験に適用しました。

10-HDAによるB16F10黒色腫細胞におけるチロシナーゼ活性とメラニン合成の阻害

コウジ酸は効果的でよく知られた抗メラニン生成剤であり、この研究ではポジティブコントロールとして使用されました。 10-HDA は、未処理の B16F1 黒色腫細胞のコントロールと比較して、メラニン合成とチロシナーゼ活性を有意に (p < 0.05) 抑制しました。 1 mM の用量で、10- HDA は細胞チロシナーゼ活性の 28 ± 2.4 パーセントの低下 (P < 0.01) および 40.4 ± 3 の低下を誘導しました。細胞のメラニン合成は.{32}}パーセント減少しましたが（P < 0.001）、コウジ酸（1 mM）もチロシナーゼ活性とメラニン合成を14.4 ± 3.7 パーセント（P < 0.05）および19.3 ± 1.5 パーセント（P < 0.001)、それぞれ (図 2 および 3)。

10-HDA による B16F10 黒色腫細胞におけるチロシナーゼ、TRP-1、および TRP-2 タンパク質発現の抑制

10- HDA がメラニン生成タンパク質の発現に影響を与えるかどうかを調べるために、10- HDA で処理した B16F10 メラノーマ細胞の溶解物を使用してウェスタンブロット分析を実施しました (図 4)。 10-HDA は、未処理細胞と比較して、B16F1 黒色腫細胞におけるチロシナーゼ、TRP-1、および TRP-2 の発現を劇的に阻害しました（図 4b-d）。 内部対照として使用されたハウスキーピングタンパク質であるβアクチンは変化を示さなかった。 10-HDA は、コウジ酸と同様にメラニン生成酵素のタンパク質発現レベルを阻害しました。

B16F10 細胞のメラニン生成因子に関連するタンパク質レベルに対する 10-HDA の阻害効果

哺乳動物細胞におけるメラニン形成の過程において、MITFは、TYR、TRP{{0}、およびTRP-2を含むTRP経路の合成において主要な調節因子の役割を果たします[25、26]。 MITF 発現に対する 10-HDA の効果は、ウェスタンブロッティングを使用して評価されました。 B16F1{{10}} 黒色腫細胞をさまざまな濃度の 10- HDA (0.1、0.5、および 1 mM) に曝露したところ、10- HAD (図4e)。 10-HDA による MITF 発現抑制の IC50 値は 0.86 mM と推定されました。 今回の結果は、MITF タンパク質レベルが 10-HDA によって低下することを示唆しています。 10-HDA の色素沈着低下効果は、下方制御された MITF 遺伝子発現の結果である可能性があり、これにより、チロシナーゼ、TRP-1、および TRP-2 のタンパク質および遺伝子発現が抑制されます。

マウスによる生体内での 10- HDA の脱色素活性の評価

人間への投与量を推測するために、動物モデルとしてマウスを使用し、{{0}}HDA の色素脱失活性を調査しました。 髭剃り後、マウスをワセリン中1パーセントのコウジ酸、0.5パーセント、1パーセント、または2パーセントの10-HDAを含むワセリンで処理し、皮膚美白指数を測定および記録した。 この in vivo 研究では、ポジティブ コントロールとしてコウジ酸を使用しました。 コウジ酸は、皮膚の色素脱失治療薬として世界中で広く使用されています。 治療の最初の週後、対照と比較して、10- HDA で治療したマウスの皮膚の美白度は大幅に増加し、この増加は実験の終了まで続きました。 0.5、1、および 2 パーセントの 10- HDA の色素脱失活性は、1 パーセントのコウジ酸の活性に匹敵しました。 私たちの結果は、10-HDA が 0.5 パーセントという低濃度でマウスの皮膚の美白を大幅に促進できることを明らかにしました (図 5)。 したがって、10-HDA は、皮膚の色素沈着過剰を治療するための美白剤として優れた候補であると考えられます。

議論

メラニン合成は、チロシナーゼ、TRP1、および TRP2 の複雑な酵素カスケードによって制御されます。 メラニン生成関連遺伝子およびタンパク質の阻害の程度は、色素沈着過剰症や化粧品の治療に通常使用される色素脱失剤の有効性において重要な役割を果たします[28]。 メラニン生成に対する 10- HDA の真の阻害効果を解明するために、B16F10 細胞のメラニン含有量と細胞内チロシナーゼ活性を同じ濃度範囲でアッセイしました。 結果を図２〜図４に示す。 図２および３は、｛｝｝ＨＤＡがＢ１６Ｆ１０細胞におけるメラニン合成に対してコウジ酸よりも高い阻害活性を示したことを示した。 データにより、10- HDA が B16F10 黒色腫細胞のメラニン生成をブロックすることが明らかになりました。

哺乳動物のメラノサイトでは、メラニン生成は少なくとも 3 つの調節タンパク質、チロシナーゼ、TRP1、および TRP2 によって支配されています [29]。 10- HDA で処理した B16F10 黒色腫細胞では、TRP-1、TRP-2、および MITF の発現がすべて阻害されました。 MITFは、チロシナーゼ、TRP-1、TRP-2などのメラニン生成酵素の発現を調節する主要な転写因子です[42、43]。 私たちのウェスタンブロッティングデータ（図4）によると、10-HDAで処理した哺乳動物細胞は、チロシナーゼ、TRP-1、TRP-2を含むすべての律速酵素の発現を低下させます。 、メラニン生成プロセス中のメラニンの異常な蓄積を防ぎます。 これらのデータは、10- HDA が MITF 発現を阻害することによってメラニン生成のプロセスを阻害できることを示唆しました。 この研究では、10-HDA が MITF タンパク質、チロシナーゼ、メラニン生成を下方制御することによりメラニン生成を阻害することを実証しました。 MITF発現に対する10-HDAの阻害経路は、MITF発現に影響を及ぼさないコウジ酸、アルブチン、アスコルビン酸などの他のメラニン生成阻害剤とは異なっていました[44、45]。 これは、10-HDA が機能性化粧品の安全で自然な美白剤として使用できる優れた可能性を秘めていることを示唆しています [46]。

皮膚がんである黒色腫は、メラノサイトの悪性転移から発生します。 慢性的に太陽光で損傷した皮膚、粘膜表面、および端部皮膚に発生する黒色腫は、BRAFおよびNRASの過剰活性化[47]、CDKN2A遺伝子座の喪失[48]、MITFの過剰発現[49]、キットの過剰活性化[50]によって引き起こされました。 ]、mGluR1 を過剰に活性化する [51, 52]…et al。 この研究では、10-HDA は B16F10 黒色腫細胞における MITF 発現を阻害することができました。 これは、10-HDA が皮膚薬や黒色腫に対する抗がん剤の成分となる可能性があることを示しています。

RJ は、皮膚のリフレッシュ、皮膚の再生、若返り、火傷による治癒、または創傷治癒を含む多くの皮膚科学的製剤に使用されています [53、54]。 さらに、RJ に含まれる一部の不飽和脂肪酸がメラニン合成とチロシナーゼ活性を阻害し、メラニン生成の下方制御につながる可能性があることが報告されており [55]、我々は RJ の色素脱失効果が {{3 }}HDA。 マウスの皮膚はヒトに似ているため、10-HAD の脱色素活性を調べるための in vivo 動物モデルとしてマウスを使用しました。 図5に示すように、皮膚の色の皮膚美白指数は、対照と比較して、10-HADで治療したマウスで有意に増加しました。 さらに、Koya-Miyata et al. 研究者らは、コラーゲン産生にとって重要な因子であるトランスフォーミング成長因子- 1（TGF- 1）を産生する線維芽細胞株における10-HDAのコラーゲン産生促進活性を評価した[55]。 。 したがって、10-HDA は、皮膚の再生と色素沈着過剰の治療に非常に有望な天然化合物であると考えられます。

結論

10-HDA は、B16F10 黒色腫細胞の MITF を抑制することにより、チロシナーゼ活性だけでなく、チロシナーゼ、TRP-1、TRP-2 などのメラニン生成酵素の発現も阻害しました。 その結果、B16F10 黒色腫細胞ではメラニン色素が減少しました。 さらに、生体内動物モデルは、局所適用における 10- HDA の脱色素作用を示しました。 これらの結果は、10-HDA が化粧品業界にとって安全で天然のメラニン生成阻害剤となり得る候補を持っていることを示唆しています。化粧品業界では、天然で効果的な化合物の探索が、より良いスキンケア製品を開発するための非常に重要な目的の 1 つです。 。

略語

10-HDA: 10-ヒドロキシ-2-デカン酸; BSA: ウシ血清アルブミン。 DMEM: ダルベッコ改変イーグル培地。 DMSO: ジメチルスルホキシド; EDTA: エチレンジアミン四酢酸; L-ドーパ: L-3,4- ジヒドロキシフェニルアラニン; MITF: 小眼球症関連転写因子。 MRJP: 主要なローヤルゼリータンパク質。 MTT: 3-(4,5-ジメチルチアゾール-2-イル)-2、5- ジフェニルテトラゾリウムブロミド; PBS: リン酸緩衝生理食塩水。 ＰＭＳＦ：フェニルメタンスルホニルフルオリドまたはフェニルメチルスルホニルフルオリド； TLC: 薄層クロマトグラフィー。 TRP-1: チロシナーゼ関連タンパク質 1; TRP- 2: チロシナーゼ関連タンパク質 2

謝辞

ローヤルゼリーを準備してくださった富昌養蜂所のリー・リーさんに感謝します。

資金調達

この研究は、台湾科学技術省 (MOST102–2622-B-150-002-CC2 & MOST 103–2313-B-150 -001 -MY2 からCC ペン）。

データと資料の入手可能性

この研究中に生成または分析されたすべてのデータは、この公開された論文とその補足情報ファイルに含まれています。

著者の寄稿

CCP が実験を考案し、設計しました。 HZS と IPL が実験を実行しました。 CCPとPCKはデータを分析した。 CCP、PCK、および JCL が試薬/材料/分析ツールを提供しました。 CCP と IPL が論文を執筆し、改訂しました。 著者全員が原稿の最終版を承認しました。

著者情報

CCP、バイオテクノロジー博士、国立フォルモサ大学バイオテクノロジー学部准教授。 HZS はバイオテクノロジーの修士号を取得し、国立フォルモサ大学バイオテクノロジー学部を卒業しました。 IPL、バイオテクノロジー博士、チャレンジバイオプロダクツ株式会社研究開発部マネージャー PCK、化学博士、国立フォルモサ大学バイオテクノロジー学部准教授。 株式会社ハニービータウン ゼネラルマネージャー JCL

倫理承認

すべての動物実験は国立フォルモサ大学の倫理委員会によって承認され (承認番号: 10,401)、実験動物の管理と使用のガイドラインに準拠しました。

掲載の同意

このセクションでは適用されません。 この論文は人間の参加者を対象とした臨床研究ではなく、この原稿には個別の臨床データは含まれていません。

競合する利益

著者らは競合する利害関係がないと宣言します

発行者注記

シュプリンガー・ネイチャーは、発行された地図における管轄権の主張や所属機関については中立を保っています。

著者詳細

1 台湾雲林市虎尾の国立フォルモサ大学バイオテクノロジー学部。 2 台湾雲林市斗六市の Challenge Bioproducts Co., Ltd. 研究開発部門。 3 Honey Bee Town Co., Ltd.、No.77-2 Huaxi、970 花蓮市、台湾。

受理日: 2017 年 3 月 9 日 受理日: 2017 年 7 月 21 日

オンライン公開: 2017 年 8 月 9 日

参考文献

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